內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激CHOP信號通路在COPD和COPD相關(guān)性肺動脈高壓小鼠中的作用及機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2023-05-20 00:11
目的:明確內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激CHOP信號通路在香煙煙霧誘導(dǎo)COPD和COPD相關(guān)性肺動脈高壓發(fā)病中的作用及機(jī)制。方法:將野生型C57BL/6J雄性小鼠42只,隨機(jī)分為7組,分別為4月對照組、吸煙4月組、吸煙4月PBA干預(yù)組(吸煙4個(gè)月,起始即灌胃添加PBA)、6月對照組、吸煙6月組、吸煙6月PBA早干預(yù)組(吸煙6個(gè)月,起始即灌胃添加PBA)、吸煙6月PBA晚干預(yù)組(吸煙6個(gè)月,4個(gè)月后灌胃添加PBA)。檢測各組小鼠肺通氣功能,經(jīng)右心室穿刺檢測各組小鼠肺動脈壓,小鼠心臟稱重檢測右心指數(shù),光學(xué)顯微鏡觀察肺實(shí)質(zhì)結(jié)構(gòu)破壞情況和肺血管重構(gòu)情況。免疫熒光檢測內(nèi)質(zhì)網(wǎng)標(biāo)志蛋白鈣連蛋白,利用TUNEL標(biāo)記法檢測小鼠肺組織細(xì)胞凋亡比例,western-blot方法檢測內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)志蛋白BIP蛋白水平,Western-blot和RealTime-PCR方法分別檢測CHOP、Bcl-2、Bim、Puma、DR5基因蛋白質(zhì)和mRNA表達(dá)水平,western-blot方法及免疫熒光方法分別檢測caspase8和caspase9蛋白質(zhì)水平、caspase8和caspase9活性。結(jié)果:1.小鼠肺通氣功能結(jié)果:吸煙4月組較4...
【文章頁數(shù)】:74 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
主要縮略詞
第1章 緒論
第2章 材料與方法
2.1 材料
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 小鼠肺通氣功能測定
3.2 小鼠平均肺動脈壓及右心肥厚指數(shù)測定
3.3 小鼠肺組織和肺動脈形態(tài)
3.4 免疫熒光檢測 caspase8、caspase9、鈣連蛋白
3.5 BIP 蛋白質(zhì)表達(dá)水平檢測
3.6 TUNEL 標(biāo)記法檢測小鼠肺結(jié)構(gòu)細(xì)胞凋亡比例
3.7 Western-Blot 及 Realtime-PCR 方 法 檢 測 CHOP 蛋 白 質(zhì) 及CHOPm RNA 表達(dá)水平
3.8 Western-Blot、Realtime-PCR 方法分別檢測 Bcl-2 信號通路Bcl-2、Bim、Puma 基因的蛋白質(zhì)及 m RNA 表達(dá)水平
3.9 Western-Blot、Realtime-PCR 方法檢測 DR5 信號通路 DR5 基因的蛋白質(zhì)及 m RNA 表達(dá)水平
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附圖
綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
本文編號:3820161
【文章頁數(shù)】:74 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
主要縮略詞
第1章 緒論
第2章 材料與方法
2.1 材料
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 小鼠肺通氣功能測定
3.2 小鼠平均肺動脈壓及右心肥厚指數(shù)測定
3.3 小鼠肺組織和肺動脈形態(tài)
3.4 免疫熒光檢測 caspase8、caspase9、鈣連蛋白
3.5 BIP 蛋白質(zhì)表達(dá)水平檢測
3.6 TUNEL 標(biāo)記法檢測小鼠肺結(jié)構(gòu)細(xì)胞凋亡比例
3.7 Western-Blot 及 Realtime-PCR 方 法 檢 測 CHOP 蛋 白 質(zhì) 及CHOPm RNA 表達(dá)水平
3.8 Western-Blot、Realtime-PCR 方法分別檢測 Bcl-2 信號通路Bcl-2、Bim、Puma 基因的蛋白質(zhì)及 m RNA 表達(dá)水平
3.9 Western-Blot、Realtime-PCR 方法檢測 DR5 信號通路 DR5 基因的蛋白質(zhì)及 m RNA 表達(dá)水平
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附圖
綜述
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本文編號:3820161
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