第一部分缺氧/復(fù)氧（Hypoxia/Reoxygenation H/R）心肌細(xì)胞中加入維拉帕米（不同濃度）后對(duì)其存活率的影響。 目的:經(jīng)過(guò)體外培養(yǎng)H9C2心室肌細(xì)胞，構(gòu)建缺氧/復(fù)氧模型，及加入不同濃度鈣離子拮抗劑-維拉帕米后，通過(guò)對(duì)不同濃度維拉帕米作用于缺氧復(fù)氧心肌細(xì)胞后對(duì)細(xì)胞存活率的影響研究，確定影響缺氧/復(fù)氧心肌細(xì)胞凋亡及自噬的最佳維拉帕米濃度。 方法:1.在無(wú)菌細(xì)胞培養(yǎng)室對(duì)H9C2心肌細(xì)胞進(jìn)行無(wú)菌培養(yǎng)，培養(yǎng)基使用DMEM培養(yǎng)基（含10%胎牛血清），D-Hanks液為預(yù)先配制，第二天使用D-Hanks液進(jìn)行換液，在倒置相差顯微鏡下檢測(cè)心肌細(xì)胞的搏動(dòng)情況及狀態(tài)、生長(zhǎng)情況等。 2.進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)選用傳代培養(yǎng)第3-4代的單層心肌細(xì)胞，把生長(zhǎng)良好的心肌細(xì)胞隨機(jī)分為下列五組：①不對(duì)細(xì)胞進(jìn)行任何處理，即空白對(duì)照組；②缺氧/復(fù)氧組；③缺氧/復(fù)氧+維拉帕米0.5mg/l組；④缺氧/復(fù)氧+維拉帕米組1.0mg/l組；⑤缺氧/復(fù)氧+維拉帕米4.0mg/l組； 3.用噻唑藍(lán)染色法（MTT法）檢測(cè)各組心肌細(xì)胞的存活率。結(jié)果:1.經(jīng)傳代培養(yǎng)的心肌細(xì)胞生長(zhǎng)良好，培養(yǎng)液透明清澈，顯微鏡下觀察... 

【文章頁(yè)數(shù)】：53 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 不同濃度維拉帕米對(duì)缺氧/復(fù)氧心肌細(xì)胞存活率的影響
第二部分 維拉帕米通過(guò)自噬途徑對(duì)缺氧/復(fù)氧心肌細(xì)胞保護(hù)機(jī)制的研究
結(jié)論
討論
參考文獻(xiàn)
附圖
綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]自噬在卵巢癌中的研究進(jìn)展[J]. 包靈潔,易曉芳.  國(guó)際婦產(chǎn)科學(xué)雜志. 2013(01)
[2]Beclin1與mTOR對(duì)心肌缺血/再灌注損傷中自噬的交互調(diào)控機(jī)制[J]. 馬芹芹,劉立亞,黃秀蘭.  心臟雜志. 2012(03)
[3]自噬參與心臟疾病調(diào)控的研究進(jìn)展[J]. 謝鳳,柳威,陳臨溪.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2012(03)
[4]缺血再灌注損傷誘導(dǎo)心肌細(xì)胞自噬相關(guān)基因過(guò)表達(dá)[J]. 肖健,何斌,朱曉燕,張宇峰,康波,王志農(nóng).  第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(07)
[5]鈣拮抗劑對(duì)缺氧/復(fù)氧心肌細(xì)胞早期生長(zhǎng)反應(yīng)基因的作用及抗損傷的研究[J]. 鄭付春,黃展勤,石剛剛.  中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2011(06)
[6]自噬研究進(jìn)展[J]. 王雄,譚璐.  亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥. 2010(10)
[7]細(xì)胞缺氧復(fù)氧模型建立方法的研究進(jìn)展[J]. 關(guān)欣,李應(yīng)東.  醫(yī)學(xué)綜述. 2008(18)
[8]淫羊藿苷預(yù)適應(yīng)對(duì)乳鼠心肌細(xì)胞的保護(hù)作用[J]. 潘志偉,王秋娟,柳仁民,孔令義.  中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào). 2007(01)
[9]不同濃度維拉帕米對(duì)缺氧-復(fù)氧心肌細(xì)胞的作用[J]. 王達(dá)理,喬樂(lè)士,南柏松.  中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2000(06)
[10]在體外乳鼠心肌細(xì)胞缺氧的損傷及利多卡因的保護(hù)作用[J]. 杜敏逸,紀(jì)方,吳新民.  中華麻醉學(xué)雜志. 1999(03)



本文編號(hào)：3696206