深靜脈血栓形成(Deep venous thrombosis DVT)是常見的外周血管疾病，可導致肢體腫脹、下肢缺血、血栓后綜合癥，甚至致死性肺栓塞的發(fā)生�，F(xiàn)在對于DVT的治療主要是各種抗凝溶栓藥物的使用，但效果并不令人滿意，同時抗凝藥物的副作用可導致機體凝血功能下降、消化道出血、手術(shù)患者切口并發(fā)癥發(fā)生。 研究人員發(fā)現(xiàn)骨髓來源的內(nèi)皮祖細胞(Bone marrow-derived endothelialprogenitor cells BMEPCs)可以分化為血管內(nèi)皮細胞，分泌各種促血管生成因子從而促進缺血組織的血管新生。研究證實，EPCs可以歸巢到深靜脈血栓中促進血栓機化再通。我們實驗組前期的研究也發(fā)現(xiàn)移植EPCs后可以改善血栓內(nèi)的微環(huán)境，促進急性靜脈血栓溶解及慢性血栓再通。但是由于EPCs增殖能力及遷移歸巢能力較弱，EPCs的應(yīng)用受到很大的限制。如何更好的改善EPCs的功能成為廣大學者的研究方向。 MicroRNAs(miRNAs)是一類小分子非編碼RNAs，可在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因表達。研究證明MicroRNAs在血管新生過程中扮演了重要角色。miR-150最初被發(fā)現(xiàn)于免疫...

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖2EPCs原代培養(yǎng)生長曲線

心分離單個核細胞，離心后可見細胞分為四層，箭頭表測長曲線略呈“S”形，細胞培養(yǎng)早期增殖較慢，在培養(yǎng)的細胞處于對數(shù)增長期，13天后細胞增殖進入平臺期（

圖3：細胞培養(yǎng)形態(tài)學觀察A剛分離的骨髓單個核細胞較小，呈圓形，懸浮于培養(yǎng)基中(×100)；B培養(yǎng)24小時后，可見少量細胞貼壁，細胞形態(tài)呈橢圓形、不規(guī)則形或短棒狀(×100)；C培養(yǎng)2-3天后貼壁細胞增多，細胞形態(tài)逐漸變大，可見細胞集

養(yǎng)至第12～14天，細胞長滿培養(yǎng)瓶底，主要呈現(xiàn)典型鋪路鵝卵石樣外觀。此后細胞具有較高的增殖活性，培養(yǎng)細胞的形態(tài)和生長特點經(jīng)多次傳代后仍保持無明顯變化。我們選取P2-P3代細胞作為研究對象（圖3）。圖3：細胞培養(yǎng)形態(tài)學觀察A剛分離的骨髓單個核細胞較小，呈圓形，懸浮于培養(yǎng)基中(×1....

圖4:免疫組化示P2-P3代EPCs陽性表達VEGFR-2及vWF

選取P2-P3代骨髓單個核細胞，采用免疫組化，免疫熒光方法檢測細胞表面標記。培養(yǎng)細胞免疫組化，免疫熒光結(jié)果顯示，絕大多數(shù)細胞表達內(nèi)皮表面標記物VEGFR-2及vWF（圖4、圖5）；以上結(jié)果提示P2-P3代骨髓單個核細胞經(jīng)誘導分化后，呈現(xiàn)late-EPCs表型。圖4:免疫組化示....

圖5：免疫熒光示P2-P3代EPCs陽性表達vWF

選取P2-P3代骨髓單個核細胞，采用免疫組化，免疫熒光方法檢測細胞表面標記。培養(yǎng)細胞免疫組化，免疫熒光結(jié)果顯示，絕大多數(shù)細胞表達內(nèi)皮表面標記物VEGFR-2及vWF（圖4、圖5）；以上結(jié)果提示P2-P3代骨髓單個核細胞經(jīng)誘導分化后，呈現(xiàn)late-EPCs表型。圖4:免疫組化示....

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