背景:心肌缺血再灌注損傷是導(dǎo)致心肌缺血、心臟手術(shù)后血運重建預(yù)后不好的主要原因之一,研究表明血管平滑肌細(xì)胞可以減輕缺血再灌注損傷,改善大鼠心梗后心功能的作用,但其作用機制目前仍知之甚少,該研究旨在探討血管平滑肌細(xì)胞是通過何種機制降低心肌缺血再灌注損傷的。方法:1:體外實驗:①組織貼壁法原代培養(yǎng)大鼠血管平滑肌細(xì)胞（VSMCs）,通過細(xì)胞形態(tài)及免疫熒光法鑒定α-SMA。采用CoC12 600μmol/L8h/16h化學(xué)性缺氧建立H9C2心肌細(xì)胞I/R細(xì)胞模型;②采用Transwell共培養(yǎng)技術(shù)共培養(yǎng)I/R心肌H9C2細(xì)胞/VSMCs;設(shè)5組:Control組、I/R組、I/R+VSMCs組、I/R+VSMCs+FGFR1抑制劑組、I/R+bFGF組MTT觀察細(xì)胞活力、流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡情況,蛋白免疫印跡（westernblot）測cleaved caspase3、Bcl-2、LC3II/I、p62的表達(dá),觀察VSMC對I/R心肌細(xì)胞的保護作用;③Elisa檢測bFGF含量明確VSMCs對I/R心肌細(xì)胞保護作用中bFGF的地位;④western bolt分析P13K/Akt-mTOR、Fo... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：101 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１大鼠胸主動脈ＶＳＭＣｓ原代培養(yǎng)及鑒定Ｓｃａｌｅ?ｂａｒ：?１００?ｎｍ．??

察缺血再灌注情況下血管平滑肌細(xì)胞對心肌細(xì)胞的保護作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)當(dāng)Ｉ／Ｒ心??肌細(xì)胞與血管平滑肌細(xì)胞共培養(yǎng)后，與單純Ｉ／Ｒ心肌細(xì)胞比較共培養(yǎng)組心肌細(xì)胞??活性得到大大改善，且有統(tǒng)計學(xué)差異（Ｐ＜?０．０５）（見圖３Ａ）。通過圖３Ｂ散點??圖發(fā)現(xiàn)在Ｉ／Ｒ?Ｈ９Ｃ２心肌細(xì)胞與ＶＳＭＣｓ共培養(yǎng)組中右上象限細(xì)胞數(shù)較單純Ｉ／Ｒ組??明顯減少，心肌細(xì)胞凋亡率亦明顯下降（Ｐ＜０．０５）（圖３Ｂ和Ｃ），說明與ＶＳＭＣ??共培養(yǎng)可以降低Ｉ／Ｒ心肌細(xì)胞凋亡。??Ａ?Ｃ??０８?１?５０１?＊??Ｔ?求??０６?■?ＢＨ?０?４０■??〇?—ｒ—??？?ｒ１！?－?３０＇??ｎａ４＇?Ｈ?－ｒ??□?＊?〇?２０－?一?￣￣??〇?￣Ｔ?ａ??０．２－?ｍｍ?戀ｆｔ?〇．?ｉ〇－??＜??窮?ｒｏ－ＬＩ?ＬＪ?１—Ｉ——??０?０?＾??????Ｃｏｎ?Ｉ／Ｒ?ＩＲ＋ＶＳＭＣｓ??Ｃｏｎ?Ｉ／Ｒ?ＩＲ＋ＶＳＭＣｓ??

心肌細(xì)胞自噬流活化、自噬增加。而當(dāng)與血管平滑肌細(xì)胞共培養(yǎng)時，ｐ６２表達(dá)較??單純Ｉ／Ｒ組心肌細(xì)胞顯著升高（Ｐ＜０．０１），ＬＣ３Ｈ／ＬＣ３Ｉ則顯著下降（Ｐ＜０．０１），??說明ＶＳＭＣｓ可以大大降低Ｉ／Ｒ誘導(dǎo)的Ｈ９Ｃ２心肌細(xì)胞過度自噬（圖３Ｄ－Ｆ）。??３５??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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