研究背景和目的血管內(nèi)皮生長因子165在機體內(nèi)具有強大的促進血管生成的作用,利用這一特性,人們將其視為治療心肌梗死等缺血性疾病的潛在突破點。許多研究表明:VEGF165能夠減少心肌梗死面積,促進干細胞遷移至缺血部位,預(yù)防心室重構(gòu),抗心肌細胞凋亡,通過多個途徑發(fā)揮保護心肌細胞的作用。但VEGF165對心肌細胞電活動的直接影響及可能的機制仍未闡明。I_ks通道在哺乳動物的心肌細胞上廣泛分布,是影響心肌細胞動作電位復(fù)極過程的重要離子通道。目前認為I_ks通道由α亞單位（KCNQ1基因編碼）和β亞單位（KCNE1基因編碼）組成。本實驗運用細胞轉(zhuǎn)染和膜片鉗等技術(shù),分析VEGF165對異源表達的KCNQ1/KCNE1通道電流的影響,并探討其可能的機制。研究方法將人胚腎293細胞隨機分為對照組、實驗A組和實驗B組,對照組細胞正常培養(yǎng),不做特殊處理,實驗A組細胞導(dǎo)入含有KDR、KCNQ1和KCNE1基因的質(zhì)粒,實驗B組細胞導(dǎo)入含KDR和KCNQ1基因的質(zhì)粒,外源基因?qū)爰s48小時后,PCR技術(shù)被用來驗證轉(zhuǎn)染是否成功。實驗A組和實驗B組人胚腎293細胞均經(jīng)同樣濃度的... 

【文章來源】：鄭州大學河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

PCR檢測實驗A組的目的基因表達情況

結(jié) 果1 PCR 結(jié)果PCR 結(jié)果見圖 1。由圖可見，對照組中的人胚腎 293 細胞無 KCNQ1、KCNE1和 KDR 條帶，在實驗 A 組中，導(dǎo)入 KDR、KCNQ1 和 KCNE1 基因的人胚腎 293細胞可見明顯條帶，說明轉(zhuǎn)染成功，轉(zhuǎn)入的三個目的基因均可以有效表達。同理可見圖 2，在實驗 B 組中，導(dǎo)入人胚腎 293 細胞的 KCNQ1 和 KDR 基因亦能有效的表達。圖 1. PCR 檢測實驗 A 組的目的基因表達情況

11圖 3. VEGF165 對實驗 A 組人胚腎 293 細胞 KCNQ1/KCNE1 電流的影響（樣本量 n=7）A、在 100ng/ml 濃度的 VEGF165 處理前后，KCNQ1/KCNE1 電流的記錄圖像；B、VEGF165 處理前后的 KCNQ1/KCNE1 標準化激活電流的 I-V曲線；C、VEGF165 處理前后的 KCNQ1/KCNE1 標準化尾電流的 I-V曲線

【參考文獻】：
期刊論文
[1]升清降濁湯聯(lián)合重組人血管內(nèi)皮抑制素腹腔灌注對惡性腹水患者血管內(nèi)皮生長因子的影響[J]. 馮高飛,陳若,易舒婧,涂軒,劉鵬,鐘元濤,胡世平.  中國中西醫(yī)結(jié)合消化雜志. 2019(01)
[2]Safety and efficacy of frequency-domain optical coherence tomography in evaluating and treating intermediate coronary lesions[J]. Mohammad Reeaze Khurwolah,Hao-Yu Meng,Yong-Sheng Wang,Lian-Sheng Wang,Xiang-Qing Kong.  World Journal of Cardiology. 2018(11)
[3]冠心病規(guī)范化二級預(yù)防的臨床結(jié)果分析[J]. 趙桂琴,狄文娟,郭振峰.  醫(yī)學綜述. 2018(21)
[4]高血壓視網(wǎng)膜病變與冠心病的相關(guān)性分析[J]. 王彥斌,陳小平,尚小森.  中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志. 2018(15)
[5]科研工作者對干細胞移植倫理認知的質(zhì)性研究及啟示[J]. 劉博,張浩為.  中國醫(yī)學倫理學. 2018(07)
[6]《中國心血管病報告2017》要點解讀[J]. 馬麗媛,吳亞哲,王文,陳偉偉.  中國心血管雜志. 2018(01)
[7]NSCLC相關(guān)的惡性胸腔積液中VEGF表達及臨床意義研究進展[J]. 陳瑤,盧宏達.  江漢大學學報(自然科學版). 2018(01)
[8]膜片鉗技術(shù)在慢性痛大鼠背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元電生理學特性改變中的應(yīng)用[J]. 蔡捷,方東,李松,邢國剛.  中國疼痛醫(yī)學雜志. 2017(01)
[9]血管內(nèi)皮生長因子促進慢性心肌梗死血管生成[J]. 陳成,錢軍嶺,陳濤,葛敏,王東進.  醫(yī)學研究雜志. 2016(11)
[10]視覺神經(jīng)細胞電生理技術(shù)研究進展[J]. 邢家銘,嚴興科,馬重兵,盛雪燕,朱田田,韓雅迪.  中國中醫(yī)眼科雜志. 2014(04)



本文編號：3606911