目的通過建立大鼠心臟移植模型,探討PI3K/Akt/GSK-3β信號(hào)通路在SFN保護(hù)心肌冷IRI中的作用。方法64只SD大鼠（成年健康雄性,體重220-250g）隨機(jī)分為4組（每組16只,藥物干預(yù)均為受體）:IRI組:移植前24h經(jīng)尾靜脈注射生理鹽水0.3ml;SFN+IRI組:移植前24h經(jīng)尾靜脈注射SFN2.5mg/kg.bw;LY+IRI組:注射生理鹽水前1h及移植前1h分別經(jīng)尾靜注射LY294002 0.3mg/Kg.bw,余同IRI組;LY+SFN+IRI組:注射SFN前1h及移植前1h分別經(jīng)尾靜注射LY294002 0.3mg/Kg.bw,余同SFN+IRI組。按照李占清等人的方法建立心臟移植模型:1摘取供體大鼠的心臟置于4℃HTK液中保存9h備用。2將供心用7-0絲線連續(xù)縫合于受體大鼠的腹腔（供心主動(dòng)脈與受體腹主動(dòng)脈吻合,供心肺動(dòng)脈與受體下腔靜脈吻合）,供心復(fù)跳,檢查無出血后關(guān)腹。術(shù)后24h摘取供心,一部分供心組織放入10%的福爾馬林中固定,石蠟包埋、切片后行HE染色觀察形態(tài)學(xué)變化并用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)Akt、P-Akt、GSK-3β、P-GSK-3β、Bcl-2、Bax... 

【文章來源】：華北理工大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
第1章 實(shí)驗(yàn)研究
    1.1 試驗(yàn)材料
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.1.2 主要儀器設(shè)備
        1.1.3 主要藥品及試劑
        1.1.4 主要試劑配制
    1.2 試驗(yàn)方法
        1.2.1 實(shí)驗(yàn)分組
        1.2.2 同種異體異位心臟移植模型的制備
        1.2.3 心臟移植后 24h供心心跳評(píng)分
        1.2.4 實(shí)驗(yàn)取材
        1.2.5 移植后 24h供心組織的蠟塊制備及切片
        1.2.6 供心組織HE染色
        1.2.7 免疫組織化學(xué)法染色（PV-6001二步法）
        1.2.8 蛋白免疫印跡法（western blotting）檢測(cè)
        1.2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    1.3 結(jié)果
        1.3.1 移植后 24h各組供心心肌組織學(xué)
        1.3.2 免疫組織化學(xué)檢測(cè)各組供心心肌組織中Akt、P-Akt、GSK-3β、P-GSK-3β、Bcl-2、Bax的蛋白表達(dá)
        1.3.3 蛋白免疫印跡（Western bolt）法檢測(cè)各組供心心肌組織中Akt、P-Akt、GSK-3β、P-GSK-3β、Bax、Bcl-2 的蛋白表達(dá)
    1.4 討論
    1.5 小結(jié)
    1.6 不足與展望
    參考文獻(xiàn)
第2章 綜述 PI3K/Akt/GSK-3β信號(hào)通路與心肌缺血再灌注損傷的相關(guān)性研究
    參考文獻(xiàn)
結(jié)論
附圖
致謝
導(dǎo)師簡(jiǎn)介
作者簡(jiǎn)介
學(xué)位論文數(shù)據(jù)集


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]萊菔硫烷對(duì)大鼠心臟移植冷缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[J]. 李占清,伊雪,鄔鵬宇,王帥,楊學(xué)慧,崔翔宇,劉志勇,鄭素琴,楊方.  中華胸心血管外科雜志. 2014 (04)
[2]黃芪甲苷抑制GSK-3β活性介導(dǎo)大鼠心肌缺血/再灌注損傷作用的線粒體機(jī)制研究[J]. 賀永貴,李王芳,伊紅麗,鄭桓,習(xí)瑾昆.  中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2014(03)
[3]龍膽苦甙對(duì)減輕乳鼠心肌缺血再灌注損傷的細(xì)胞研究[J]. 陳浩,喬慧蓮,張磊,肖丹,陳趙云,易定華.  中華臨床醫(yī)師雜志(電子版). 2013(23)
[4]姜黃素對(duì)缺血再灌注H9c2心肌細(xì)胞凋亡和GSK-3表達(dá)及其磷酸化的影響[J]. 虞燕萍,周承亮,傅云峰,黃先玫.  中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2013(02)
[5]糖原合成激酶3β抑制劑增強(qiáng)異氟醚后處理對(duì)心肌缺血-再灌注損傷的保護(hù)作用[J]. 白延麗,沈途,劉國(guó)利,張錦英.  臨床麻醉學(xué)雜志. 2012(10)
[6]白藜蘆醇對(duì)大鼠缺血再灌注心肌細(xì)胞凋亡的抑制作用與PI3K-Akt信號(hào)通路的關(guān)系[J]. 何東偉,劉新偉,龐勇,劉柳.  中國(guó)中藥雜志. 2012(15)
[7]氯化鋰對(duì)腦缺血預(yù)處理后PI3K/AKT/GSK3β通路的影響機(jī)制[J]. 張慧,姜詠梅,尹琳.  中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào). 2011(24)
[8]抑制GSK-3β減輕大鼠急性心肌缺血/再灌注損傷的作用[J]. 殷忠,薛白,高好考,王海昌,楊曄.  心臟雜志. 2011(05)
[9]血管生成素-1通過調(diào)節(jié)PI3K/AKT信號(hào)途徑抑制H2O2誘導(dǎo)小鼠心肌細(xì)胞凋亡[J]. 李遠(yuǎn)鵬,王挹青,張鵬.  基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2010(09)
[10]PI3K/Akt/GSK-3β信號(hào)通路在腎小管上皮細(xì)胞缺血再灌注損傷中的調(diào)控作用及重組人紅細(xì)胞生成素預(yù)保護(hù)效應(yīng)[J]. 周文祥,楊永麗,楊曉,夏章暉,韓敏,聶祥智,徐翠玲.  華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2010(03)



本文編號(hào)：3558320