深靜脈血栓形成(Deep venous thrombosis DVT)是常見的外周血管疾病，可導(dǎo)致肢體腫脹、下肢缺血、血栓后綜合癥，甚至致死性肺栓塞的發(fā)生。現(xiàn)在對于DVT的治療主要是各種抗凝溶栓藥物的使用，但效果并不令人滿意，同時抗凝藥物的副作用可導(dǎo)致機(jī)體凝血功能下降、消化道出血、手術(shù)患者切口并發(fā)癥發(fā)生。 研究人員發(fā)現(xiàn)骨髓來源的內(nèi)皮祖細(xì)胞(Bone marrow-derived endothelialprogenitor cells BMEPCs)可以分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞，分泌各種促血管生成因子從而促進(jìn)缺血組織的血管新生。研究證實(shí)，EPCs可以歸巢到深靜脈血栓中促進(jìn)血栓機(jī)化再通。我們實(shí)驗(yàn)組前期的研究也發(fā)現(xiàn)移植EPCs后可以改善血栓內(nèi)的微環(huán)境，促進(jìn)急性靜脈血栓溶解及慢性血栓再通。但是由于EPCs增殖能力及遷移歸巢能力較弱，EPCs的應(yīng)用受到很大的限制。如何更好的改善EPCs的功能成為廣大學(xué)者的研究方向。 MicroRNAs(miRNAs)是一類小分子非編碼RNAs，可在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因表達(dá)。研究證明MicroRNAs在血管新生過程中扮演了重要角色。miR-150最初被發(fā)現(xiàn)于免疫...

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【學(xué)位級別】：博士

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圖2EPCs原代培養(yǎng)生長曲線

心分離單個核細(xì)胞，離心后可見細(xì)胞分為四層，箭頭表測長曲線略呈“S”形，細(xì)胞培養(yǎng)早期增殖較慢，在培養(yǎng)的細(xì)胞處于對數(shù)增長期，13天后細(xì)胞增殖進(jìn)入平臺期（

圖3：細(xì)胞培養(yǎng)形態(tài)學(xué)觀察A剛分離的骨髓單個核細(xì)胞較小，呈圓形，懸浮于培養(yǎng)基中(×100)；B培養(yǎng)24小時后，可見少量細(xì)胞貼壁，細(xì)胞形態(tài)呈橢圓形、不規(guī)則形或短棒狀(×100)；C培養(yǎng)2-3天后貼壁細(xì)胞增多，細(xì)胞形態(tài)逐漸變大，可見細(xì)胞集

養(yǎng)至第12～14天，細(xì)胞長滿培養(yǎng)瓶底，主要呈現(xiàn)典型鋪路鵝卵石樣外觀。此后細(xì)胞具有較高的增殖活性，培養(yǎng)細(xì)胞的形態(tài)和生長特點(diǎn)經(jīng)多次傳代后仍保持無明顯變化。我們選取P2-P3代細(xì)胞作為研究對象（圖3）。圖3：細(xì)胞培養(yǎng)形態(tài)學(xué)觀察A剛分離的骨髓單個核細(xì)胞較小，呈圓形，懸浮于培養(yǎng)基中(×1....

圖4:免疫組化示P2-P3代EPCs陽性表達(dá)VEGFR-2及vWF

選取P2-P3代骨髓單個核細(xì)胞，采用免疫組化，免疫熒光方法檢測細(xì)胞表面標(biāo)記。培養(yǎng)細(xì)胞免疫組化，免疫熒光結(jié)果顯示，絕大多數(shù)細(xì)胞表達(dá)內(nèi)皮表面標(biāo)記物VEGFR-2及vWF（圖4、圖5）；以上結(jié)果提示P2-P3代骨髓單個核細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)分化后，呈現(xiàn)late-EPCs表型。圖4:免疫組化示....

圖5：免疫熒光示P2-P3代EPCs陽性表達(dá)vWF

選取P2-P3代骨髓單個核細(xì)胞，采用免疫組化，免疫熒光方法檢測細(xì)胞表面標(biāo)記。培養(yǎng)細(xì)胞免疫組化，免疫熒光結(jié)果顯示，絕大多數(shù)細(xì)胞表達(dá)內(nèi)皮表面標(biāo)記物VEGFR-2及vWF（圖4、圖5）；以上結(jié)果提示P2-P3代骨髓單個核細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)分化后，呈現(xiàn)late-EPCs表型。圖4:免疫組化示....

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