高血壓（Hypertension）是一種慢性疾病狀態(tài),其主要表現(xiàn)為動(dòng)脈血壓持續(xù)升高。高血壓是冠狀動(dòng)脈疾病、中風(fēng)、心力衰竭、房顫、外周血管疾病、視力喪失、慢性腎病和癡呆的主要危險(xiǎn)因素。血管內(nèi)皮細(xì)胞通過自分泌和旁分泌方式維持血流動(dòng)態(tài)平衡以及血管張力穩(wěn)定,因此血管內(nèi)細(xì)胞功能障礙與高血壓密切相關(guān)。雷帕霉素（rapamycin）哺乳動(dòng)物雷帕霉素受體復(fù)合物1（mammalian target of rapamycin complex 1,mTORC1）抑制劑,臨床上常用為免疫抑制藥物。然而長(zhǎng)期服用雷帕霉素導(dǎo)致存在導(dǎo)致患者動(dòng)脈血壓升高的風(fēng)險(xiǎn)。近年來研究發(fā)現(xiàn),雷帕霉素通過抑制mTORC1活性導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂,但是其具體的致病機(jī)制尚不明確。本研究的目的:一方面為臨床上雷帕霉素用藥提供理論基礎(chǔ),另一方面揭示mTORC1對(duì)于維持內(nèi)皮細(xì)胞功能的重要作用。EC-Raptor^KD（內(nèi)皮細(xì)胞特異性敲低Raptor）小鼠和Raptor^flox（野生型）小鼠分別給予血管緊張素Ⅱ（AngiotensinⅡ,AngⅡ）緩釋泵4周,采用尾壓法（Tail-cuff法）測(cè)量小鼠... 

【文章頁(yè)數(shù)】：84 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
對(duì)象和方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.1.1 常用的化學(xué)試劑(均為市售分析純?cè)噭?
        1.1.2 細(xì)胞分離以及細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑
        1.1.3 動(dòng)物組織蛋白質(zhì)提取和蛋白質(zhì)印跡(Western Blotting)相關(guān)試劑
        1.1.4 抗體
        1.1.5 小分子干擾RNA技術(shù)
        1.1.6 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)相關(guān)試劑
        1.1.7 其他試劑
    1.2 實(shí)驗(yàn)使用主要試劑配制
        1.2.1 分離人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)所需試劑的配制
        1.2.2 培養(yǎng)細(xì)胞需要試劑的配制
        1.2.3 Western Blotting相關(guān)試劑的配制
        1.2.4 小鼠基因鑒定相關(guān)試劑配制
        1.2.5 動(dòng)脈環(huán)實(shí)驗(yàn)相關(guān)試劑的配置
    1.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
    1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.4.1 內(nèi)皮細(xì)胞特異性敲低Raptor蛋白小鼠基因鑒定
        1.4.2 尾壓法(Tail-cuff法)測(cè)量小鼠動(dòng)脈血壓
        1.4.3 內(nèi)皮細(xì)胞特異性敲低Raptor蛋白小鼠動(dòng)脈環(huán)實(shí)驗(yàn)
        1.4.4 小鼠組織樣品的獲取
        1.4.5 心臟組織HE染色
        1.4.6 小鼠血漿樣品代謝組學(xué)分析樣本的制備
        1.4.7 小鼠心功能檢測(cè)
        1.4.8 代謝組學(xué)血漿樣本LC-MS/MS的分析
    1.5 實(shí)驗(yàn)方法
        1.5.1 分離和培養(yǎng)原代HUVECs
        1.5.2 分離和培養(yǎng)小鼠肺原代內(nèi)皮細(xì)胞的
        1.5.3 細(xì)胞蛋白質(zhì)的提取與定量
        1.5.4 蛋白免疫印跡(Western Blotting)
        1.5.5 RNA干擾技術(shù)的方法
        1.5.6 超高壓液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(UPLC-MS/MS)檢測(cè)AA代謝產(chǎn)物
    1.6 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
    2.1 內(nèi)皮特異性敲低mTORC1功能亞基Raptor導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙并上調(diào)動(dòng)脈血壓
        2.1.1 內(nèi)皮細(xì)胞特異性敲低Raptor突變小鼠模型構(gòu)建
        2.1.2 內(nèi)皮細(xì)胞特異性敲低Raptor突變小鼠模型鑒定
        2.1.3 內(nèi)皮細(xì)胞特異性敲低Raptor導(dǎo)致小鼠動(dòng)脈血壓升高
        2.1.4 內(nèi)皮細(xì)胞特異性敲低Raptor蛋白導(dǎo)致心臟功能障礙
        2.1.5 內(nèi)皮細(xì)胞特異性敲低Raptor蛋白導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞依賴的舒張障礙
        2.1.6 內(nèi)皮細(xì)胞特異性敲低Raptor蛋白通過調(diào)節(jié)COX代謝通路影響血管內(nèi)皮依賴的舒張作用
    2.2 內(nèi)皮特異性敲低mTORC1功能亞基Raptor誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞AA代謝產(chǎn)物改變
        2.2.1 EC-RaptorKD模型小鼠COX通路代謝產(chǎn)物發(fā)生改變
        2.2.2 mTORC1對(duì)HUVECsAA代謝的影響
討論
    3.1 mTORC1參與動(dòng)脈血壓升高的發(fā)病過程
    3.2 mTORC1介導(dǎo)COX-2代謝途徑影響動(dòng)脈血壓
    3.3 mTORC1調(diào)節(jié)PGE2的合成
    3.4 展望
結(jié)論
    一：ECmTORC1功能障礙導(dǎo)致EC依賴的舒張障礙誘導(dǎo)小鼠動(dòng)脈血壓升高
    二：ECmTORC1功能障礙降低COX-2代謝通路PGE2的含量
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述 mTOR信號(hào)通路及其在心血管疾病中的研究
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3705635