急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）是一種常見的心血管疾病,發(fā)病率和死亡率都較高,嚴(yán)重危害人類生命健康。目前臨床上主要采用藥物和介入等方法治療心肌梗死,但只能緩解癥狀,不能修復(fù)受損心肌組織。近年來,干細(xì)胞移植治療受到廣泛關(guān)注,其中脂肪來源干細(xì)胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）是一種從脂肪組織中提取出來并具有多向分化潛能的成體干細(xì)胞,數(shù)量多、易獲取、成本低、增殖快,而且自體可取,無免疫排斥反應(yīng)之憂,是用于修復(fù)心肌梗死的理想干細(xì)胞之一。然而,由于心肌梗死后心肌組織缺血缺氧產(chǎn)生氧化應(yīng)激,導(dǎo)致微環(huán)境惡劣,移植后干細(xì)胞的存留和存活率普遍較低,總體治療效果不理想。因此,利用藥物提高干細(xì)胞活力、增加其抗氧化能力,或者利用生物材料支架防止干細(xì)胞彌散、并為其提供良好的三維生長微環(huán)境,進(jìn)而提高移植后干細(xì)胞的存活和存留率,是提高心肌梗死療效的重要策略。（2’Z,3’E）-6-溴靛玉紅-3’-肟（（2′Z,3′E）-6-Bromoindirubin-3′-oxime,BIO）是一種具有細(xì)胞滲透性的小分子物質(zhì),可以促進(jìn)哺乳動物心肌細(xì)胞... 

【文章來源】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：109 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

流式細(xì)胞儀檢測ADSCs表面標(biāo)志物CD34、CD45表達(dá)陰性，CD29、CD90表達(dá)陽性

負(fù)載BIO納米膠束促進(jìn)ADSCs對急性心肌梗死的治療作用及其機制-27-2.ADSCs具有成脂、成軟骨和成骨分化能力ADSCs是一種具有多向分化能力的成體干細(xì)胞，為了鑒定提取的ADSCs是否具有多向分化能力，采用成脂、成軟骨和成骨三種不同的誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基進(jìn)行誘導(dǎo)分化。ADSCs成脂誘導(dǎo)分化7天后，采用油紅O染色，如圖1-2A、B所示，誘導(dǎo)的ADSCs逐漸變成脂肪空泡，內(nèi)部含有透亮的脂滴，而對照組無明顯變化，說明ADSCs在成脂誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基的誘導(dǎo)下，可以向脂肪細(xì)胞分化。ADSCs成軟骨誘導(dǎo)分化結(jié)束后，采用阿利辛藍(lán)染色，如圖1-2C、D所示，誘導(dǎo)的ADSCs含有藍(lán)色結(jié)節(jié)，是軟骨特異性物質(zhì)——內(nèi)酸性粘多糖，而對照組無明顯變化，說明ADSCs在成軟骨誘導(dǎo)分化液的誘導(dǎo)下，可以向軟骨細(xì)胞分化。ADSCs成骨誘導(dǎo)分化結(jié)束后，利用茜素紅染色，如圖1-2E、F所示，誘導(dǎo)的ADSCs形成大量的橘紅色鈣化結(jié)節(jié)，而對照組無明顯變化，說明ADSCs在成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基的誘導(dǎo)下，可以向骨細(xì)胞分化。因此，結(jié)果表明本實驗提取的ADSCs具有多向分化能力，能夠向脂肪細(xì)胞、軟骨細(xì)胞和骨細(xì)胞分化。圖1-2ADSCs成脂、成軟骨和成骨分化A和B：油紅O染色，A為對照組，未見紅色脂滴，B圖可見大量的脂肪空泡和脂滴，ADSCs向脂肪細(xì)胞分化。C和D：阿利辛藍(lán)染色，C為對照組，無藍(lán)色結(jié)節(jié)，D圖藍(lán)色結(jié)節(jié)為軟骨組織中的內(nèi)酸性粘多糖，ADSCs向軟骨細(xì)胞分化。E和F：茜素紅染色，E為對照組，無鈣化結(jié)節(jié)，F(xiàn)圖可見橘紅色鈣化結(jié)節(jié)，ADSCs向骨細(xì)胞分化。Scalebar=100μm。

海軍軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文-28-（二）BIO對ADSCs的作用1.BIO促進(jìn)ADSCs的增殖BIO是一種具有細(xì)胞滲透性的小分子物質(zhì)，分子式如圖1-3所示。BIO處理ADSCs24h，BIO（0、1、2.5、5和10μmol/L）各組之間無明顯差異（圖1-4A）。當(dāng)BIO作用ADSCs3天后，能夠明顯促進(jìn)ADSCs增殖，與對照組（0group）比較，BIO（1、2.5、5和10μmol/L）組的細(xì)胞增殖活力分別增長了（11.8±7.7）%、（39.9±4.2）%、（21.2±6.6）%、（8.3±13.2）%，結(jié)果顯示BIO濃度過低時（1μmol/L），對ADSCs增殖效果不明顯，無統(tǒng)計學(xué)意義；而濃度較高時（10μmol/L），作用效果也不明顯；BIO對ADSCs作用有最佳濃度，2.5μmol/L和5μmol/L兩組具有明顯的統(tǒng)計學(xué)意義，其中2.5μmol/L效果最好（圖1-4B）。圖1-3BIO分子式圖1-4BIO對ADSCs的作用CCK-8檢測細(xì)胞增殖能力。A.BIO對ADSCs作用24h，各組之間無明顯差異。B.BIO對ADSCs作用3天，能夠促進(jìn)ADSCs增殖。*P<0.05,**P<0.01vs0group。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Application of flash nanoprecipitation to fabricate poorly water-soluble drug nanoparticles[J]. Jinsong Tao,Shing Fung Chow,Ying Zheng.  Acta Pharmaceutica Sinica B. 2019(01)



本文編號：3501264