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內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激CHOP信號通路在COPD和COPD相關(guān)性肺動脈高壓小鼠中的作用及機制研究

發(fā)布時間:2023-05-20 00:11
  目的:明確內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激CHOP信號通路在香煙煙霧誘導(dǎo)COPD和COPD相關(guān)性肺動脈高壓發(fā)病中的作用及機制。方法:將野生型C57BL/6J雄性小鼠42只,隨機分為7組,分別為4月對照組、吸煙4月組、吸煙4月PBA干預(yù)組(吸煙4個月,起始即灌胃添加PBA)、6月對照組、吸煙6月組、吸煙6月PBA早干預(yù)組(吸煙6個月,起始即灌胃添加PBA)、吸煙6月PBA晚干預(yù)組(吸煙6個月,4個月后灌胃添加PBA)。檢測各組小鼠肺通氣功能,經(jīng)右心室穿刺檢測各組小鼠肺動脈壓,小鼠心臟稱重檢測右心指數(shù),光學(xué)顯微鏡觀察肺實質(zhì)結(jié)構(gòu)破壞情況和肺血管重構(gòu)情況。免疫熒光檢測內(nèi)質(zhì)網(wǎng)標志蛋白鈣連蛋白,利用TUNEL標記法檢測小鼠肺組織細胞凋亡比例,western-blot方法檢測內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標志蛋白BIP蛋白水平,Western-blot和RealTime-PCR方法分別檢測CHOP、Bcl-2、Bim、Puma、DR5基因蛋白質(zhì)和mRNA表達水平,western-blot方法及免疫熒光方法分別檢測caspase8和caspase9蛋白質(zhì)水平、caspase8和caspase9活性。結(jié)果:1.小鼠肺通氣功能結(jié)果:吸煙4月組較4...

【文章頁數(shù)】:74 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
主要縮略詞
第1章 緒論
第2章 材料與方法
    2.1 材料
    2.2 實驗方法
第3章 實驗結(jié)果
    3.1 小鼠肺通氣功能測定
    3.2 小鼠平均肺動脈壓及右心肥厚指數(shù)測定
    3.3 小鼠肺組織和肺動脈形態(tài)
    3.4 免疫熒光檢測 caspase8、caspase9、鈣連蛋白
    3.5 BIP 蛋白質(zhì)表達水平檢測
    3.6 TUNEL 標記法檢測小鼠肺結(jié)構(gòu)細胞凋亡比例
    3.7 Western-Blot 及 Realtime-PCR 方 法 檢 測 CHOP 蛋 白 質(zhì) 及CHOPm RNA 表達水平
    3.8 Western-Blot、Realtime-PCR 方法分別檢測 Bcl-2 信號通路Bcl-2、Bim、Puma 基因的蛋白質(zhì)及 m RNA 表達水平
    3.9 Western-Blot、Realtime-PCR 方法檢測 DR5 信號通路 DR5 基因的蛋白質(zhì)及 m RNA 表達水平
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻
附圖
綜述
    參考文獻
致謝



本文編號:3820161

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