目的據(jù)報(bào)道,心肌細(xì)胞壞死是心肌梗塞,缺血/再灌注和心力衰竭等心臟病的主要發(fā)病機(jī)理,故心肌壞死是預(yù)防和治療心臟病的重要治療靶點(diǎn)。Hsc70羧基末端反應(yīng)蛋白（CHIP）可以通過(guò)其E3泛素連接酶功能發(fā)揮保護(hù)作用,但CHIP是否能夠抑制氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的心肌壞死鮮有報(bào)道。黃芩素能夠通過(guò)抑制心肌細(xì)胞氧化應(yīng)激和凋亡來(lái)發(fā)揮心臟保護(hù)作用,但黃芩素是否能夠通過(guò)抑制心肌壞死來(lái)發(fā)揮保護(hù)作用至今未有報(bào)道。本研究旨在探究黃芩素是否能夠通過(guò)抑制壞死來(lái)發(fā)揮心肌保護(hù)作用,以及該作用是否是通過(guò)穩(wěn)定CHIP對(duì)RIPK1和RIPK3的降解來(lái)抑制心肌壞死的發(fā)生。方法使用PI染色、TUNEL染色以及LDH釋放量檢測(cè)的方法,檢測(cè)黃芩素在細(xì)胞水平上對(duì)過(guò)氧化氫引起心肌損傷的保護(hù)作用。通過(guò)western blot、qPCR、免疫共沉淀的方法驗(yàn)證RIPK1/RIPK3在過(guò)氧化氫誘導(dǎo)的心肌壞死中發(fā)揮重要作用。同時(shí),使用RIPK1/RIPK3的siRNA進(jìn)一步證明它們是壞死發(fā)生的重要相關(guān)蛋白。采用western blot和免疫共沉淀的方法探究黃芩素是否能夠通過(guò)抑制RIPK1/RIPK3壞死復(fù)合物的形成而抑制心肌壞死的發(fā)生。使用western b... 

【文章來(lái)源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
材料和方法
    1. 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞與動(dòng)物
    2. 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
    3. 實(shí)驗(yàn)耗材與試劑
    4. 實(shí)驗(yàn)方法
        4.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        4.2 心肌缺血再灌注小鼠模型構(gòu)建
        4.3 細(xì)胞死亡檢測(cè)
        4.4 乳酸脫氫酶釋放測(cè)定
        4.5 蛋白免疫印記
        4.6 實(shí)時(shí)定量PCR
        4.7 免疫共沉淀
        4.8 RNA干擾
        4.9 同源建模與分子對(duì)接
        4.10 心臟組織的PI和TUNEL染色
    5. 統(tǒng)計(jì)分析
結(jié)果
    1. 黃芩素可減輕體外H_2O_2誘導(dǎo)的心肌壞死
    2. RIPK1/RIPK3參與調(diào)控H_2O_2誘導(dǎo)的心肌壞死
    3. 黃芩素通過(guò)干擾RIPK1/RIPK3壞死小體的形成來(lái)抑制壞死的發(fā)生
    4. CHIP通過(guò)泛素依賴性降解途徑降解RIPK1和RIPK3來(lái)抑制心肌壞死
    5. 黃芩素通過(guò)穩(wěn)定CHIP減弱H_2O_2誘導(dǎo)的壞死
    6. 黃芩素與CHIP的分子對(duì)接分析
    7. 黃芩素能夠減輕小鼠體內(nèi)心肌損傷
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
縮略詞表
致謝



本文編號(hào)：3441014