糖尿病是由于胰島素缺乏或胰島素抵抗引起的一種慢性病,已經(jīng)成為嚴(yán)重危害人類健康的重大疾病。據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）預(yù)測(cè),到2030年糖尿病將成為全球死亡的第七大主要原因。實(shí)際上,比糖尿病本身更為嚴(yán)重的,是各種大血管和微血管方面的并發(fā)癥。糖尿病除了引發(fā)高血壓、冠心病、動(dòng)脈粥樣硬化等病癥之外,高血糖還對(duì)心臟直接造成損傷,使心臟結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生顯著改變,這種糖尿病直接引起心臟病變、獨(dú)立于其他病癥的并發(fā)癥被稱之為糖尿病性心肌�。―iabetic Cardiomyopathy,DCM）。DCM引起的心臟結(jié)構(gòu)改變的主要表現(xiàn)為心肌細(xì)胞肥大導(dǎo)致左心室重量增加、室壁增厚、腔體容積變大,顯著的膠原沉積和間質(zhì)纖維化導(dǎo)致心臟硬化和重構(gòu)。而功能上的變化首先是舒張功能的降低,隨著疾病發(fā)展到中晚期,收縮功能也可能發(fā)生下降,心輸出量（CO）大大降低,無法滿足機(jī)體對(duì)氧氣、養(yǎng)分和能量的需求,最終導(dǎo)致心力衰竭甚至死亡。DCM是糖尿病人死亡的主要原因。目前,DCM的治療依然缺乏有針對(duì)性的藥物,現(xiàn)有的治療手段無法滿足臨床需求,給糖尿病患者帶來巨大風(fēng)險(xiǎn)。針對(duì)這一問題,本課題以已上市藥物曲美他嗪（TMZ）作為對(duì)照,主要研究異甜菊醇鈉（... 

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞表
第一章 緒論 糖尿病性心肌病發(fā)病機(jī)制與藥物研發(fā)現(xiàn)狀
    1.1 概述
    1.2 糖尿病性心肌病的特征與診斷
        1.2.1 結(jié)構(gòu)變化
        1.2.2 功能變化
        1.2.3 診斷方法
    1.3 糖尿病性心肌病的發(fā)病機(jī)制
        1.3.1 病理因素
        1.3.2 分子信號(hào)通路
        1.3.3 代謝紊亂及調(diào)控信號(hào)通路
    1.4 針對(duì)糖尿病性心肌病的藥物開發(fā)
        1.4.1 流行病學(xué)與治療難題
        1.4.2 現(xiàn)有治療藥物
        1.4.3 新型藥物研發(fā)
    1.5 本課題的研究方案
    1.6 總結(jié)與展望
第二章 大鼠一型糖尿病性心肌病模型的建立與驗(yàn)證
    2.1 前言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 動(dòng)物
        2.2.2 試劑
        2.2.3 儀器設(shè)備
        2.2.4 耗材
        2.2.5 一型糖尿病模型構(gòu)建
        2.2.6 血糖濃度測(cè)定
        2.2.7 動(dòng)物分組
        2.2.8 活體動(dòng)物血液動(dòng)力學(xué)和心功能檢測(cè)
        2.2.9 內(nèi)臟分離與血漿制備
        2.2.10 組織學(xué)分析
        2.2.11 信使RNA(mRNA)表達(dá)水平檢測(cè)
        2.2.12 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 糖尿病心肌病的肥大和纖維化改變
        2.3.2 糖尿病心肌病變的心功能下降
        2.3.3 糖尿病心肌病變的肥大和纖維化標(biāo)志物的變化
    2.4 討論
        2.4.1 糖尿病性心肌病的動(dòng)物模型
        2.4.2 大鼠一型糖尿病引起的心肌病模型
    2.5 本章總結(jié)
第三章 異甜菊醇鈉對(duì)糖尿病性心肌病的保護(hù)作用
    3.1 前言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 試劑、藥液與耗材
        3.2.2 本研究用到的試劑盒清單
        3.2.3 PCR引物
        3.2.4 SDS-PAGE/Western blot檢測(cè)試劑
        3.2.5 儀器
        3.2.6 動(dòng)物造模與檢測(cè)等
        3.2.7 分組與給藥
        3.2.8 體重與生理常數(shù)測(cè)定
        3.2.9 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)
        3.2.10 組織總抗氧化(T-AOC)能力
        3.2.11 組織超氧化物歧化酶(SOD)活性
        3.2.12 組織還原型谷胱甘肽(GSH)水平檢測(cè)
        3.2.13 組織丙二醛(MDA)濃度測(cè)定
        3.2.14 組織三磷酸腺苷(ATP)含量檢測(cè)
        3.2.15 血漿甘油三酯(TG)分析
        3.2.16 血漿總膽固醇(T-CHO)檢測(cè)
        3.2.17 血漿谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)測(cè)定
        3.2.18 血清肌酐(Cr)測(cè)定
        3.2.19 血尿氮(BUN)檢測(cè)
        3.2.20 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)基因表達(dá)
        3.2.21 蛋白裂解與濃度測(cè)定
        3.2.22 蛋白電泳與雜交(SDS-PAGE/Western blotting)
        3.2.23 免疫組化染色(IHC)
        3.2.24 數(shù)據(jù)分析與統(tǒng)計(jì)
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 糖尿病引起大鼠體重下降及STVNa對(duì)體重的影響
        3.3.2 血糖濃度
        3.3.3 血漿胰島素濃度及胰島素抵抗指數(shù)
        3.3.4 STVNa提高心肌組織內(nèi)ATP水平
        3.3.5 糖尿病對(duì)心功能的影響及藥物的保護(hù)作用
        3.3.6 STVNa可有效抑制糖尿病引起的心肌肥大
        3.3.7 STVNa可有效緩解糖尿病引起的心肌纖維化
        3.3.8 STVNa可降低糖尿病引起的氧化應(yīng)激
        3.3.9 STVNa可顯著抑制糖尿病引起的炎癥反應(yīng)
        3.3.10 STVNa對(duì)血脂代謝無顯著影響
        3.3.11 STVNa可在一定程度上改善糖尿病引起的腎功能與肝功能下降
        3.3.12 STVNa不影響糖尿病導(dǎo)致的晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGE)
        3.3.13 藥物作用的分子信號(hào)通路檢測(cè)
        3.3.14 異甜菊醇鈉對(duì)正常大鼠的影響
    3.4 討論
        3.4.1 糖尿病心肌病變引起氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)
        3.4.2 STVNa對(duì)糖尿病大鼠機(jī)體代謝及內(nèi)臟損傷的保護(hù)作用
        3.4.3 STVNa分子作用機(jī)制的初步分析
        3.4.4 異甜菊醇與血糖、胰島素及糖尿病
        3.4.5 異甜菊醇鈉的安全性
        3.4.6 糖尿病性心肌病藥物開發(fā)
    3.5 本章總結(jié)
第四章 異甜菊醇鈉對(duì)高葡萄糖誘導(dǎo)的H9c2心肌細(xì)胞損傷的保護(hù)作用
    4.1 前言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 試劑
        4.2.2 耗材
        4.2.3 儀器設(shè)備
        4.2.4 細(xì)胞培養(yǎng)、傳代與計(jì)數(shù)
        4.2.5 高糖培養(yǎng)細(xì)胞的分組與藥物處理
        4.2.6 細(xì)胞活力測(cè)定
        4.2.7 細(xì)胞內(nèi)ROS水平檢測(cè)
        4.2.8 細(xì)胞裂解液的總抗氧化能力測(cè)定
        4.2.9 細(xì)胞培養(yǎng)上清液乳酸脫氫酶(LDH)活性測(cè)定
        4.2.10 總RNA提取、逆轉(zhuǎn)錄與實(shí)時(shí)定量熒光PCR檢測(cè)
        4.2.11 蛋白提取純化與濃度測(cè)定
        4.2.12 蛋白電泳與Western雜交分析
        4.2.13 細(xì)胞能量代謝儀測(cè)定心肌細(xì)胞糖酵解
        4.2.14 糖酵解及氧化磷酸化抑制與藥物作用研究
        4.2.15 核酸干擾(RNAi)檢測(cè)
        4.2.16 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 不同濃度葡萄糖對(duì)H9c2細(xì)胞活力的影響
        4.3.2 STVNa對(duì)高糖抑制的H9c2細(xì)胞活力的作用
        4.3.3 STVNa顯著抑制高糖引起的細(xì)胞膜損傷
        4.3.4 STVNa對(duì)過氧化氫抑制的H9c2細(xì)胞活力的作用
        4.3.5 STVNa及TMZ對(duì)正常H9c2細(xì)胞活力的影響
        4.3.6 STVNa有效抑制高葡萄糖引起的H9c2細(xì)胞肥大和纖維化
        4.3.7 STVNa抑制高糖引起的H9c2細(xì)胞氧化應(yīng)激
        4.3.8 STVNa有效抑制高葡萄糖誘導(dǎo)的H9c2細(xì)胞炎癥基因的表達(dá)
        4.3.9 STVNa對(duì)RAGE基因的表達(dá)無顯著影響
        4.3.10 STVNa抑制、TMZ激活糖尿病性心肌病激活的ERK信號(hào)通路
        4.3.11 STVNa及TMZ抑制糖尿病性心肌病激活的NF-κB信號(hào)通路
        4.3.12 TMZ顯著激活A(yù)MPK信號(hào)通路
        4.3.13 STVNa和TMZ都通過激活PI3K/Akt信號(hào)通路保護(hù)心肌細(xì)胞
        4.3.14 STVNa和TMZ對(duì)ROS相關(guān)的TRPC3/Nox-2的影響
        4.3.15 STVNa及TMZ對(duì)糖酵解的影響
        4.3.16 STVNa及TMZ對(duì)氧化磷酸化的影響
    4.4 討論
        4.4.1 高糖培養(yǎng)心肌細(xì)胞引起的信號(hào)通路改變
        4.4.2 STVNa及TMZ對(duì)高糖誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)紊亂的作用
        4.4.3 不同條件誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞損傷及藥物的保護(hù)作用
        4.4.4 STVNa對(duì)葡萄糖吸收與代謝作用的分析
        4.4.5 體外細(xì)胞模型作為DCM研究的局限性
    4.5 本章總結(jié)
結(jié)論與展望
    結(jié)論
    創(chuàng)新之處
    展望
參考文獻(xiàn)
攻讀博士學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
附件


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2型糖尿病大鼠心肌PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路的改變及Sirt1的調(diào)控機(jī)制研究[J]. 孫曉慧,王燕,牟艷玲.  中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2017(06)
[2]Parallel effects of β-adrenoceptor blockade on cardiac function and fatty acid oxidation in the diabetic heart: Confronting the maze[J]. Vijay Sharma,John H McNeill.  World Journal of Cardiology. 2011(09)

碩士論文
[1]STVNa對(duì)主動(dòng)脈高壓誘導(dǎo)的大鼠心肌肥厚的保護(hù)作用研究[D]. 陳潔娣.華南理工大學(xué) 2015



本文編號(hào)：3715527