背景和目的冠狀動脈閉塞由病變血管粥樣斑塊內或內膜下出血、管腔內血栓形成或動脈持久性痙攣,使管腔發(fā)生完全或不完全的閉塞,導致心臟灌注不足,使得心臟組織的缺血,可破壞心肌細胞而引起的心肌梗死。心肌細胞對于維持心臟功能是至關重要的。成熟的心肌細胞處于終末分化狀態(tài),永久性地退出細胞周期,幾乎沒有再生能力,無法實現心肌損傷后的自我修復。哺乳動物心臟損傷發(fā)生后主要反應是心肌纖維化、非收縮性疤痕組織的形成,使心臟功能受損,最終導致心衰發(fā)生。因此,促進退出細胞周期的心肌細胞再次進入細胞周期,補充丟失的心肌細胞,是實現心肌再生的關鍵（1）。在胚胎早期,小鼠心肌細胞的增殖水平很高,從胚胎第10-12天附近細胞增殖水平開始下降。出生后第2周,許多心肌細胞發(fā)生“細胞質不分裂”有絲分裂,產生雙核心肌細胞。之后大多數心肌細胞處于細胞周期停滯狀態(tài)（2,3）。近年在成年哺乳動物的心臟中發(fā)現存在心肌細胞增殖現象（4）。然而,心肌細胞增殖能力極其有限,且遠不足以恢復損傷后的心臟功能（5,6）。目前有關出生后階段如何發(fā)生不可逆的細胞周期停滯機制尚不清楚。因此,通過分析新生及成年心肌細胞的細胞周期活性之間的差異,了解心肌細胞... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學廣東省

【文章頁數】：76 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．１?ｌｅｔ－７ｉ在小鼠的心肌細胞表達水平分別�。茫担罚拢蹋叮市律碧忑g、７天齡、

圖２．１心肌梗死心電圖??４．６左心室（ＬＶ）纖維化面枳分析??進行Ｍａｓｓｏｎ＇ｓ染色以定量損傷后左心室中的纖淮化區(qū)域。裝備有ＣＣＤ??（Ｍａｇｎａ－Ｆｉｒｅ?ＴＭ）相機的Ｏｌｙｍｐｕｓ?ＢＸ４１顯微鏡在每張載玻片上捕獲ＬＶ??區(qū)域圖像。使用Ｉｍａｇｅ?Ｊ測量每個圖像的ＬＶ纖維化面積和總ＬＶ面積，并??將纖維化面積報告為總ＬＶ面積的百分比。??４．７?Ｍａｓｓｏｎ?染色??￥有關試劑的配制：??Ｍａｓｓｏｎ復合染色液：酸性復紅?ｌｇ??麗春紅?２ｇ??橘黃Ｇ?２ｇ??０．２５％?醋酸?３００ｍｌ??亮綠染色液高綠ＳＦ?Ｏ．ｌｇ??

用冠脈左支結扎方建２８天成年小鼠心肌梗死，心梗注射腺相關病毒（ＡＡＶ９－ａｎｔｉ－ｌｅｔ－７ｉｏｒＡＡＶ９－ＮＣ），分別通過免疫焚光檢、ＴＵＮＥＬ的染色的陽性心肌細胞數量，用以觀察不同組別心肌細胞增殖及??情況。通過Ｍａｓｓｏｎ染色，觀察不同組別心肌梗死面積變化。通過心臟Ｍ??聲觀察心肌梗死０天、７天后、１４天、２１天、２８天后，以左室收縮／舒張??內徑、左室短軸縮短率及左室射血分數為指標觀察左心室功能變化。??結果??生１天小鼠左心室心肌內感染Ａｄ－ｌｅｔ－７ｉ及Ａｄ－ＮＣ，免疫熒光測定標記有關??細咆增殖的指標（ＥｄＵ、ｐＨ３）及細胞邊界（ＷＧＡ），結果顯示ＥｄＵ、ｐＨ３??率百分比較空病毒組明顯下降，過表達ｌｅｔ－７ｉ后心肌細胞體積增大，提示??細胞有絲分裂及增殖數量在ｌｅｔ－７ｉ過表達后受到抑制。如圖２．２－２．４所示。??＜０．０５，ｎ＝４）。??Ｈｏｅｃｈｓｔ?／?ｃＴｎＴ?／?ｖｉｍｅｎｔｉｎ??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Pursuing meaningful end-points for stem cell therapy assessment in ischemic cardiac disease[J]. Maria Dorobantu,Nicoleta-Monica Popa-Fotea,Mihaela Popa,Iulia Rusu,Miruna Mihaela Micheu.  World Journal of Stem Cells. 2017(12)



本文編號：3580001