研究目的心血管疾病,尤其是急性心肌梗塞(AMI)會(huì)嚴(yán)重影響人們的健康。動(dòng)脈粥樣硬化是血管內(nèi)斑塊形成的基本病理過程。然而,目前臨床上仍未有有效檢測(cè)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的非侵入性診斷方法。我假設(shè)抗動(dòng)脈粥樣硬化單鏈抗體偶聯(lián)NaNdF4@NaGdF4納米顆粒可以成為臨床檢測(cè)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的非侵入性的診斷方法,以此進(jìn)行單鏈抗體的篩選表征和納米顆粒的合成及偶聯(lián)。研究方法我從青島大學(xué)附屬醫(yī)院急診科收集了50例經(jīng)冠脈造影術(shù)明確診斷的動(dòng)脈粥樣硬化患者的外周動(dòng)脈血,并提取了其總RNA,以此建立了抗體基因庫和抗體噬菌體庫。我從青島大學(xué)附屬醫(yī)院血管外科收集了動(dòng)脈粥樣硬化的組織樣本用于噬菌體淘選。我利用噬菌體酶聯(lián)免疫吸附對(duì)抗體噬菌體庫進(jìn)行了6輪淘選,利用E.coil TOP10大腸桿菌進(jìn)行體外表達(dá),并通過酶聯(lián)免疫吸附和蛋白免疫印記驗(yàn)證篩選的單鏈抗體對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的特異性和親和力。隨后我合成了NaNdF4@NaGdF4納米顆粒,并利用EDC-NHS反應(yīng)將納米顆粒和單鏈抗體進(jìn)行歐聯(lián)進(jìn)而合成雙模態(tài)靶向生物探針,并通過動(dòng)態(tài)光散射和電鏡分析偶聯(lián)探針的溶液分散度和大小。最后利用ApoE基因敲除小鼠構(gòu)建動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型,進(jìn)而...

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
材料與方法
    1、樣本收集與RNA提取
    2、單鏈抗體基因文庫的構(gòu)建
    3、ScFv噬菌體文庫的構(gòu)建
    4、ASA6 scFv的表達(dá)和純化
    5、蛋白免疫印跡和SDS-PAGE及考馬斯亮藍(lán)染色
    6、免疫熒光和油紅O染色
    7、ASA6的表征
    8、NaNdF4@NaGdF4 納米納米的合成
    9、通過EDC-NHS反應(yīng)合成ASA6-NaNdF4@NaGdF4 納米顆粒探針。
    10、動(dòng)物模型制備
    11、經(jīng)近紅外光譜探測(cè)小鼠動(dòng)脈粥樣硬化斑塊
    12、經(jīng)核磁共振探測(cè)小鼠體內(nèi)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊
    13、統(tǒng)計(jì)分析
結(jié)果
    1、ScFv文庫的構(gòu)建
    2、靶向動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的ScFv的篩選和鑒定
    3、ASA6的表達(dá)、純化和鑒定
    4、ASA6-NaNdF4@NaGdF4 納米顆粒探針的合成與表征
    5、ASA6-NaNdF4@NaGdF4 納米粒子探針對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊進(jìn)行近紅外光譜檢測(cè)
    6、ASA6-NaNdF4@NaGdF4 納米顆粒探針對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的核磁共振成像
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
縮略詞表
致謝



本文編號(hào)：4037622