背景：動脈粥樣硬化（AS）是心血管疾病發(fā)生的最主要病理學(xué)與病理生理學(xué)基礎(chǔ)，以巨噬細(xì)胞脂質(zhì)蓄積為特征。脂蛋白酯酶（LPL）是脂質(zhì)降解的關(guān)鍵酶，已證實巨噬細(xì)胞源性的LPL能促進(jìn)巨噬細(xì)胞脂質(zhì)蓄積，進(jìn)而促進(jìn)AS的發(fā)生發(fā)展。氧化應(yīng)激與AS的發(fā)生密切相關(guān)，研究表明氧化應(yīng)激可以上調(diào)巨噬細(xì)胞源性LPL的表達(dá)，促進(jìn)巨噬細(xì)胞脂質(zhì)蓄積。白樺脂酸（BA）是一種五環(huán)三萜類化合物，最新研究表明BA具有抗氧化應(yīng)激效應(yīng)。本研究探討B(tài)A對ROS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞LPL表達(dá)及活性的影響，以及進(jìn)一步對巨噬細(xì)胞脂質(zhì)蓄積的影響，并研究其作用的主要機制。方法：RAW264.7巨噬細(xì)胞予以不同濃度H2O2（0,50,100,200μM）處理18h或加入200μM H2O2孵育細(xì)胞時間（0,612,18,24h），運用熒光探針DCFH-DA檢測ROS的表達(dá)；實時定量PCR和Western Blot檢測LPL mRNA和蛋白水平，試劑盒檢測LPL活性。不同濃度BA （0,0.5,1,2μg/ml）預(yù)處理24h及BA（1μg/ml）預(yù)處理細(xì)胞不同時間（0,12,24,48h）后，再加入H2O2（200μM）處理18h，分別檢測LPL的表達(dá)及... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
引言
主要實驗材料和儀器
    一、主要實驗試劑
    二、主要實驗儀器
主要實驗技術(shù)與方法
    一、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)
    二、細(xì)胞總蛋白的提取
    三、蛋白質(zhì)免疫（Western blot）
    四、實時熒光定量PCR（Real Time PCR）
    五、油紅O染色
    六、細(xì)胞內(nèi)活性氧（ROS）測定
    七、siRNA 轉(zhuǎn)染技術(shù)
    八、統(tǒng)計學(xué)分析
實驗結(jié)果
    一、 氧化應(yīng)激對巨噬細(xì)胞源性 LPL 表達(dá)及活性的影響
    二、 BA 對氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞 LPL 表達(dá)及活性的影響
    三、BA 對 LPL 介導(dǎo)的巨噬細(xì)胞脂質(zhì)蓄積的影響
    四、BA 對 H2O2誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)生成的 ROS 的影響
    五、BA 對 H_2O_2誘導(dǎo)的 RAW264.7 巨噬細(xì)胞內(nèi) PKC 、MAPK 及c-Fos 活化的影響
    六、PKC 、ERK1/2 及 c-Fos 分別在 BA 下調(diào) H_2O_2誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞 LPL 生成中的作用
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄 主要英文縮略語索引
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
碩士期間發(fā)表的論文
致謝
基金資助


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]甘油三酯水平升高與動脈粥樣硬化性心血管疾病的關(guān)系的研究新進(jìn)展[J]. 何平平,歐陽新平,唐艷艷,李金鳳,尹衛(wèi)東,唐朝克.  中國動脈硬化雜志. 2013(10)
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