背景致心律失常性右室心肌病是一種罕見的心肌病,以右心室肌進展性纖維脂肪化和致死性心律失常為主要特點,大部分與基因突變相關。OBSCN基因是一個主要在肌細胞中表達的基因,其蛋白產(chǎn)物obscurin分布于肌節(jié)中,參與橫紋肌纖維的發(fā)育、正常肌漿網(wǎng)結構的維持等。已有報道OBSCN基因突變與肥厚型心肌病、左室致密化不全等心臟疾病相關。尚未有OBSCN基因突變引起致心律失常性右室心肌病的報道。有研究表明obscurin的Ig48結構域改變可以導致心肌細胞鈣電流紊亂,從而引起心律失常。明確OBSCN基因突變是否是引起致心律失常性右室心肌病的原因,以及其潛在的致病機制對于進一步理解obscurin的功能,尋找ARVC的治療手段非常重要。目的建立患者特異性誘導多能干細胞來源的心肌細胞的研究模型,明確OBSCN基因突變與致心律失常性右室心肌病疾病表型的關系,并探索潛在致病機制。方法選取臨床確診的一例攜帶OBSCN基因突變的致心律失常性右室心肌病患者,抽取其外周血,通過誘導外周血單個核細胞去分化建立患者特異性誘導多能干細胞系。通過誘導患者特異誘導多能干細胞定向分化為心肌細胞,建立患者特異性誘導多能干細胞來源... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１由外周血單核細胞至誘導多能干細胞的形態(tài)學變化

１．２誘導多能干細胞形態(tài)學觀察??傳代至Ｐ８時出現(xiàn)典型ｉＰＳＣ形態(tài)特征（圖２），包括致密的克隆、緊致的中心和??光滑的邊緣、細胞核大、核仁突出、核質比高。與此同時復蘇健康對照來源的誘導??多能干細胞Ｐ２０代，與ＡＲＶＣ患者來源的誘導多能干細胞同時顯微鏡下觀察，形態(tài)??基本類似，符合干細胞形態(tài)學特征。??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＡＲＶＣ??Ｉ￣＝￣￣Ｉ?１?￣￣￣＇??？—么－?？??圖２誘導多能干細胞細胞形態(tài)學。健康對照來源的誘導多能干細胞傳代至Ｐ２１（左），??ＡＲＶＣ患者來源的誘導多能干細胞傳代至Ｐ８?（右），倒置顯微鏡下觀察到的細胞形??態(tài)。從上到下放大倍數(shù)依次為１０〇ｘ，２０〇ｘ，４０〇ｘ。??１５??

提�。瑁椋校樱玫冢洞毎遥危粒茫遥裕瘢校茫曳治鰴z測多能性基因ＰＯＬＷ７及??的表達情況，可見得到的ｉＰＳＣ細胞及Ｍ４７ＶＯＧ的表達量顯著高于??ＭＳＣ，接近ｈＥＳＣ細胞（圖４）。??２．５?＾??■?ＰＯＵ５Ｆ１??２?Ｊ?Ｔ?■?ＮＡＮＯＧ??■??Ｃ?１５??？２??Ｌ?＿??ＭＳＣ－Ｐ３?ｈｉＰＳＣ－Ｐ６?ｈＥＳＣ－Ｈｌ??圖４多能性基因表達（ＲＴ－ｑＰＣＲ檢測）。分別將ＭＳＣ和ｈｉＰＳＣ的表達量以ｈＥＳＣ??為標準進行標化，得到基因（藍色）及（紅色）的相對表達量水??平。ＭＳＣ，ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ?ｓｔｅｍ?ｃｅｌｌ，中胚層干細胞；ｈｉＰＳＣ，ｈｕｍａｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ?ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔ??ｓｔｅｍ?ｃｅｌｌ，人誘導多能干細胞；ｈＥＳＣ，ｈｕｍａｎ?ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ?ｓｔｅｍ?ｃｅｌｌ，人胚胎干細胞。??１７??

【參考文獻】：
博士論文
[1]TNNI基因突變致限制型心肌病患者誘導多能干細胞系的建立及其相關致病性研究[D]. 徐逸.北京協(xié)和醫(yī)學院 2018



本文編號：3387091