[目的]急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）是由于急性持續(xù)性冠狀動脈缺血缺氧引起的心肌壞死,最終導(dǎo)致心肌重構(gòu)及難以逆轉(zhuǎn)的心功能下降。目前,對于心肌梗死的治療方法主要包括藥物、溶栓治療、介入及手術(shù)治療等,但這些措施不能從根本上解決心肌修復(fù)的問題,因此再生和修復(fù)療法對于心肌梗死起著至關(guān)重要的作用。而目前,干細(xì)胞療法被認(rèn)為是治療心肌梗死具有前景的方法,同時,基于干細(xì)胞的旁分泌功能,目前干細(xì)胞來源的外泌體在急性心肌損傷中的修復(fù)作用成為了研究的熱點。誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（induced pluripotent stem cell,iPSC）是利用重編程技術(shù)將重編程因子轉(zhuǎn)入成體細(xì)胞得到的具有與胚胎干細(xì)胞相似的全能性的一類干細(xì)胞,基于其來源廣泛,同時可以排除免疫排斥及倫理等問題,其在修復(fù)損傷組織和器官的治療中具有廣泛的應(yīng)用前景,但基于其細(xì)胞治療中仍然面臨著致瘤性的影響。在外泌體的研究中,基于誘導(dǎo)多能干細(xì)胞與胚胎干細(xì)胞的相似性,目前有研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)誘導(dǎo)多能干細(xì)胞來源的外泌體（induced pluripotent stem cells derived exosome,... 

【文章來源】：昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁數(shù)】：93 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１Ａ．外泌體透射電鏡觀察ａ．ＨＦＦ＿Ｅｘｏ在透射電鏡下的形態(tài)ｂ．ｉＰＳＣ－Ｅｘｏ在透射電鏡下的形??

Ｄ??Ｏｈ?＇?６ｈ??１２ｈ?２４ｈ??圖３．不同濃度Ｈ２０２干預(yù)不同時間對Ｈ９Ｃ２細(xì)胞存活率的影響Ａ．不同濃度Ｈ２０２干預(yù)６ｈ??后Ｈ９Ｃ２細(xì)胞存活率；Ｂ．不同濃度Ｈ２０２干預(yù)１２ｈ后Ｈ９Ｃ２細(xì)胞存活率；Ｃ．不同濃度Ｈ２０２??干預(yù)２４ｈ后Ｈ９Ｃ２細(xì)胞存活率；Ｄ．用２００?ｕ?ｍｏｌ／Ｌ作用Ｈ９Ｃ２細(xì)胞Ｏｈ、６ｈ、１２ｈ、２４ｈ后觀察??細(xì)胞凋亡情況。柱狀圖分析用不同濃度Ｈ２０２千預(yù)Ｈ９Ｃ２后，采用配對ｔ檢驗分析，其中??＊＊Ｐ＜０．０１，＂＊Ｐ＜０．００１。??４．ｉＰＳＣ－Ｅｘｏ及ＨＦＦ－Ｅｘｏ對心肌損傷的治療效果。??４．１?ｉＰＳＣ－Ｅｘｏ及ＨＦＦ－Ｅｘｏ對受損的Ｈ９Ｃ２細(xì)胞存活率的影響??向２００?ｕｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２０２干預(yù)１２小時的Ｈ９Ｃ２細(xì)胞中分別加入２〇ｈＬＰＢＳ、??ＨＦＦ－Ｅｘｏ、ｉＰＳＣ－Ｅｘｏ（約３Ｘ丨〇７？１〇８個囊泡）共培養(yǎng)２４ｈ后，加入ＣＣＫ８工作液，??在酶聯(lián)免疫檢測儀上４５０ｎｍ處測定吸光度，結(jié)果顯示加入ｉＰＳＣ－Ｅｘｏ、ＨＦＦ－Ｅｘｏ??后各組細(xì)胞存活率較ＰＢＳ組均上升，ｉＰＳＣ－Ｅｘｏ效果更為顯著，統(tǒng)計學(xué)差異有顯??著性意義（Ｐ＜〇．〇５）（圖４）。??２４??

ＨＦＦ－Ｅｘｏ組、ｉＰＳＣ－Ｅｘｏ??組，Ｈ２０２干預(yù)１２小時后換無血清培養(yǎng)基，分別加入１００?ｕＬ?ＰＢＳ、ＨＦＦ－Ｅｘｏ組、??ｉＰＳＣ－Ｅｘｏ組（約１．５Ｘ１０＊？１〇９小囊泡）干預(yù)２４小時后，消化提取Ｈ９Ｃ２細(xì)胞??蛋白經(jīng)Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ檢測，分析結(jié)果可見ｉＰＳＣ－Ｅｘｏ及ＨＦＦ－Ｅｘｏ處理組與ＰＢＳ對??照組相比，Ｃｌｅａｖｅｄ?ｃａｓｐａｓｅ－３蛋白表達(dá)減少，但ｉＰＳＣ－Ｅｘｏ效果更為顯著，說明??外泌體能夠減輕受損Ｈ９Ｃ２細(xì)胞凋亡，但ｉＰＳＣ－Ｅｘｏ效果更為顯著（圖５）。??Ａ?Ｂ?ｊ??１?？??＾?１．５１?１???１??ｉ?ｊ?ｊ?１１．０－?Ａ?＇??Ｃｌｅａｖｅｄ?ｃａｓｐａｓｅ－３?ｇＨｋ?１７Ｋｄ??ｇ〇ｓ．?■??Ｐ－ａｃｔｌｎ?４６Ｋｄ??ｉ?參?ｙ??｜?務(wù)?４ｓ??圖５．ｉＰＳＣ－Ｅｘｏ及ＨＦＦ－Ｅｘｏ對受損Ｈ９Ｃ２細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響Ａ．Ｗｅｓｔｅｍ?ｂｌｏｔ檢??測Ｃａｓｐａｓｅ－３的表達(dá)水平Ｂ．采用配對ｔ檢驗統(tǒng)計分析，＊＊Ｐ＜０．０１，?＊＊＊＊?Ｐ＜０．０００１。??４．３?ＴＵＮＥＬ凋亡染色檢測??向２００?Ｐ?ｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２〇２干預(yù)１２ｈ的Ｈ９Ｃ２細(xì)胞中分別加入２〇ｎＬＰＢＳ、??ＨＦＦ－Ｅｘｏ、ｉＰＳＣ－Ｅｘｏ（約１．５Ｘ?１〇８？１〇９小囊泡）共培養(yǎng)２４ｈ后，用ＴＵＮＥＬ凋亡染色??２５??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]CircRNA＿005647通過結(jié)合miR-27b-3p抑制小鼠心肌成纖維細(xì)胞中纖維化相關(guān)基因表達(dá)[J]. 袁淑菁,梁景南,張銘,朱杰寧,潘蓉,李暉,曾妮,溫藝紅,易芷瑤,單志新.  南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2019(11)
[2]Stem cell-derived exosomes as a therapeutic tool for cardiovascular disease[J]. Etsu Suzuki,Daishi Fujita,Masao Takahashi,Shigeyoshi Oba,Hiroaki Nishimatsu.  World Journal of Stem Cells. 2016(09)



本文編號：3491555