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脂聯(lián)素對巨噬細胞源性泡沫細胞ABCA1、ABCG1、LXRα及膽固醇含量的影響及機制

發(fā)布時間:2024-04-12 23:14
  目的 本實驗通過構(gòu)建RAW264.7源性泡沫細胞模型,探討脂聯(lián)素對RAW264.7巨噬細胞源性泡沫細胞膽固醇逆轉(zhuǎn)運相關(guān)蛋白ABCA1、ABCG1、LXRα的表達以及膽固醇含量的影響,進一步闡述其可能的機制。 方法 體外培養(yǎng)RAW264.7細胞,加入終濃度為20mg/L氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)共同孵育48h,將其誘導(dǎo)成泡沫細胞。 實驗分為4組:①空白對照組;②1μg/ml脂聯(lián)素組;③5μg/ml脂聯(lián)素組;④10μg/ml脂聯(lián)素組;分別干預(yù)6h、12h、24h后,實時熒光定量Real-Time PCR法測定各組細胞ABCA1、ABCG1、LXRαmRNA的相對表達量,Western Blot測定各組細胞蛋白含量,高效液相色譜測定細胞內(nèi)膽固醇含量。觀察脂聯(lián)素對泡沫細胞中ABCA1、ABCG1、LXRα的影響。 結(jié)果 1.倒置顯微鏡下觀察:48h后RAW264.7巨噬細胞源性泡沫細胞間形成細胞連接,成簇生長,經(jīng)油紅O染色可見細胞內(nèi)有紅色脂滴,即為泡沫細胞; 2.RT PCR和Western Blot印記分析的結(jié)果顯示:各組均可檢測到ABCA1、ABCG1、LXRαmRNA和蛋白的表達:...

【文章頁數(shù)】:49 頁

【學位級別】:碩士

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