目的:探討miR-19a對(duì)腹主動(dòng)脈瘤(AAA)血管平滑肌細(xì)胞增殖遷移及炎癥浸潤的影響及其機(jī)制。方法:收集AAA發(fā)生后未行任何治療的15例患者血清,15例同期健康體檢者血清,以及15例手術(shù)切除AAA患者的腹主動(dòng)脈瘤組織和15例正常腹主動(dòng)脈組織。RT-qPCR檢測miR-19a的表達(dá)水平;CCK-8檢測血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)增殖活力;Transwell檢測VSMCs遷移能力;流式細(xì)胞術(shù)檢測VSMCs凋亡水平;ELISA法檢測炎癥因子的表達(dá)水平;Western blot檢測蛋白的表達(dá)水平;雙熒光素酶報(bào)告基因驗(yàn)證miR-19a和CDKN2B的靶向關(guān)系。結(jié)果:與對(duì)照組比,miR-19a在AAA患者組織和血清中均明顯高表達(dá)。敲降miR-19a可明顯抑制VSMCs增殖、遷移并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,下調(diào)THP-1細(xì)胞炎癥因子和基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)的表達(dá)水平。雙熒光素酶報(bào)告基因結(jié)果顯示,miR-19a通過結(jié)合CDKN2B基因的3’非編碼區(qū)(3’ UTR),進(jìn)而抑制其表達(dá)水平。過表達(dá)CDKN2B可明顯緩解miR-19a對(duì)VSMCs增殖和轉(zhuǎn)移的抑制作用,以及THP-1細(xì)胞的炎癥反應(yīng)。結(jié)論:敲降mi R-...

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圖2敲降miR-19a對(duì)VSMCs增殖、凋亡和遷移（×100）的影響

ELISA檢測結(jié)果顯示，相比于對(duì)照組，敲降miR-19a可明顯抑制THP-1細(xì)胞中炎癥因子（TNF-α、IL-6和IL-1β）的表達(dá)水平（P<0.01），見圖3A-C。Westernblot檢測結(jié)果表明，敲降miR-19a可明顯抑制單核細(xì)胞趨化蛋白-1(monocyteche....

圖1miR-19a在AAA患者組織（A）和血清（B）中的表達(dá)

RT-qPCR檢測結(jié)果顯示，相比于對(duì)照組，敲降miR-19a可明顯下調(diào)miR-19a在VSMCs中的表達(dá)水平（P<0.01），見圖2A;CCK-8檢測結(jié)果顯示，敲降miR-19a后VSMCs增殖活力明顯低于對(duì)照組（P<0.01），見圖2B；流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果顯示，相比于對(duì)照組，敲....

圖4miR-19a靶向調(diào)控CDKN2B表達(dá)

Westernblot檢測結(jié)果表明，與對(duì)照組比，過表達(dá)CDKN2B可顯著上調(diào)VSMCs中CDKN2B蛋白的表達(dá)水平（P<0.01），但同時(shí)過表達(dá)miR-19a和CDKN2B后VSMCs中CDKN2B的表達(dá)水平與對(duì)照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見圖5A。CCK-8檢測結(jié)果....

圖6miR-19a靶向CDKN2B對(duì)THP-1細(xì)胞炎癥因子表達(dá)水平的影響

AAA是一種嚴(yán)重的遲發(fā)性血管疾病，病死率高。近年來，miRNA被廣泛報(bào)道通過調(diào)控細(xì)胞生物學(xué)行為，進(jìn)而參與多種疾病的發(fā)生發(fā)展進(jìn)程。LI等[7]研究表明，miR-19a可作為心臟、血管和神經(jīng)元相關(guān)疾病的早期診斷和治療靶點(diǎn)。MENG等[8]研究發(fā)現(xiàn)，miR-183和miR-141與AA....

本文編號(hào)：3969736