基于DNA甲基化和氧化應(yīng)激途徑葉酸對動脈粥樣硬化模型作用機(jī)制的研究
發(fā)布時間：2021-12-18 17:19
目的心血管疾�。╟ardiovascular disease,CVDs）是嚴(yán)重威脅人類健康的常見慢性疾病,動脈粥樣硬化（Atherosclerosis,AS）是CVDs的主要病理原因。近年來的研究表明,AS的發(fā)病機(jī)制部分是由表觀遺傳機(jī)制異常所致。由于葉酸在體內(nèi)的活性形式可作為甲基的供體參與一碳代謝,葉酸缺乏被認(rèn)為是導(dǎo)致CVDs的可能因素。然而葉酸水平與人群患CVDs的風(fēng)險之間的關(guān)系仍存在爭議。我們假設(shè)葉酸水平的升高可能通過表觀基因沉默機(jī)制來發(fā)揮抗動脈粥樣硬化作用,通過ApoE-/-小鼠AS模型及ox-LDL損傷HUVEC模型,探討葉酸是否通過調(diào)節(jié)特定的AS相關(guān)及氧化應(yīng)激相關(guān)基因DNA甲基化模式從而改善AS的病理發(fā)展,為葉酸防治AS提供科學(xué)依據(jù)和新的思路。方法ApoE-/-小鼠AS模型應(yīng)用高脂喂養(yǎng)24只4周齡雄性純合子ApoE-/-小鼠及8只同周齡C57BL/6J小鼠構(gòu)建AS模型,將小鼠分為四組,采用飼料中葉酸缺乏及葉酸灌胃的方法進(jìn)行干預(yù)20周。留取血清血漿、主動脈竇及主動脈弓組織,采用油紅O染色及HE染色方法測定主動脈竇...
【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校
【文章頁數(shù)】：143 頁
【學(xué)位級別】：博士
【部分圖文】：
總體技術(shù)路線圖
天津醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文 一、葉酸對 ApoE-/-小鼠模型及 ox-LDL 誘導(dǎo) HUVEC 損傷模型的影響實(shí)驗(yàn)前 ApoE-/-和 C57BL/6 小鼠皮毛烏黑有光澤，干預(yù) 20 周后 ApoE-/-小鼠皮毛灰暗并出現(xiàn)多處脫落。體重和進(jìn)食量變化情況能夠客觀的反應(yīng)小鼠的身體狀況。如圖 1.1 所示，在實(shí)驗(yàn)全程 20 周中，各組小鼠的相對進(jìn)食量無顯著性差異。實(shí)驗(yàn)開始前各組小鼠體重?zé)o差異，隨干預(yù)時間各組小鼠體重逐漸增加，干預(yù)20 周后，與野生對照組小鼠相比，三個模型組小鼠體重明顯增加（P <0.05），各干預(yù)組間小鼠體重沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)果表明灌胃葉酸并影響小鼠進(jìn)食量及小鼠體重變化，未對小鼠生長造成明顯影響。
圖 1.2 葉酸干預(yù)對小鼠血脂水平的影響( )（n=8）。（A）TC；（B）TG；(C) HDL-C；（D）LDL-C。*,與模型組（HF+CON）比較 P<0.05。#,與模型組（HF+DEF）比較 P<0.05。1.2.3 葉酸對 ApoE-/-小鼠模型主動脈動脈粥樣進(jìn)程的影響為了評估葉酸對小鼠動脈粥樣硬化進(jìn)展的影響，本實(shí)驗(yàn)使用主動脈竇油紅 O染色和主動脈弓 HE 染色，結(jié)果分別顯示小鼠主動脈竇中的脂質(zhì)沉積和主動脈弓動脈粥樣硬化病變的形態(tài)。1.2.3.1 主動脈竇油紅 O 染色的結(jié)果主動脈竇的代表性的圖像如圖 1.3A 所示，野生型(WT)組小鼠主動脈竇血管內(nèi)壁無紅色染色的斑塊。相反，模型組（HF+CON）小鼠主動脈竇內(nèi)有廣泛的脂質(zhì)沉積，即動脈粥樣硬化病變斑塊，且量化的主動脈橫截面腔面積中脂質(zhì)沉積所占百分比顯著增加，結(jié)果提示，小鼠 AS 模型成功建立。葉酸缺乏組（HF+DEF）主動脈竇血管內(nèi)壁可見較多紅色染色的脂質(zhì)斑塊，且染色所占主動脈橫截面面積的百分比與 HF+CON 組相比顯著增加(P<0.05)，說明葉酸缺乏明顯加重主動
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]《中國心血管病報(bào)告2017》概要[J]. 陳偉偉,高潤霖,劉力生,朱曼璐,王文,王擁軍,吳兆蘇,李惠君,顧東風(fēng),楊躍進(jìn),鄭哲,蔣立新,胡盛壽. 中國循環(huán)雜志. 2018(01)
[2]Enzymatic antioxidant system in vascular inflammation and coronary artery disease[J]. Valter Lubrano,Silvana Balzan. World Journal of Experimental Medicine. 2015(04)
[3]載脂蛋白E基因敲除小鼠不同周齡動脈粥樣硬化的病理變化[J]. 劉劍剛,董國菊,史大卓,王永炎. 中國動脈硬化雜志. 2005(06)
[4]藥理試驗(yàn)中動物間和動物與人體間的等效劑量換算[J]. 黃繼漢,黃曉暉,陳志揚(yáng),鄭青山,孫瑞元. 中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué). 2004(09)
[5]我國部分地區(qū)成年人血漿葉酸的地區(qū)和季節(jié)差異比較[J]. 郝玲,田熠華,章斐然,鐘新艷,張伯蘭,譚明,唐儀,李竹. 中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志. 2002(05)
本文編號：3542845
【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校
【文章頁數(shù)】：143 頁
【學(xué)位級別】：博士
【部分圖文】：
總體技術(shù)路線圖
天津醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文 一、葉酸對 ApoE-/-小鼠模型及 ox-LDL 誘導(dǎo) HUVEC 損傷模型的影響實(shí)驗(yàn)前 ApoE-/-和 C57BL/6 小鼠皮毛烏黑有光澤，干預(yù) 20 周后 ApoE-/-小鼠皮毛灰暗并出現(xiàn)多處脫落。體重和進(jìn)食量變化情況能夠客觀的反應(yīng)小鼠的身體狀況。如圖 1.1 所示，在實(shí)驗(yàn)全程 20 周中，各組小鼠的相對進(jìn)食量無顯著性差異。實(shí)驗(yàn)開始前各組小鼠體重?zé)o差異，隨干預(yù)時間各組小鼠體重逐漸增加，干預(yù)20 周后，與野生對照組小鼠相比，三個模型組小鼠體重明顯增加（P <0.05），各干預(yù)組間小鼠體重沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)果表明灌胃葉酸并影響小鼠進(jìn)食量及小鼠體重變化，未對小鼠生長造成明顯影響。
圖 1.2 葉酸干預(yù)對小鼠血脂水平的影響( )（n=8）。（A）TC；（B）TG；(C) HDL-C；（D）LDL-C。*,與模型組（HF+CON）比較 P<0.05。#,與模型組（HF+DEF）比較 P<0.05。1.2.3 葉酸對 ApoE-/-小鼠模型主動脈動脈粥樣進(jìn)程的影響為了評估葉酸對小鼠動脈粥樣硬化進(jìn)展的影響，本實(shí)驗(yàn)使用主動脈竇油紅 O染色和主動脈弓 HE 染色，結(jié)果分別顯示小鼠主動脈竇中的脂質(zhì)沉積和主動脈弓動脈粥樣硬化病變的形態(tài)。1.2.3.1 主動脈竇油紅 O 染色的結(jié)果主動脈竇的代表性的圖像如圖 1.3A 所示，野生型(WT)組小鼠主動脈竇血管內(nèi)壁無紅色染色的斑塊。相反，模型組（HF+CON）小鼠主動脈竇內(nèi)有廣泛的脂質(zhì)沉積，即動脈粥樣硬化病變斑塊，且量化的主動脈橫截面腔面積中脂質(zhì)沉積所占百分比顯著增加，結(jié)果提示，小鼠 AS 模型成功建立。葉酸缺乏組（HF+DEF）主動脈竇血管內(nèi)壁可見較多紅色染色的脂質(zhì)斑塊，且染色所占主動脈橫截面面積的百分比與 HF+CON 組相比顯著增加(P<0.05)，說明葉酸缺乏明顯加重主動
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]《中國心血管病報(bào)告2017》概要[J]. 陳偉偉,高潤霖,劉力生,朱曼璐,王文,王擁軍,吳兆蘇,李惠君,顧東風(fēng),楊躍進(jìn),鄭哲,蔣立新,胡盛壽. 中國循環(huán)雜志. 2018(01)
[2]Enzymatic antioxidant system in vascular inflammation and coronary artery disease[J]. Valter Lubrano,Silvana Balzan. World Journal of Experimental Medicine. 2015(04)
[3]載脂蛋白E基因敲除小鼠不同周齡動脈粥樣硬化的病理變化[J]. 劉劍剛,董國菊,史大卓,王永炎. 中國動脈硬化雜志. 2005(06)
[4]藥理試驗(yàn)中動物間和動物與人體間的等效劑量換算[J]. 黃繼漢,黃曉暉,陳志揚(yáng),鄭青山,孫瑞元. 中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué). 2004(09)
[5]我國部分地區(qū)成年人血漿葉酸的地區(qū)和季節(jié)差異比較[J]. 郝玲,田熠華,章斐然,鐘新艷,張伯蘭,譚明,唐儀,李竹. 中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志. 2002(05)
本文編號：3542845
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