第一部分人外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞及Tip血管內(nèi)皮細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定[目的]探討人外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞的分離與培養(yǎng)方法,擬證實(shí)人外周血是內(nèi)皮祖細(xì)胞除了骨髓以外的另一個(gè)理想來源。并在一定的體外培養(yǎng)條件下將外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化為Tip血管內(nèi)皮細(xì)胞,研究其生物學(xué)活性,不僅為進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)研究提供所需的細(xì)胞來源,還為干細(xì)胞源性血管新生機(jī)制提供可靠的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。[方法]采用Ficoll密度梯度離心法分離人外周血單個(gè)核細(xì)胞,將其重懸于EGM-2-MV培養(yǎng)基中培養(yǎng),每日于倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)形態(tài)及內(nèi)皮祖細(xì)胞集落形成形態(tài),每隔2天換一次液并于倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),培養(yǎng)至21天時(shí)觀察Tip血管內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài),并收集該時(shí)期的貼壁細(xì)胞進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)、RT-PCR、Western Blot檢測(cè)Tip血管內(nèi)皮細(xì)胞中PDGF-B、D114血管內(nèi)皮細(xì)胞系特異性基因的表達(dá)情況。[結(jié)果]分離獲得的單個(gè)核細(xì)胞培養(yǎng)4天后多數(shù)呈貼壁生長(zhǎng),7天后形成梭狀的內(nèi)皮樣細(xì)胞,部分細(xì)胞積聚成團(tuán)形成克隆集落,繼續(xù)培養(yǎng)21天后的細(xì)胞呈鵝卵石樣改變,并伸出偽足相互連接形成類似血管腔樣結(jié)構(gòu),形態(tài)學(xué)表現(xiàn)為Tip血管內(nèi)皮細(xì)胞的形態(tài)特點(diǎn),通...

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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英文摘要
引言
第一部分 人外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞及Tip血管內(nèi)皮細(xì)胞的分離、培養(yǎng)與鑒定
    前言
    材料與方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 Tip血管內(nèi)皮細(xì)胞Transwell遷移實(shí)驗(yàn)
    前言
    材料與方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間獲得的學(xué)術(shù)成果
致謝



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