【目的】探討miR-224（MircoRNA-224,miR-224）對人血管平滑肌細胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）脂質(zhì)蓄積的影響及分子機制�！痉椒ā浚�1）利用GEO數(shù)據(jù)庫中基因芯片數(shù)據(jù)對小鼠動脈粥樣硬化（atherosclerosis,As）斑塊中的miRNA表達情況進行生物信息學(xué)分析;采用qRT-PCR檢測miR-224在oxLDL處理人VSMCs中的表達情況。（2）將miR-224 mimics轉(zhuǎn)染人VSMCs,再分別加入Dil-oxLDL（20μg/ml）孵育4小時或oxLDL（50μg/ml）處理24小時,采用熒光顯微鏡觀察細胞對Dil-oxLDL的攝取、油紅O染色觀察細胞內(nèi)脂滴以及總膽固醇（Total cholesterol,TC）檢測試劑盒分析細胞內(nèi)TC含量,以觀察miR-224對VSMCs脂質(zhì)蓄積的影響。（3）miR-224 mimics轉(zhuǎn)染VSMCs后不加或加oxLDL處理,運用qRT-PCR、Western blot檢測VSMCs上清道夫受體LOX-1表達的情況,利用生物信息學(xué)方法分析miR-224與LOX-1 3’UTR... 

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
主要縮略詞語中英文索引
第1章 緒論
第2章 實驗材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 細胞及主要試劑
        2.1.2 實驗儀器及耗材
        2.1.3 主要試劑配制
    2.2 實驗方法
        2.2.1 VSMCs復(fù)蘇
        2.2.2 VSMCs傳代培養(yǎng)
        2.2.3 VSMCs的凍存
        2.2.4 miR-224 mimics轉(zhuǎn)染VSMCs
        2.2.5 PCSK9慢病毒轉(zhuǎn)染VSMCs
        2.2.6 PCSK9 siRNA轉(zhuǎn)染VSMCs
        2.2.7 提VSMCs蛋白
        2.2.8 Western blot
        2.2.9 油紅O染色
        2.2.10 VSMCs攝取Dil-oxLDL觀察
        2.2.11 細胞TC測定
        2.2.12 qRT-PCR
        2.2.13 統(tǒng)計分析
第3章 實驗結(jié)果
    3.1 miR-224 在小鼠As斑塊及ox LDL處理VSMCs中的表達
    3.2 miR-224 對ox LDL誘導(dǎo)的VSMCs脂質(zhì)蓄積的影響
    3.3 miR-224 對VSMCs中LOX-1 表達的影響以及與LOX-13'UTR之間的靶向結(jié)合情況
    3.4 miR-224 候選靶基因 PCSK9對VSMCs中LOX-1 表達的影響
    3.5 miR-224 與 PCSK9 3'UTR 靶向結(jié)合情況
    3.6 miR-224 對VSMCs中PCSK9表達的影響
    3.7 PCSK9過表達對miR-224 抑制VSMCs中LOX-1 表達和脂質(zhì)蓄積作用的影響
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
碩士期間發(fā)表論文
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]microRNA調(diào)節(jié)細胞自噬影響動脈粥樣硬化[J]. 劉亞密,曾召林,陳姣姣,陶軍,王佐.  中國動脈硬化雜志. 2018(12)
[2]不要低估血管平滑肌細胞在動脈粥樣硬化斑塊形成中的作用[J]. 溫進坤.  中國動脈硬化雜志. 2018(07)
[3]冠心病患者PCSK9和脂蛋白（a）水平與冠狀動脈病變程度的相關(guān)性[J]. 李紅艷.  中國動脈硬化雜志. 2016(06)



本文編號：3682760