發(fā)布時間：2025-02-10 20:52

　　 目的:研究不同端粒寡核苷酸序列對大鼠胸大動脈平滑肌細胞(A7R5)凋亡的影響,及沉默信息調(diào)節(jié)因子1(SIRT1)/抑癌基因P53(P53)信號通路是否參與調(diào)控端粒寡核苷酸序列誘導(dǎo)A7R5的凋亡。方法:將三種端粒重復(fù)序列端粒寡核苷酸序列的二聚體、四聚體、六聚體[TE-12(TTAGGG)2、TE-24(TTAGGG)4、TE-36(TTAGGG)6]轉(zhuǎn)染至A7R5,分別作為TE-12組、TE-24組、TE-36組,另設(shè)A7R5空白為陰性對照組。應(yīng)用流式細胞儀檢測各端粒寡核苷酸序列轉(zhuǎn)染后A7R5的凋亡情況。采用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶聯(lián)反應(yīng)(RT-PCR)及蛋白免疫印跡(Western-blot)檢測TE-12組、TE-24組、TE-36組及陰性對照組SIRT1、P53基因及蛋白水平。結(jié)果:將TE-12、TE-24、TE-36成功轉(zhuǎn)染進A7R5,各組轉(zhuǎn)染率差異無統(tǒng)計學意義。TE-12組A7R5凋亡率明顯高于TE-36組、TE-24組和陰性對照組,TE-24組細胞凋亡率最低,但亦明顯高于陰性對照組,差異均有統(tǒng)計學意義(P均<0.05)。TE-12組A7R5SIRT1m RNA及蛋白水平明顯高于TE...

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【部分圖文】：

圖1熒光顯微鏡下顯示大鼠胸大動脈平滑肌細胞對熒光標記的寡核苷酸序列的攝取結(jié)果

中進行壓片、洗片。1.6統(tǒng)計學分析應(yīng)用SPSS17.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。各組數(shù)據(jù)均符合正態(tài)性，計量資料以±s表示。符合方差齊性檢驗數(shù)據(jù)，采用單因素方差分析。方差不齊數(shù)據(jù)，則采用兩獨立樣本秩和檢驗（Mann-WhitneyU）進行分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。2結(jié)....

圖3各組轉(zhuǎn)染后大鼠胸大動脈平滑肌細胞SIRT1蛋白水平的蛋白免疫印跡檢測結(jié)果

中國循環(huán)雜志2017年6月第32卷第6期（總第228期）ChineseCirculationJournal，June，2017，Vol.32No.6（SerialNo.228）6152.4各組A7R5SIRT1蛋白及P53蛋白水平檢測結(jié)果各組A7R5SIRT1蛋白水平比較：TE-....

圖4各組轉(zhuǎn)染后大鼠胸大動脈平滑肌細胞P53蛋白水平的蛋白免疫印跡檢測結(jié)果

動脈平滑肌細胞凋亡率流式細胞儀檢測結(jié)果SIRT1β-Actin陰性對照組TE-12組TE-24組TE-36組注：TE-12：端粒寡核苷酸序列的二聚體形式；TE-24：端粒寡核苷酸序列的四聚體形式；TE-36：端粒寡核苷酸序列的六聚體形式；SIRT1：沉默信息調(diào)節(jié)因子1；β-Act....

圖2各組轉(zhuǎn)染后大鼠胸大動脈平滑肌細胞凋亡率流式細胞儀檢測結(jié)果

組A7R5SIRT1蛋白及P53蛋白水平檢測結(jié)果各組A7R5SIRT1蛋白水平比較：TE-12組、TE-24組、TE-36組及陰性對照組A7R5SIRT1蛋白相對表達量分別為1.92±0.01、1.51±0.02、1.61±0.01、0.50±0.01。TE-12組A7R5SIR....

本文編號：4033065