發(fā)布時間：2024-09-18 09:47

　　心血管疾病是全世界發(fā)病率和死亡率最高的疾病,在我國是第一死亡病因,動脈粥樣硬化是其主要的病理基礎(chǔ),導(dǎo)致的常見疾病是腦卒中和冠心病。動脈粥樣硬化是一種伴有斑塊形成的慢性進展性疾病,主要累及大、中動脈。單核細胞和巨噬細胞是病變發(fā)展的關(guān)鍵因素,通過攝入脂質(zhì)和分泌促炎因子等參與動脈粥樣硬化斑塊的進展。循環(huán)中的單核細胞在血管壁上的粘附增加是動脈粥樣硬化病變過程中的早期表現(xiàn),巨噬細胞是粥樣斑塊的主要成分。肌漿網(wǎng)/內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣ATP酶（sarco/endoplasmic reticulum calcium ATPase,SERCA）是細胞內(nèi)調(diào)控鈣循環(huán)和鈣信號的關(guān)鍵酶,對維持細胞內(nèi)鈣穩(wěn)態(tài)和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)穩(wěn)態(tài)至關(guān)重要。SERCA2是SERCA在心血管系統(tǒng)的主要亞型,對維持心血管穩(wěn)態(tài)極其重要。位于SERCA2胞漿側(cè)的674位半胱氨酸（cysteine 674,C674）上的巰基是其主要的谷胱甘肽化位點。生理情況下,C674可以被可逆性地谷胱甘肽化,增加SERCA2的活性進而舒張血管;在活性氧大量增加的病理情況下,C674巰基被不可逆性氧化（C674-SO₃H）,導(dǎo)致SERCA2的功能障礙。在動脈粥...

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
縮略詞對照表
1 緒論
    1.1 動脈粥樣硬化發(fā)病機制
    1.2 巨噬細胞與動脈粥樣硬化的關(guān)系
    1.3 肌漿網(wǎng)/內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣ATP酶(sarco/endoplasmic reticulum ATPase,SERCA)的組織分布及在心血管系統(tǒng)中的作用
        1.3.1 SERCA的結(jié)構(gòu)與分布
        1.3.2 C674的氧化還原狀態(tài)與動脈粥樣硬化的關(guān)系
    1.4 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激
        1.4.1 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與動脈粥樣硬化的關(guān)系
        1.4.2 巨噬細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與動脈粥樣硬化的關(guān)系
        1.4.3 巨噬細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與炎性因子和粘附分子的關(guān)系
    1.5 粘附分子與動脈粥樣硬化的關(guān)系
2 本文的選題依據(jù)及研究內(nèi)容
    2.1 研究目的
    2.2 研究內(nèi)容
        2.2.1 C674的失活對高脂飲食誘導(dǎo)動脈粥樣硬化的影響
        2.2.2 C674的失活對巨噬細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激蛋白和炎性轉(zhuǎn)錄因子及粘附分子表達的影響
        2.2.3 Ox-LDL和ac-LDL是否促進C674的失活對巨噬細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白及炎性因子和粘附分子表達的調(diào)控
        2.2.4 高脂飲食是否影響C674的失活對巨噬細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白和炎性因子及粘附分子的表達
        2.2.5 4 -PBA和CDN1163對C674失活誘導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及炎性因子和粘附分子表達的影響
    2.3 技術(shù)路線
        2.3.1 C674的失活對高脂飲食誘導(dǎo)動脈粥樣硬化的影響
        2.3.2 C674的失活對巨噬細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激蛋白和炎性轉(zhuǎn)錄因子及粘附分子表達的影響
        2.3.3 Ox-LDL和ac-LDL是否促進C674的失活對巨噬細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白及炎性因子和粘附分子表達的調(diào)控
        2.3.4 高脂飲食是否影響C674的失活對巨噬細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白及炎性因子和粘附分子的表達
        2.3.5 4 -PBA和CDN1163對C674失活誘導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及炎性因子和粘附分子表達的影響
    2.4 本研究的創(chuàng)新點
3 實驗方法、實驗結(jié)果及討論
    3.1 實驗材料與儀器
        3.1.1 常用試劑與材料
        3.1.2 主要儀器
        3.1.3 主要實驗試劑的配置
        3.1.4 實驗動物和飼養(yǎng)條件
        3.1.5 實驗組織
    3.2 實驗方法介紹
        3.2.1 血清中甘油三酯和膽固醇的檢測
        3.2.2 組織準備和制片
        3.2.3 染色分析
        3.2.4 巨噬細胞的培養(yǎng)
        3.2.5 免疫熒光染色方法
        3.2.6 熒光定量PCR
        3.2.7 Western blot測定細胞蛋白的表達
        3.2.8 骨髓衍生的巨噬細胞對內(nèi)皮細胞的粘附實驗
        3.2.9 Ox-LDL和ac-LDL在體外對巨噬細胞進行誘導(dǎo)刺激
        3.2.10 4 -PBA和CDN1163在體外對巨噬細胞進行干預(yù)
        3.2.11 統(tǒng)計學(xué)方法
    3.3 實驗結(jié)果
        3.3.1 SKI/LDLR-/-小鼠和LDLR-/-小鼠的體重及血脂含量
        3.3.2 C674的失活加速高脂飲食誘導(dǎo)的動脈粥樣硬化進程
        3.3.3 C674的失活增加巨噬細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白的表達
        3.3.4 C674的失活增加巨噬細胞炎性轉(zhuǎn)錄因子和粘附分子的表達
        3.3.5 C674的失活增加巨噬細胞對內(nèi)皮細胞的粘附
        3.3.6 Ox-LDL和ac-LDL促進C674失活誘導(dǎo)的巨噬細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白的表達
        3.3.7 Ox-LDL和ac-LDL促進C674的失活誘導(dǎo)的巨噬細胞炎性因子和粘附分子的表達
        3.3.8 高脂飲食促進C674的失活對巨噬細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白表達的影響
        3.3.9 高脂飲食促進C674的失活對巨噬細胞炎性因子和粘附分子表達的影響
        3.3.10 4 -PBA和CDN1163部分拮抗C674失活誘導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及炎性因子和粘附分子的表達
    3.4 討論
4 主要研究結(jié)論與展望
    4.1 主要研究結(jié)論
    4.2 后續(xù)工作展望
        4.2.1 后續(xù)工作
        4.2.2 展望
致謝
參考文獻
附錄
    A.作者在攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文
    B.作者在攻讀碩士學(xué)位期間參加的科研項目



本文編號：4005954