RELM-β在TGF-β1誘導(dǎo)人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞EndMT中的作用及機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2021-11-06 16:58
目的:研究RELM-β在TGF-β1誘導(dǎo)的人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞(HPAECs)和人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)內(nèi)皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EndMT)中的作用及機(jī)制。方法:(1)、使用不同濃度TGF-β1(0,5,10,15,20 ng/ml)處理HPAECs和HUVECs,誘導(dǎo)EndMT。用蛋白免疫印跡技術(shù)(Western-blot)檢測(cè)各濃度梯度TGF-β1處理時(shí)RELM-β的表達(dá)情況,選擇合適TGF-β1濃度。(2)、將帶有沉默RELM-β基因的慢病毒sh-RELM-β,轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)細(xì)胞達(dá)到下調(diào)RELM-β表達(dá)的目的,用Western-blot法檢測(cè)RELM-β的干預(yù)效率以及內(nèi)皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化表型標(biāo)記物CD31、VE cadherin、α-SMA的改變;用MTT法檢測(cè)細(xì)胞的增殖活性;用Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞的遷移能力。(3)、用Smads蛋白抑制劑SB432542干預(yù)目的細(xì)胞,用Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞的遷移能力;用免疫蛋白印跡技術(shù)檢測(cè)RELM-β、SMAD2、p-SMAD2、SMAD3、p-SMAD3、SMAD4以及內(nèi)皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化表型標(biāo)記物CD31、VE cadherin、α-SMA...
【文章來(lái)源】:南華大學(xué)湖南省
【文章頁(yè)數(shù)】:68 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
主要縮略詞
前言
材料與方法
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附圖
綜述
參考文獻(xiàn)
碩士研究生期間的科研成果
致謝
本文編號(hào):3480193
【文章來(lái)源】:南華大學(xué)湖南省
【文章頁(yè)數(shù)】:68 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
主要縮略詞
前言
材料與方法
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附圖
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