目的:糖尿病大血管并發(fā)癥是糖尿病患者致殘、致死的主要原因,高糖引起的血管內(nèi)皮功能損傷是大血管并發(fā)癥的始動因素和病理生理學(xué)基礎(chǔ)。西格列汀（sitagliptin）是一種二肽基肽酶-4 抑制劑（Dipeptidyl peptidase-4 inhibitor,DPP-4 inhibitor）,近年來作為一種口服降糖藥應(yīng)用于臨床。既往研究顯示西格列汀除了具有降低血糖的作用,還可通過保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞功能延緩動脈粥樣硬化的發(fā)生,但作用機(jī)制不明確。自噬是近些年的研究熱點之一,在糖尿病及其并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用,但自噬在糖尿病大血管并發(fā)癥發(fā)生發(fā)展中的作用及作用機(jī)制不明。本研究以糖尿病大鼠和高糖培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞為研究對象,觀察西格列汀對血管內(nèi)皮細(xì)胞的作用,并探討自噬在其中發(fā)揮的作用,旨在為糖尿病大血管病變的發(fā)生機(jī)制和干預(yù)策略提供一定的理論支持。方法:隨機(jī)選取8只5周齡SD大鼠標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng),作為正常對照組。選取42只5周齡SD大鼠,高脂飼料喂養(yǎng)4周后予鏈脲佐菌素30mg/kg腹腔注射,1周后測隨機(jī)血糖,連續(xù)兩次隨機(jī)血糖≥16.7mmol/l即為2型糖尿病造模成功。將造模成功的大鼠隨機(jī)分為糖... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．２干預(yù)后各組大鼠體重變化??Ａ：各組大鼠的體重變化趨勢；Ｂ：各組大鼠干預(yù)前后體重增量

不會被熒光標(biāo)記。這就是ＴＵＮＥＬ檢測的原理。與正常細(xì)胞相比，凋亡細(xì)胞體積縮??小，ＴＵＮＥＬ染色呈綠色亮點，而正常細(xì)胞核呈藍(lán)色。在我們的研宄中，ＴＵＮＥＬ染??色結(jié)果（圖１．４）顯示正常對照組很少出現(xiàn)凋亡細(xì)胞，糖尿病組主動脈部分內(nèi)皮細(xì)??胞出現(xiàn)凋亡，而西格列汀干預(yù)組的凋亡細(xì)胞較糖尿病組明顯減少（；７＜０．０５）。??２３??

大鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞中ＬＣ３的表達(dá)，使用ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ檢測各組大鼠血管組織中??ＬＣ３ＩＩ／ＬＣ３Ｉ水平。免疫組化結(jié)果顯示糖尿病組主動脈內(nèi)皮細(xì)胞的ＬＣ３表達(dá)較正常對??照組增加，西格列汀干預(yù)組的ＬＣ３表達(dá)較糖尿病組降低（圖１．５Ａ）。Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ??結(jié)果（圖１．５Ｂ，Ｃ）顯示，與正常對照組相比，糖尿病組主動脈組織的ＬＣ３ＩＩ表達(dá)??升高，西格列汀干預(yù)組ＬＣ３ＩＩ表達(dá)較糖尿病組明顯降低（；？＜０．０５）。ｐ６２介導(dǎo)泛素化??蛋白的自噬性降解，可以反映自噬底物降解程度。通常情況下，ｐ６２蛋白的總量與??自噬呈負(fù)相關(guān)，自噬受抑制，則ｐ６２蛋白堆積，自噬激活，ｐ６２蛋白水平下降。本??實驗中（圖１．５Ｄ，Ｅ），糖尿病組大鼠主動脈組織中ｐ６２表達(dá)較正常組大鼠明顯降低??（；？＜０．０５），提示自噬激活，在西格列汀干預(yù)后，ｐ６２表達(dá)有進(jìn)一步降低的趨勢，但??無統(tǒng)計學(xué)差異０＝０．０５５）。??２５??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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