研究背景:Kv7.1是一類(lèi)電壓依賴(lài)的鉀通道,由KCNQ1基因編碼,與KCNE1基因編碼的mink蛋白相互作用形成復(fù)合體,產(chǎn)生緩慢激活的延遲整流鉀電流(low delayed rectifier potassium current,I_Ks),在心肌細(xì)胞動(dòng)作電位（action potential,AP）的復(fù)極化中發(fā)揮重要作用。研究報(bào)道Kv7.1通道的功能增強(qiáng)與降低都易誘發(fā)心律失常,因此,Kv7.1通道蛋白的穩(wěn)定性至關(guān)重要。近年來(lái),研究人員新發(fā)現(xiàn)一種類(lèi)泛素蛋白FAT10（F-AdjacentTranscript-10,FAT10）,參與了體內(nèi)眾多蛋白質(zhì)的翻譯和修飾。我們團(tuán)隊(duì)首次證實(shí)在心肌細(xì)胞中FAT10通過(guò)拮抗特異性底物的泛素化水平來(lái)穩(wěn)定底物蛋白的表達(dá),進(jìn)而對(duì)心肌具有保護(hù)作用。然而,FAT10和Kv7.1之間的調(diào)控關(guān)系尚不明確。研究目的:本研究試圖揭示FAT10是否調(diào)控Kv7.1的表達(dá),并進(jìn)一步闡明FAT10調(diào)控Kv7.1表達(dá)的具體分子機(jī)制。研究方法:1.明確FAT10對(duì)Kv7.1表達(dá)的調(diào)控作用:利用原代乳鼠心肌細(xì)胞（neonatal rat cardiomyocyte... 

【文章頁(yè)數(shù)】：51 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
中英文縮略詞表
第1章 前言
第2章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)所需細(xì)胞
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備和儀器
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)所需主要試劑
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)所需主要試劑配置
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 .乳鼠原代心肌細(xì)胞的分離與培養(yǎng)
        2.2.2 原代心肌細(xì)胞總蛋白提取
        2.2.3 BCA蛋白濃度的測(cè)定
        2.2.4 SDS-PAGE蛋白凝膠電泳
        2.2.5 蛋白質(zhì)印記抗體標(biāo)記與顯色
        2.2.6 心肌細(xì)胞RNA提取和測(cè)定
        2.2.7 逆轉(zhuǎn)錄PCR合成c DNA
        2.2.8 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)
        2.2.9 腺病毒載體的選擇和構(gòu)建
        2.2.10 干擾片段的選擇和構(gòu)建
        2.2.11 細(xì)胞免疫熒光
        2.2.12 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第3章 結(jié)果
    3.1 原代心肌細(xì)胞內(nèi)FAT10 調(diào)控Kv7.1 蛋白表達(dá)
    3.2 原代心肌細(xì)胞中FAT10與Kv7.1 相互結(jié)合
    3.3 原代心肌細(xì)胞中Kv7.1經(jīng)UPS降解
    3.4 FAT10 通過(guò)抑制Kv7.1 的泛素化穩(wěn)定其表達(dá)
        3.4.1 FAT10 通過(guò)UPS調(diào)控Kv7.1 的蛋白表達(dá)
        3.4.2 FAT10 影響Kv7.1 的泛素化水平
第4章 討論
第5章 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究結(jié)果
綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]心房顫動(dòng)發(fā)病機(jī)制的基因?qū)W研究進(jìn)展[J]. 陳芳,楊承健.  中華老年心腦血管病雜志. 2015(07)
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[4]KCNQ1基因與孤立性心房顫動(dòng)患者關(guān)系的探討[J]. 豐明俊,儲(chǔ)慧民,崔翰斌,何斌,劉晶,郁一波,沈才杰,陳曉敏.  中華心血管病雜志. 2013 (01)
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博士論文
[1]短QT綜合征的分子遺傳及細(xì)胞電生理機(jī)制研究[D]. 胡金柱.南昌大學(xué) 2012

碩士論文
[1]KCNQ1基因孔區(qū)突變導(dǎo)致LQT1的機(jī)制研究[D]. 馬開(kāi)龍.西南醫(yī)科大學(xué) 2018



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