背景致心律失常性右室心肌病是一種罕見的心肌病,以右心室肌進展性纖維脂肪化和致死性心律失常為主要特點,大部分與基因突變相關(guān)。OBSCN基因是一個主要在肌細胞中表達的基因,其蛋白產(chǎn)物obscurin分布于肌節(jié)中,參與橫紋肌纖維的發(fā)育、正常肌漿網(wǎng)結(jié)構(gòu)的維持等。已有報道OBSCN基因突變與肥厚型心肌病、左室致密化不全等心臟疾病相關(guān)。尚未有OBSCN基因突變引起致心律失常性右室心肌病的報道。有研究表明obscurin的Ig48結(jié)構(gòu)域改變可以導(dǎo)致心肌細胞鈣電流紊亂,從而引起心律失常。明確OBSCN基因突變是否是引起致心律失常性右室心肌病的原因,以及其潛在的致病機制對于進一步理解obscurin的功能,尋找ARVC的治療手段非常重要。目的建立患者特異性誘導(dǎo)多能干細胞來源的心肌細胞的研究模型,明確OBSCN基因突變與致心律失常性右室心肌病疾病表型的關(guān)系,并探索潛在致病機制。方法選取臨床確診的一例攜帶OBSCN基因突變的致心律失常性右室心肌病患者,抽取其外周血,通過誘導(dǎo)外周血單個核細胞去分化建立患者特異性誘導(dǎo)多能干細胞系。通過誘導(dǎo)患者特異誘導(dǎo)多能干細胞定向分化為心肌細胞,建立患者特異性誘導(dǎo)多能干細胞來源... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學院北京市 211工程院校 985工程院校

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１由外周血單核細胞至誘導(dǎo)多能干細胞的形態(tài)學變化

１．２誘導(dǎo)多能干細胞形態(tài)學觀察??傳代至Ｐ８時出現(xiàn)典型ｉＰＳＣ形態(tài)特征（圖２），包括致密的克隆、緊致的中心和??光滑的邊緣、細胞核大、核仁突出、核質(zhì)比高。與此同時復(fù)蘇健康對照來源的誘導(dǎo)??多能干細胞Ｐ２０代，與ＡＲＶＣ患者來源的誘導(dǎo)多能干細胞同時顯微鏡下觀察，形態(tài)??基本類似，符合干細胞形態(tài)學特征。??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＡＲＶＣ??Ｉ￣＝￣￣Ｉ?１?￣￣￣＇??？—么－?？??圖２誘導(dǎo)多能干細胞細胞形態(tài)學。健康對照來源的誘導(dǎo)多能干細胞傳代至Ｐ２１（左），??ＡＲＶＣ患者來源的誘導(dǎo)多能干細胞傳代至Ｐ８?（右），倒置顯微鏡下觀察到的細胞形??態(tài)。從上到下放大倍數(shù)依次為１０〇ｘ，２０〇ｘ，４０〇ｘ。??１５??

提�。瑁椋校樱玫冢洞毎遥危�，利用ＲＴ－ｑＰＣＲ分析檢測多能性基因ＰＯＬＷ７及??的表達情況，可見得到的ｉＰＳＣ細胞及Ｍ４７ＶＯＧ的表達量顯著高于??ＭＳＣ，接近ｈＥＳＣ細胞（圖４）。??２．５?＾??■?ＰＯＵ５Ｆ１??２?Ｊ?Ｔ?■?ＮＡＮＯＧ??■??Ｃ?１５??？２??Ｌ?＿??ＭＳＣ－Ｐ３?ｈｉＰＳＣ－Ｐ６?ｈＥＳＣ－Ｈｌ??圖４多能性基因表達（ＲＴ－ｑＰＣＲ檢測）。分別將ＭＳＣ和ｈｉＰＳＣ的表達量以ｈＥＳＣ??為標準進行標化，得到基因（藍色）及（紅色）的相對表達量水??平。ＭＳＣ，ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ?ｓｔｅｍ?ｃｅｌｌ，中胚層干細胞；ｈｉＰＳＣ，ｈｕｍａｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ?ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔ??ｓｔｅｍ?ｃｅｌｌ，人誘導(dǎo)多能干細胞；ｈＥＳＣ，ｈｕｍａｎ?ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ?ｓｔｅｍ?ｃｅｌｌ，人胚胎干細胞。??１７??

【參考文獻】：
博士論文
[1]TNNI基因突變致限制型心肌病患者誘導(dǎo)多能干細胞系的建立及其相關(guān)致病性研究[D]. 徐逸.北京協(xié)和醫(yī)學院 2018



本文編號：3387091