研究背景和目的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子165在機(jī)體內(nèi)具有強(qiáng)大的促進(jìn)血管生成的作用,利用這一特性,人們將其視為治療心肌梗死等缺血性疾病的潛在突破點(diǎn)。許多研究表明:VEGF165能夠減少心肌梗死面積,促進(jìn)干細(xì)胞遷移至缺血部位,預(yù)防心室重構(gòu),抗心肌細(xì)胞凋亡,通過(guò)多個(gè)途徑發(fā)揮保護(hù)心肌細(xì)胞的作用。但VEGF165對(duì)心肌細(xì)胞電活動(dòng)的直接影響及可能的機(jī)制仍未闡明。I_ks通道在哺乳動(dòng)物的心肌細(xì)胞上廣泛分布,是影響心肌細(xì)胞動(dòng)作電位復(fù)極過(guò)程的重要離子通道。目前認(rèn)為I_ks通道由α亞單位（KCNQ1基因編碼）和β亞單位（KCNE1基因編碼）組成。本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用細(xì)胞轉(zhuǎn)染和膜片鉗等技術(shù),分析VEGF165對(duì)異源表達(dá)的KCNQ1/KCNE1通道電流的影響,并探討其可能的機(jī)制。研究方法將人胚腎293細(xì)胞隨機(jī)分為對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)A組和實(shí)驗(yàn)B組,對(duì)照組細(xì)胞正常培養(yǎng),不做特殊處理,實(shí)驗(yàn)A組細(xì)胞導(dǎo)入含有KDR、KCNQ1和KCNE1基因的質(zhì)粒,實(shí)驗(yàn)B組細(xì)胞導(dǎo)入含KDR和KCNQ1基因的質(zhì)粒,外源基因?qū)爰s48小時(shí)后,PCR技術(shù)被用來(lái)驗(yàn)證轉(zhuǎn)染是否成功。實(shí)驗(yàn)A組和實(shí)驗(yàn)B組人胚腎293細(xì)胞均經(jīng)同樣濃度的... 

【文章來(lái)源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

PCR檢測(cè)實(shí)驗(yàn)A組的目的基因表達(dá)情況

結(jié) 果1 PCR 結(jié)果PCR 結(jié)果見(jiàn)圖 1。由圖可見(jiàn)，對(duì)照組中的人胚腎 293 細(xì)胞無(wú) KCNQ1、KCNE1和 KDR 條帶，在實(shí)驗(yàn) A 組中，導(dǎo)入 KDR、KCNQ1 和 KCNE1 基因的人胚腎 293細(xì)胞可見(jiàn)明顯條帶，說(shuō)明轉(zhuǎn)染成功，轉(zhuǎn)入的三個(gè)目的基因均可以有效表達(dá)。同理可見(jiàn)圖 2，在實(shí)驗(yàn) B 組中，導(dǎo)入人胚腎 293 細(xì)胞的 KCNQ1 和 KDR 基因亦能有效的表達(dá)。圖 1. PCR 檢測(cè)實(shí)驗(yàn) A 組的目的基因表達(dá)情況

11圖 3. VEGF165 對(duì)實(shí)驗(yàn) A 組人胚腎 293 細(xì)胞 KCNQ1/KCNE1 電流的影響（樣本量 n=7）A、在 100ng/ml 濃度的 VEGF165 處理前后，KCNQ1/KCNE1 電流的記錄圖像；B、VEGF165 處理前后的 KCNQ1/KCNE1 標(biāo)準(zhǔn)化激活電流的 I-V曲線；C、VEGF165 處理前后的 KCNQ1/KCNE1 標(biāo)準(zhǔn)化尾電流的 I-V曲線

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]升清降濁湯聯(lián)合重組人血管內(nèi)皮抑制素腹腔灌注對(duì)惡性腹水患者血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的影響[J]. 馮高飛,陳若,易舒婧,涂軒,劉鵬,鐘元濤,胡世平.  中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合消化雜志. 2019(01)
[2]Safety and efficacy of frequency-domain optical coherence tomography in evaluating and treating intermediate coronary lesions[J]. Mohammad Reeaze Khurwolah,Hao-Yu Meng,Yong-Sheng Wang,Lian-Sheng Wang,Xiang-Qing Kong.  World Journal of Cardiology. 2018(11)
[3]冠心病規(guī)范化二級(jí)預(yù)防的臨床結(jié)果分析[J]. 趙桂琴,狄文娟,郭振峰.  醫(yī)學(xué)綜述. 2018(21)
[4]高血壓視網(wǎng)膜病變與冠心病的相關(guān)性分析[J]. 王彥斌,陳小平,尚小森.  中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志. 2018(15)
[5]科研工作者對(duì)干細(xì)胞移植倫理認(rèn)知的質(zhì)性研究及啟示[J]. 劉博,張浩為.  中國(guó)醫(yī)學(xué)倫理學(xué). 2018(07)
[6]《中國(guó)心血管病報(bào)告2017》要點(diǎn)解讀[J]. 馬麗媛,吳亞哲,王文,陳偉偉.  中國(guó)心血管雜志. 2018(01)
[7]NSCLC相關(guān)的惡性胸腔積液中VEGF表達(dá)及臨床意義研究進(jìn)展[J]. 陳瑤,盧宏達(dá).  江漢大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2018(01)
[8]膜片鉗技術(shù)在慢性痛大鼠背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元電生理學(xué)特性改變中的應(yīng)用[J]. 蔡捷,方東,李松,邢國(guó)剛.  中國(guó)疼痛醫(yī)學(xué)雜志. 2017(01)
[9]血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子促進(jìn)慢性心肌梗死血管生成[J]. 陳成,錢軍嶺,陳濤,葛敏,王東進(jìn).  醫(yī)學(xué)研究雜志. 2016(11)
[10]視覺(jué)神經(jīng)細(xì)胞電生理技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 邢家銘,嚴(yán)興科,馬重兵,盛雪燕,朱田田,韓雅迪.  中國(guó)中醫(yī)眼科雜志. 2014(04)



本文編號(hào)：3606911