第一部分人外周血內皮祖細胞及Tip血管內皮細胞的分離培養(yǎng)與鑒定[目的]探討人外周血內皮祖細胞的分離與培養(yǎng)方法,擬證實人外周血是內皮祖細胞除了骨髓以外的另一個理想來源。并在一定的體外培養(yǎng)條件下將外周血內皮祖細胞定向誘導分化為Tip血管內皮細胞,研究其生物學活性,不僅為進一步實驗研究提供所需的細胞來源,還為干細胞源性血管新生機制提供可靠的實驗室依據。[方法]采用Ficoll密度梯度離心法分離人外周血單個核細胞,將其重懸于EGM-2-MV培養(yǎng)基中培養(yǎng),每日于倒置相差顯微鏡下觀察細胞的生長形態(tài)及內皮祖細胞集落形成形態(tài),每隔2天換一次液并于倒置相差顯微鏡下觀察細胞形態(tài),培養(yǎng)至21天時觀察Tip血管內皮細胞形態(tài),并收集該時期的貼壁細胞進行流式細胞術、RT-PCR、Western Blot檢測Tip血管內皮細胞中PDGF-B、D114血管內皮細胞系特異性基因的表達情況。[結果]分離獲得的單個核細胞培養(yǎng)4天后多數呈貼壁生長,7天后形成梭狀的內皮樣細胞,部分細胞積聚成團形成克隆集落,繼續(xù)培養(yǎng)21天后的細胞呈鵝卵石樣改變,并伸出偽足相互連接形成類似血管腔樣結構,形態(tài)學表現(xiàn)為Tip血管內皮細胞的形態(tài)特點,通...

【文章頁數】：62 頁

【學位級別】：碩士

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引言
第一部分 人外周血內皮祖細胞及Tip血管內皮細胞的分離、培養(yǎng)與鑒定
    前言
    材料與方法
    實驗結果
    討論
    結論
    參考文獻
第二部分 Tip血管內皮細胞Transwell遷移實驗
    前言
    材料與方法
    實驗結果
    討論
    結論
    參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學位期間獲得的學術成果
致謝



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