背景:肝細(xì)胞核因子1b（Hepatocyte nuclear factor 1β,HNF1b）是近年來備受關(guān)注的熱門因子,分布于肝細(xì)胞,脂肪細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。研究發(fā)現(xiàn)HNF1b減少肝臟脂質(zhì)含量,抑制脂肪細(xì)胞分化和脂滴形成。目前HNF1b對巨噬細(xì)胞脂質(zhì)代謝影響的研究鮮有報道,因此探討HNF1b對巨噬細(xì)胞脂質(zhì)代謝的影響顯得很有必要。sortilin,由SORT1基因編碼,是囊泡分揀因子10 p（vacuolar protein sorting 10p,Vps10p）結(jié)構(gòu)域家族成員,參與巨噬細(xì)胞脂質(zhì)代謝的調(diào)控,促進AS發(fā)生發(fā)展,但其調(diào)控機制尚不明確。前期生信分析發(fā)現(xiàn)HNF1b與SORT1啟動子存在結(jié)合位點,提示HNF1b很可能通過靶向調(diào)控巨噬細(xì)胞sortilin表達(dá),促進巨噬細(xì)胞膽固醇流出,抑制AS發(fā)生發(fā)展。目的:探討HNF1b對巨噬細(xì)胞sortilin表達(dá)、膽固醇流出以及主動脈AS的影響及機制。方法:50μg/ml ox-LDL孵育THP-1源性巨噬細(xì)胞,Western blot和qRT-PCR分別測定HNF1b和sortilin蛋白及mRNA水平。Alibaba,Promo和JASPAR網(wǎng)... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

高脂飲食LDLR/鼠斑塊內(nèi)HNF1b及sortilin表達(dá)變化（40×）

17第4章實驗結(jié)果4.1HNF1b和sortilin在高脂處理的LDLR/鼠及荷脂巨噬細(xì)胞中的表達(dá)免疫熒光結(jié)果顯示，相比對照組，高脂組LDLR/鼠斑塊中HNF1b的表達(dá)顯著下降，sortilin的表達(dá)明顯增加（圖4.1）。50μg/mlox-LDL孵育巨噬細(xì)胞后，結(jié)果發(fā)現(xiàn)相比對照組，HNF1b蛋白水平明顯降低，sortilin蛋白水平明顯增加（圖4.2和圖4.3）。圖4.1高脂飲食LDLR/鼠斑塊內(nèi)HNF1b及sortilin表達(dá)變化（40×）圖4.2荷脂巨噬細(xì)胞HNF1b蛋白表達(dá)水平（*P＜0.05，與Control組比較）

18圖4.3荷脂巨噬細(xì)胞sortilin蛋白及mRNA表達(dá)水平（*P＜0.05，與Control組比較）4.2HNF1b抑制荷脂巨噬細(xì)胞sortilin表達(dá)荷脂巨噬細(xì)胞中轉(zhuǎn)染HNF1b及其shRNA慢病毒表達(dá)載體，Westernblot結(jié)果發(fā)現(xiàn)，相比對照組，高表達(dá)HNF1b后，HNF1b蛋白水平明顯升高，而沉默HNF1b后HNF1b蛋白水平明顯下降，說明對HNF1b蛋白表達(dá)的干預(yù)是成功的（圖4.4）。進一步檢測顯示，與Control相比，高表達(dá)HNF1b后，sortilin的蛋白水平和mRNA水平明顯下調(diào)，沉默HNF1b后sortilin的蛋白水平和mRNA水平明顯增加（圖4.5）。以上結(jié)果說明，HNF1b負(fù)向調(diào)控巨噬細(xì)胞sortilin蛋白表達(dá)，提示HNF1b很有可能在轉(zhuǎn)錄水平抑制巨噬細(xì)胞sortilin表達(dá)，但具體機制尚需進一步實驗加以佐證。圖4.4荷脂巨噬細(xì)胞HNF1b的表達(dá)情況（*P＜0.05，與Control組比較）


本文編號：3522163