目的探究體外誘導(dǎo)兔原代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs）分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞（vessel endothelial cells,VECs）和起搏樣細(xì)胞（pacemaker-like cells）的方法和途徑,構(gòu)建體外三維血管化組織工程竇房結(jié),為心血管疾病的生物起搏提供治療策略。方法1提取兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞:提取骨髓,采用全骨髓貼壁法分離純化骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,并觀察其形態(tài)學(xué)及生長(zhǎng)增殖情況。2誘導(dǎo)為起搏樣細(xì)胞:分離兔心臟竇房結(jié),并采用差速貼壁法聯(lián)合5-溴脫氧尿嘧啶核苷（5-Brd U）法分離純化竇房結(jié)細(xì)胞,觀察并記錄生長(zhǎng)情況;用反復(fù)凍融法制備竇房結(jié)細(xì)胞裂解液,以此作為誘導(dǎo)劑將骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)為起搏樣細(xì)胞,免疫熒光染色法檢測(cè)誘導(dǎo)后的起搏樣細(xì)胞表面標(biāo)志物超極化激活的環(huán)核苷酸門(mén)控陽(yáng)離子通道HCN2（Hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated cation,HCN）的表達(dá)和免疫細(xì)胞化學(xué)染色法檢測(cè)誘導(dǎo)后的起搏樣細(xì)胞表面標(biāo)志物肌鈣蛋白T（c Tn T）的表達(dá),... 

【文章來(lái)源】：華北理工大學(xué)河北省

【文章頁(yè)數(shù)】：56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
第1章 實(shí)驗(yàn)研究
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及試劑
        1.1.2 兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離、培養(yǎng)及形態(tài)學(xué)觀察
        1.1.3 兔血管內(nèi)皮細(xì)胞的分離、培養(yǎng)、誘導(dǎo)及鑒定
        1.1.4 兔原代竇房結(jié)細(xì)胞分離、培養(yǎng)及形態(tài)學(xué)觀察
        1.1.5 兔竇房結(jié)細(xì)胞裂解液的制備
        1.1.6 兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為起搏樣細(xì)胞的培養(yǎng)、鑒定
        1.1.7 體外構(gòu)建三維血管化組織工程竇房結(jié)
        1.1.8 統(tǒng)計(jì)分析
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的原代培養(yǎng)
        1.2.2 兔原代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞傳代培養(yǎng)
        1.2.3 兔原代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)為血管內(nèi)皮細(xì)胞
        1.2.4 兔原代竇房結(jié)細(xì)胞的分離、提取及細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察
        1.2.5 兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)成起搏樣細(xì)胞
        1.2.6 體外構(gòu)建血管化組織工程竇房結(jié)
    1.3 討論
        1.3.1 兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)為起搏樣細(xì)胞
        1.3.2 兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)為血管內(nèi)皮細(xì)胞
        1.3.3 體外構(gòu)建血管化組織工程竇房結(jié)
    1.4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第2章 綜述
    2.1 心臟起搏樣細(xì)胞的分子機(jī)制
    2.2 心臟起搏樣細(xì)胞和HCN通道
    2.3 生物起搏器構(gòu)建的種子細(xì)胞
    2.4 構(gòu)建生物起搏的常用方式
        2.4.1 干細(xì)胞誘導(dǎo)
        2.4.2 基因轉(zhuǎn)染
        2.4.3 細(xì)胞融合
    2.5 生物起搏器的支架材料
    2.6 生物起搏器的移植方式
    2.7 生物起搏器的存在問(wèn)題
    2.8 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
結(jié)論
致謝
導(dǎo)師簡(jiǎn)介
作者簡(jiǎn)介
學(xué)位論文數(shù)據(jù)集


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]膠原水凝膠與基質(zhì)膠作為骨組織工程支架材料表面涂層修飾效果的比較研究[J]. 朱永佳,靳攀,何熠,繆志康,韋慶軍.  微創(chuàng)醫(yī)學(xué). 2018(02)
[3]縫隙連接蛋白α7促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞轉(zhuǎn)化為心臟起搏樣細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 林毅漳,張晨亮,肖華,林樹(shù),宋治遠(yuǎn).  第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(10)
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[9]心臟自體干細(xì)胞移植治療心肌梗死新進(jìn)展[J]. 房昊,安毅.  科技視界. 2016(24)
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博士論文
[1]人牙齦成纖維細(xì)胞構(gòu)建組織工程化血管的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 劉旭倩.河北醫(yī)科大學(xué) 2016
[2]血管化組織工程化竇房結(jié)的構(gòu)建及應(yīng)用基礎(chǔ)研究[D]. 張璐萍.第二軍醫(yī)大學(xué) 2013
[3]骨髓源性多能成體祖細(xì)胞向起搏細(xì)胞的誘導(dǎo)分化[D]. 劉艷春.第二軍醫(yī)大學(xué) 2010

碩士論文
[1]間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)血管內(nèi)皮前體細(xì)胞分化影響的研究[D]. 葛權(quán)虎.石河子大學(xué) 2017
[2]HCN2基因修飾的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞源性起搏細(xì)胞的變時(shí)性相關(guān)受體的研究[D]. 楊翠翠.安徽醫(yī)科大學(xué) 2017
[3]棕色脂肪組織來(lái)源的干細(xì)胞向起搏細(xì)胞的定向分化[D]. 鄧子軍.第二軍醫(yī)大學(xué) 2013
[4]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為具有起搏功能的心肌樣細(xì)胞[D]. 蔣偉.鄭州大學(xué) 2010
[5]慢病毒介導(dǎo)hHCN4基因體外轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞構(gòu)建生物起搏器的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 李曉剛.蘇州大學(xué) 2009



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