發(fā)布時間：2021-10-23 02:47

　　動脈粥樣硬化（atherosclerosis, AS）是一種嚴重危害人類健康的復雜血管炎性疾病,當前針對抗動脈粥樣硬化藥物的研究主要通過調(diào)血脂、抗炎、抗氧化等方面進行。有較多實驗證據(jù)支持了PPAR-α在抗動脈粥樣硬化方面的作用,近年來研究顯示大麻素受體系統(tǒng)與動脈粥樣硬化之間有密切關系。已有研究表明PPAR-α激動劑油酰乙醇胺（N-oleoylethanolamine, OEA）在調(diào)血脂方面有顯著的作用。本實驗室前期研究顯示,OEA能夠減輕TNF-α誘導的人臍靜脈內(nèi)皮細胞黏附分子表達。但其作用是否單純通過PPAR-α通路產(chǎn)生還未明確。研究顯示大麻素受體2（Cannabinoid receptor2, CB2）在抗動脈粥樣硬化中表現(xiàn)出一定的潛力,抗動脈粥樣硬化作用可能是由于其抗炎作用實現(xiàn)的。本文主要研究OEA對人臍靜脈內(nèi)皮細胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells, HUVEC）抗炎相關受體大麻素受體2的作用。本實驗從新生兒臍帶中提取HUVECs。用ELISA法和細胞黏附實驗檢測PPAR-α阻斷劑對OEA抗黏附的作用。給予HUVECs不同劑量OEA,... 

【文章來源】：廈門大學福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 、前言
    一、動脈粥樣硬化概述
        1.1.1 動脈粥樣硬化發(fā)病影響因素
        1.1.2 動脈粥樣硬化發(fā)病機制
        1.1.3 抗動脈粥樣硬化藥物
    二、PPAR-α及其配體
        1.2.1 PPAR-α簡介
        1.2.2 PPAR-α的結(jié)構(gòu)
        1.2.3 PPAR-α的功能
    三、OEA簡述
        1.3.1 OEA來源
        1.3.2 OEA的生物合成
        1.3.3 OEA的水解
    四、大麻素受體家族簡述
    五、立題依據(jù)
第二章 、人臍靜脈內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)與鑒定
    一、臍靜脈內(nèi)皮細胞分離提取
        2.1.1 實驗儀器及部分實驗試劑
        2.1.2 主要試劑配制
        2.1.3 臍靜脈內(nèi)皮細胞提取器材的準備
        2.1.4 人臍靜脈內(nèi)皮細胞的分離提取
    二、人臍靜脈內(nèi)皮細胞Ⅷ因子檢測
        2.2.1 實驗方法
        2.2.2 實驗結(jié)果
    三、本章小結(jié)
第三章 、OEA對人臍靜脈內(nèi)皮細胞表面黏附分子表達及功能的影響
    一、實驗儀器和部分試劑
    二、酶聯(lián)免疫吸附實驗
    三、普通PCR及REALTIMEPCR實驗
    四、細胞黏附實驗
    五、統(tǒng)計學處理
    六、實驗結(jié)果
        3.6.1 OEA對TNF-α誘導的HUVEC黏附的影響
        3.6.2 PPAR-α阻斷劑MK886對OEA抗黏附的影響
        3.6.3 PPAR-α阻斷劑MK886對細胞表面VCAM-1蛋白表達影響
        3.6.4 不同濃度OEA對TNF-α誘導的HUVEC E-Selectin表達的影響實驗結(jié)果
    七、本章小結(jié)
第四章 、不同濃度OEA對人臍靜脈內(nèi)皮細胞CB2表達的影響
    一、實驗儀器和部分試劑
    二、主要試劑的配制
    三、WESTERN BLOT實驗方法
    四、PCR實驗方法
        4.4.1 不同濃度OEA對人臍靜脈內(nèi)皮細胞CB2 mRNA表達的影響
        4.4.2 mRNA的提取
        4.4.3 引物設計和合成
        4.4.4 逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA步驟
        4.4.5 聚合酶鏈式反應(PCR)
    五、實驗結(jié)果
        4.5.1 OEA對人臍靜脈內(nèi)皮細胞CB2 mRNA表達的影響
    六、WESTERN BLOT實驗方法
        4.6.1 不同濃度OEA對人臍靜脈內(nèi)皮細胞CB2蛋白表達的影響
        4.6.2 總蛋白的提取
        4.6.3 BCA法測定蛋白濃度
        4.6.4 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳
        4.6.5 統(tǒng)計學處理
    七、實驗結(jié)果
        4.7.1 OEA對人臍靜脈內(nèi)皮細胞CB2蛋白表達的影響
    八、本章小結(jié)
第五章 、AM630對OEA抑制TNF-A誘導的HUVECS VCAM-1表達的影響
    一、實驗儀器和部分試劑
    二、實驗方法
    三、實驗結(jié)果
    四、本章小結(jié)
第六章 、CB2拮抗劑AM630對OEA抗黏附的影響
    一、部分實驗儀器和試劑
    二、THP-1細胞培養(yǎng)
    三、細胞黏附實驗
    四、實驗結(jié)果
    五、本章小結(jié)
第七章 、結(jié)論與展望
縮略語表
參考文獻
在學期間發(fā)表的主要學術(shù)論文目錄
致謝



本文編號：3452325