目的：探討鉀離子對(duì)體外培養(yǎng)的血管平滑肌細(xì)胞（vascular smoothmuscle cell，VSMC）和動(dòng)脈血管鈣化的影響，揭示鉀離子調(diào)節(jié)血管鈣化的分子機(jī)制。 方法： 1.小鼠原代血管平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)及鑒定。改良組織塊法分離培養(yǎng)原代C57BL/6J小鼠血管平滑肌細(xì)胞，光學(xué)顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)特征；免疫組化方法鑒定VSMC特異性蛋白α-SMA的表達(dá)；RT-PCR方法檢測(cè)VSMC特異性基因α-SMA和SM22α在mRNA水平的表達(dá)情況。 2.鉀離子對(duì)平滑肌細(xì)胞鈣化的抑制作用研究。選第5代VSMC作為實(shí)驗(yàn)細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)分為3組:正常對(duì)照組（生理磷），高磷鈣化組（2.6mmol/LNaPi）,鉀離子干預(yù)組(2.6mmol/L NaPi+1.0mmol/L KCL)。細(xì)胞培養(yǎng)十天，通過(guò)顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。通過(guò)kossa染色觀察細(xì)胞鈣化情況。通過(guò)RT-PCR方法檢測(cè)α-SMA、SM22α、ALP、BMP-2、OPG、Runx2/Cbfα1等基因在mRNA水平的表達(dá)情況。通過(guò)流式細(xì)胞儀觀察細(xì)胞凋亡情況。所有實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。 3.鉀離子對(duì)血管鈣化的抑制作用研究。分離培養(yǎng)C57BL/6J...

【文章頁(yè)數(shù)】：84 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
引言
第一部分 小鼠原代血管平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)及鑒定
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    附圖
第二部分 鉀離子對(duì)血管平滑肌細(xì)胞鈣化的抑制作用研究
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
第三部分 鉀離子對(duì)鈣化血管的抑制作用研究
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：4036031