發(fā)布時(shí)間：2024-03-30 09:19

　　目的:探討冠心病痰濁瘀阻證與凝血指標(biāo)和心臟彩超之間的聯(lián)系,挖掘可能提示該證微觀辨證的新型參考指標(biāo),從miR-223-5p介導(dǎo)的巨噬細(xì)胞凋亡角度探討冠心病痰濁瘀阻證可能存在的發(fā)病機(jī)制。材料與方法:比較凝血指標(biāo)和心臟彩超在冠心病氣虛血瘀證、氣滯血瘀證與痰濁瘀阻證之間的差異及意義,探討其與證型的聯(lián)系�；趍iRNA-seq手段比較冠心病氣虛血瘀證、痰濁瘀阻證患者和正常人血清外泌體miRNAs分布差異,篩選出有意義的miRNA(即miR-223-5p)。驗(yàn)證冠心病痰濁瘀阻證患者血清外泌體miR-223-5p的表達(dá)情況,并檢測單個(gè)核細(xì)胞中其下游靶基因的表達(dá)水平。提取冠心病痰濁瘀阻證患者血清外泌體并進(jìn)行鑒定及定量;體外培養(yǎng)人單核細(xì)胞株THP-1細(xì)胞,應(yīng)用PMA(100ng/μl)誘導(dǎo)為巨噬細(xì)胞;應(yīng)用熒光探針標(biāo)記外泌體,采用活細(xì)胞成像技術(shù)觀察巨噬細(xì)胞對患者血清外泌體的攝取情況;并應(yīng)用實(shí)時(shí)定量RT-PCR技術(shù)檢測巨噬細(xì)胞在ox-LDL(50μg/ml)環(huán)境下攝取患者血清外泌體后,miR-223-5p下游靶基因ALDH2及凋亡基因caspase-3和bcl-2的表達(dá)水平,并與正常對照組進(jìn)行比較分析。結(jié)果...

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1Agilent2100RNAPico6000對外泌體miRNAs的檢測結(jié)果

遼寧中醫(yī)藥大學(xué)2020屆碩士學(xué)位論文-21-實(shí)驗(yàn)結(jié)果1外泌體miRNA鑒定分析用Agilent2100RNAPico6000對提取的miRNAs進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示，提取miRNAs的片段>90%集中在100bp以下，質(zhì)控合格（圖1）。圖1Agilent2100RNAPico600....

圖2各樣本已知miRNA比對結(jié)果

遼寧中醫(yī)藥大學(xué)2020屆碩士學(xué)位論文-21-實(shí)驗(yàn)結(jié)果1外泌體miRNA鑒定分析用Agilent2100RNAPico6000對提取的miRNAs進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示，提取miRNAs的片段>90%集中在100bp以下，質(zhì)控合格（圖1）。圖1Agilent2100RNAPico600....

圖3各樣本已知miRNA分布聚類熱圖

痰濁瘀阻型冠心病患者血清外泌體miR-223-5p介導(dǎo)巨噬細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制-22-圖3各樣本已知miRNA分布聚類熱圖注：圖中各列代表不同的樣品，各行代表不同的基因，相應(yīng)的顏色代表該基因在樣品中表達(dá)量的高低。紅色表示基因在樣品中表達(dá)量高，綠色表示基因在樣品中表達(dá)量低，N表示為正....

圖4已知miRNA表達(dá)差異分析

遼寧中醫(yī)藥大學(xué)2020屆碩士學(xué)位論文-23-圖4已知miRNA表達(dá)差異分析注：T表示為痰濁淤阻組、Q為氣虛血瘀組、Z為正常組，縱坐標(biāo)pvalue表示為兩組比較的差異顯著性4miR-223-5p與冠心病的調(diào)控關(guān)系登錄DisGeNET數(shù)據(jù)庫，在‘Downloads’目錄下選擇‘Gen....

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