冠狀動脈粥樣硬化性心臟病(簡稱冠心病)嚴(yán)重危害人類健康,被稱為"人類健康第一殺手",在我國也不例外,近年來已成為我國居民的主要致死病因之一。冠心病發(fā)生、發(fā)展的機(jī)制十分復(fù)雜,近年的研究表明內(nèi)皮功能障礙在冠心病的發(fā)生、發(fā)展中扮演關(guān)鍵角色。內(nèi)皮功能障礙的本質(zhì)是內(nèi)皮損傷和修復(fù)之間動態(tài)平衡的破壞,而內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)在內(nèi)皮損傷后的修復(fù)中起重要作用。EPCs參與缺血組織的血管新生、促進(jìn)損傷血管內(nèi)皮的修復(fù)、維持內(nèi)皮功能完整。近年的研究表明氧化應(yīng)激對于EPCs的功能具有重要作用。氧化應(yīng)激是指活性氧族(ROS)產(chǎn)生過多或發(fā)生代謝障礙并超過內(nèi)源性抗氧化防御系統(tǒng)對其的消除能力時,反應(yīng)性氧化物包括超氧陰離子(O2-)、過氧化氫(H202)和羥基產(chǎn)物(-OH),通過與DNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)相互作用,產(chǎn)生過多的損傷的DNA堿基、蛋白質(zhì)氧化產(chǎn)物和脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物,并導(dǎo)致溶酶體、線粒體的損傷。研究表明氧化應(yīng)激使EPCs動員減少,削弱EPCs的粘附、增殖、遷移能力,促進(jìn)EPCs的衰老,誘導(dǎo)其凋亡。研究還表明在內(nèi)皮細(xì)胞和干/祖細(xì)胞,ROS主要來自NADPH氧化酶。NADPH氧化酶是ROS主要調(diào)控酶,可以作為氧化應(yīng)激狀態(tài)的一...

【文章頁數(shù)】：123 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．倒置顯微鏡下ＥＰＣｓ的形態(tài)

２．１循環(huán)ＥＰＣｓ的分離、培養(yǎng)和鑒定??采用密度梯度離記、法從成人外周血中分離獲得的單個核細(xì)胞接種ＨＦＮ包被的??培養(yǎng)扳后，體外培養(yǎng)至７ｄ后形成了梭形的內(nèi)皮樣細(xì)胞（見圖１－Ａ），我們稱這些細(xì)??胞早期ＥＰＣｓ。此后，它們沒有復(fù)制并在４周內(nèi)逐漸消失。我們觀察到另一群具有??不同形態(tài)....

圖２．激光共聚焦顯微鏡鑒定心６？〔８

培養(yǎng)扳上呈＂鋪路石樣＂形狀，我們稱之為晚期內(nèi)皮祖細(xì)胞。用Ｄｉｌ－ａｃＬＤＬ和??Ｆ打Ｃ－ＵＥＡ－Ｉ對貼壁細(xì)胞進(jìn)行雙染包后，置激光共聚焦顯微鏡下觀察，ＵＥＡ－Ｉ和??Ｄｉｌ－ＤＬ雙染倉陽性細(xì)胞被認(rèn)為是正在分化的ＥＰＣｓ?（化圖２）。此外，我們采用流式??細(xì)胞儀檢測了?ＥＰＣｓ的表面....

圖５?（Ａ）?ｑＰＣ民檢測抗氧化酶Ｇｐｘ，?Ｃｕ／ＺｎＳＯＤ，ＭｎＳＯＤ的ｍＲＮＡ表達(dá)情況；??與對照組相比，ＣＡＤ患者Ｇｐｘ和ＭｎＳＯＤ的ｍＲＮＡ表達(dá)分別下降了?４０％和４８％，??而?Ｃｕ／ＺｎＳＯＤ??

學(xué)博丄－學(xué)位論文?正文巧一部我們從穩(wěn)定型冠記病ＥＰＣｓ中抗氧化酶的轉(zhuǎn)錄和翻譯水平進(jìn)一步檢測，結(jié)果提示ＣＡＤ患者ＥＰＣｓ內(nèi)Ｇｐｘ和ＭｎＳＯＤ的ｍＲＮＡ和蛋白表達(dá)ｎＳＯＤ?則無顯著差異（ｉＶ＝２０，１８，?＊戶＜０．０５）。（圖?５）??

圖６?ＥＬＩＳＡ試劑盒檢測ＥＰＣｓ內(nèi)ＶＥＧＦ，比－８，ＳＤＦ－１及ＨＧＦ濃度

２２４２．０±２３０．３ｐｇ／ｍｌ毎?＾１０６?個細(xì)胞，ＳＤＦ－１?和?ＨＧＦ?的濃度分別為?９３５．４±ｌｌ２．０ｐｇ／ｍｌ??和１２４４±１９３．邸ｇ／ｍｌ毎ｌｘｌ０６個細(xì)胞，由此可見，冠記、病患者ＥＰＣｓ的旁分泌細(xì)胞??因子ＶＥＧＦ，ｍ－８和ＳＤＦ－１減少，而ＨＧＦ濃度則在....

本文編號：4037543