目的：探討鉀離子對體外培養(yǎng)的血管平滑肌細胞（vascular smoothmuscle cell，VSMC）和動脈血管鈣化的影響，揭示鉀離子調節(jié)血管鈣化的分子機制。 方法： 1.小鼠原代血管平滑肌細胞的培養(yǎng)及鑒定。改良組織塊法分離培養(yǎng)原代C57BL/6J小鼠血管平滑肌細胞，光學顯微鏡觀察細胞形態(tài)特征；免疫組化方法鑒定VSMC特異性蛋白α-SMA的表達；RT-PCR方法檢測VSMC特異性基因α-SMA和SM22α在mRNA水平的表達情況。 2.鉀離子對平滑肌細胞鈣化的抑制作用研究。選第5代VSMC作為實驗細胞，實驗分為3組:正常對照組（生理磷），高磷鈣化組（2.6mmol/LNaPi）,鉀離子干預組(2.6mmol/L NaPi+1.0mmol/L KCL)。細胞培養(yǎng)十天，通過顯微鏡觀察細胞生長情況。通過kossa染色觀察細胞鈣化情況。通過RT-PCR方法檢測α-SMA、SM22α、ALP、BMP-2、OPG、Runx2/Cbfα1等基因在mRNA水平的表達情況。通過流式細胞儀觀察細胞凋亡情況。所有實驗重復3次。 3.鉀離子對血管鈣化的抑制作用研究。分離培養(yǎng)C57BL/6J...

【文章頁數】：84 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
引言
第一部分 小鼠原代血管平滑肌細胞的培養(yǎng)及鑒定
    1 實驗材料
    2 實驗方法
    3 實驗結果
    附圖
第二部分 鉀離子對血管平滑肌細胞鈣化的抑制作用研究
    1 實驗材料
    2 實驗方法
    3 實驗結果
第三部分 鉀離子對鈣化血管的抑制作用研究
    1 實驗材料
    2 實驗方法
    3 實驗結果
討論
結論
參考文獻
綜述
    參考文獻
個人簡歷



本文編號：4036031