目的:研究不同端粒寡核苷酸序列對(duì)大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(A7R5)凋亡的影響,及沉默信息調(diào)節(jié)因子1(SIRT1)/抑癌基因P53(P53)信號(hào)通路是否參與調(diào)控端粒寡核苷酸序列誘導(dǎo)A7R5的凋亡。方法:將三種端粒重復(fù)序列端粒寡核苷酸序列的二聚體、四聚體、六聚體[TE-12(TTAGGG)2、TE-24(TTAGGG)4、TE-36(TTAGGG)6]轉(zhuǎn)染至A7R5,分別作為TE-12組、TE-24組、TE-36組,另設(shè)A7R5空白為陰性對(duì)照組。應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)各端粒寡核苷酸序列轉(zhuǎn)染后A7R5的凋亡情況。采用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶聯(lián)反應(yīng)(RT-PCR)及蛋白免疫印跡(Western-blot)檢測(cè)TE-12組、TE-24組、TE-36組及陰性對(duì)照組SIRT1、P53基因及蛋白水平。結(jié)果:將TE-12、TE-24、TE-36成功轉(zhuǎn)染進(jìn)A7R5,各組轉(zhuǎn)染率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。TE-12組A7R5凋亡率明顯高于TE-36組、TE-24組和陰性對(duì)照組,TE-24組細(xì)胞凋亡率最低,但亦明顯高于陰性對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。TE-12組A7R5SIRT1m RNA及蛋白水平明顯高于TE...

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圖1熒光顯微鏡下顯示大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞對(duì)熒光標(biāo)記的寡核苷酸序列的攝取結(jié)果

中進(jìn)行壓片、洗片。1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SPSS17.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。各組數(shù)據(jù)均符合正態(tài)性，計(jì)量資料以±s表示。符合方差齊性檢驗(yàn)數(shù)據(jù)，采用單因素方差分析。方差不齊數(shù)據(jù)，則采用兩獨(dú)立樣本秩和檢驗(yàn)（Mann-WhitneyU）進(jìn)行分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)....

圖3各組轉(zhuǎn)染后大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞SIRT1蛋白水平的蛋白免疫印跡檢測(cè)結(jié)果

中國(guó)循環(huán)雜志2017年6月第32卷第6期（總第228期）ChineseCirculationJournal，June，2017，Vol.32No.6（SerialNo.228）6152.4各組A7R5SIRT1蛋白及P53蛋白水平檢測(cè)結(jié)果各組A7R5SIRT1蛋白水平比較：TE-....

圖4各組轉(zhuǎn)染后大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞P53蛋白水平的蛋白免疫印跡檢測(cè)結(jié)果

動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞凋亡率流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果SIRT1β-Actin陰性對(duì)照組TE-12組TE-24組TE-36組注：TE-12：端粒寡核苷酸序列的二聚體形式；TE-24：端粒寡核苷酸序列的四聚體形式；TE-36：端粒寡核苷酸序列的六聚體形式；SIRT1：沉默信息調(diào)節(jié)因子1；β-Act....

圖2各組轉(zhuǎn)染后大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞凋亡率流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果

組A7R5SIRT1蛋白及P53蛋白水平檢測(cè)結(jié)果各組A7R5SIRT1蛋白水平比較：TE-12組、TE-24組、TE-36組及陰性對(duì)照組A7R5SIRT1蛋白相對(duì)表達(dá)量分別為1.92±0.01、1.51±0.02、1.61±0.01、0.50±0.01。TE-12組A7R5SIR....

本文編號(hào)：4033065