動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis, AS）是一種嚴(yán)重危害人類健康的復(fù)雜血管炎性疾病,當(dāng)前針對(duì)抗動(dòng)脈粥樣硬化藥物的研究主要通過調(diào)血脂、抗炎、抗氧化等方面進(jìn)行。有較多實(shí)驗(yàn)證據(jù)支持了PPAR-α在抗動(dòng)脈粥樣硬化方面的作用,近年來研究顯示大麻素受體系統(tǒng)與動(dòng)脈粥樣硬化之間有密切關(guān)系。已有研究表明PPAR-α激動(dòng)劑油酰乙醇胺（N-oleoylethanolamine, OEA）在調(diào)血脂方面有顯著的作用。本實(shí)驗(yàn)室前期研究顯示,OEA能夠減輕TNF-α誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子表達(dá)。但其作用是否單純通過PPAR-α通路產(chǎn)生還未明確。研究顯示大麻素受體2（Cannabinoid receptor2, CB2）在抗動(dòng)脈粥樣硬化中表現(xiàn)出一定的潛力,抗動(dòng)脈粥樣硬化作用可能是由于其抗炎作用實(shí)現(xiàn)的。本文主要研究OEA對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells, HUVEC）抗炎相關(guān)受體大麻素受體2的作用。本實(shí)驗(yàn)從新生兒臍帶中提取HUVECs。用ELISA法和細(xì)胞黏附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)PPAR-α阻斷劑對(duì)OEA抗黏附的作用。給予HUVECs不同劑量OEA,... 

【文章來源】：廈門大學(xué)福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：76 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 、前言
    一、動(dòng)脈粥樣硬化概述
        1.1.1 動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病影響因素
        1.1.2 動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)制
        1.1.3 抗動(dòng)脈粥樣硬化藥物
    二、PPAR-α及其配體
        1.2.1 PPAR-α簡(jiǎn)介
        1.2.2 PPAR-α的結(jié)構(gòu)
        1.2.3 PPAR-α的功能
    三、OEA簡(jiǎn)述
        1.3.1 OEA來源
        1.3.2 OEA的生物合成
        1.3.3 OEA的水解
    四、大麻素受體家族簡(jiǎn)述
    五、立題依據(jù)
第二章 、人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)與鑒定
    一、臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分離提取
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器及部分實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.2 主要試劑配制
        2.1.3 臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取器材的準(zhǔn)備
        2.1.4 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的分離提取
    二、人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Ⅷ因子檢測(cè)
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    三、本章小結(jié)
第三章 、OEA對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞表面黏附分子表達(dá)及功能的影響
    一、實(shí)驗(yàn)儀器和部分試劑
    二、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)
    三、普通PCR及REALTIMEPCR實(shí)驗(yàn)
    四、細(xì)胞黏附實(shí)驗(yàn)
    五、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.6.1 OEA對(duì)TNF-α誘導(dǎo)的HUVEC黏附的影響
        3.6.2 PPAR-α阻斷劑MK886對(duì)OEA抗黏附的影響
        3.6.3 PPAR-α阻斷劑MK886對(duì)細(xì)胞表面VCAM-1蛋白表達(dá)影響
        3.6.4 不同濃度OEA對(duì)TNF-α誘導(dǎo)的HUVEC E-Selectin表達(dá)的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    七、本章小結(jié)
第四章 、不同濃度OEA對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞CB2表達(dá)的影響
    一、實(shí)驗(yàn)儀器和部分試劑
    二、主要試劑的配制
    三、WESTERN BLOT實(shí)驗(yàn)方法
    四、PCR實(shí)驗(yàn)方法
        4.4.1 不同濃度OEA對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞CB2 mRNA表達(dá)的影響
        4.4.2 mRNA的提取
        4.4.3 引物設(shè)計(jì)和合成
        4.4.4 逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA步驟
        4.4.5 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)
    五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.5.1 OEA對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞CB2 mRNA表達(dá)的影響
    六、WESTERN BLOT實(shí)驗(yàn)方法
        4.6.1 不同濃度OEA對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞CB2蛋白表達(dá)的影響
        4.6.2 總蛋白的提取
        4.6.3 BCA法測(cè)定蛋白濃度
        4.6.4 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳
        4.6.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    七、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.7.1 OEA對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞CB2蛋白表達(dá)的影響
    八、本章小結(jié)
第五章 、AM630對(duì)OEA抑制TNF-A誘導(dǎo)的HUVECS VCAM-1表達(dá)的影響
    一、實(shí)驗(yàn)儀器和部分試劑
    二、實(shí)驗(yàn)方法
    三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    四、本章小結(jié)
第六章 、CB2拮抗劑AM630對(duì)OEA抗黏附的影響
    一、部分實(shí)驗(yàn)儀器和試劑
    二、THP-1細(xì)胞培養(yǎng)
    三、細(xì)胞黏附實(shí)驗(yàn)
    四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    五、本章小結(jié)
第七章 、結(jié)論與展望
縮略語(yǔ)表
參考文獻(xiàn)
在學(xué)期間發(fā)表的主要學(xué)術(shù)論文目錄
致謝



本文編號(hào)：3452325