背景：動(dòng)脈粥樣硬化（AS）是心血管疾病發(fā)生的最主要病理學(xué)與病理生理學(xué)基礎(chǔ)，以巨噬細(xì)胞脂質(zhì)蓄積為特征。脂蛋白酯酶（LPL）是脂質(zhì)降解的關(guān)鍵酶，已證實(shí)巨噬細(xì)胞源性的LPL能促進(jìn)巨噬細(xì)胞脂質(zhì)蓄積，進(jìn)而促進(jìn)AS的發(fā)生發(fā)展。氧化應(yīng)激與AS的發(fā)生密切相關(guān)，研究表明氧化應(yīng)激可以上調(diào)巨噬細(xì)胞源性LPL的表達(dá)，促進(jìn)巨噬細(xì)胞脂質(zhì)蓄積。白樺脂酸（BA）是一種五環(huán)三萜類化合物，最新研究表明BA具有抗氧化應(yīng)激效應(yīng)。本研究探討B(tài)A對(duì)ROS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞LPL表達(dá)及活性的影響，以及進(jìn)一步對(duì)巨噬細(xì)胞脂質(zhì)蓄積的影響，并研究其作用的主要機(jī)制。方法：RAW264.7巨噬細(xì)胞予以不同濃度H2O2（0,50,100,200μM）處理18h或加入200μM H2O2孵育細(xì)胞時(shí)間（0,612,18,24h），運(yùn)用熒光探針DCFH-DA檢測(cè)ROS的表達(dá)；實(shí)時(shí)定量PCR和Western Blot檢測(cè)LPL mRNA和蛋白水平，試劑盒檢測(cè)LPL活性。不同濃度BA （0,0.5,1,2μg/ml）預(yù)處理24h及BA（1μg/ml）預(yù)處理細(xì)胞不同時(shí)間（0,12,24,48h）后，再加入H2O2（200μM）處理18h，分別檢測(cè)LPL的表達(dá)及... 

【文章來(lái)源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】：65 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
引言
主要實(shí)驗(yàn)材料和儀器
    一、主要實(shí)驗(yàn)試劑
    二、主要實(shí)驗(yàn)儀器
主要實(shí)驗(yàn)技術(shù)與方法
    一、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)
    二、細(xì)胞總蛋白的提取
    三、蛋白質(zhì)免疫（Western blot）
    四、實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Real Time PCR）
    五、油紅O染色
    六、細(xì)胞內(nèi)活性氧（ROS）測(cè)定
    七、siRNA 轉(zhuǎn)染技術(shù)
    八、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    一、 氧化應(yīng)激對(duì)巨噬細(xì)胞源性 LPL 表達(dá)及活性的影響
    二、 BA 對(duì)氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞 LPL 表達(dá)及活性的影響
    三、BA 對(duì) LPL 介導(dǎo)的巨噬細(xì)胞脂質(zhì)蓄積的影響
    四、BA 對(duì) H2O2誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)生成的 ROS 的影響
    五、BA 對(duì) H_2O_2誘導(dǎo)的 RAW264.7 巨噬細(xì)胞內(nèi) PKC 、MAPK 及c-Fos 活化的影響
    六、PKC 、ERK1/2 及 c-Fos 分別在 BA 下調(diào) H_2O_2誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞 LPL 生成中的作用
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄 主要英文縮略語(yǔ)索引
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
碩士期間發(fā)表的論文
致謝
基金資助


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]脂蛋白脂酶的調(diào)控與功能及其致動(dòng)脈粥樣硬化機(jī)制的研究新進(jìn)展[J]. 彭娟,尹衛(wèi)東,唐朝克.  中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志. 2014(03)
[2]脂蛋白脂酶與糖尿病心肌病[J]. 劉翔宇,尹衛(wèi)東,唐朝克.  生理科學(xué)進(jìn)展. 2014(01)
[3]甘油三酯水平升高與動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病的關(guān)系的研究新進(jìn)展[J]. 何平平,歐陽(yáng)新平,唐艷艷,李金鳳,尹衛(wèi)東,唐朝克.  中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志. 2013(10)
[4]脂蛋白酯酶研究進(jìn)展及對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的影響[J]. 田國(guó)平,陳五軍,何平平,尹衛(wèi)東,唐朝克.  生理科學(xué)進(jìn)展. 2012(05)
[5]以ABCA1為靶點(diǎn)防治動(dòng)脈粥樣硬化[J]. 唐朝克.  中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志. 2011(11)
[6]NO-1886對(duì)高脂/高糖/高膽固醇飼養(yǎng)的小型豬組織中腫瘤壞死因子α和白細(xì)胞介素1β蛋白表達(dá)的影響[J]. 蔡曼波,李建軍,胡麗,何平平,周鈺娟,尹衛(wèi)東.  中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志. 2011(09)
[7]代謝綜合征患者氧化型低密度脂蛋白與頸動(dòng)脈硬化的相關(guān)性[J]. 楊立斌,刁增利,李海濤.  中國(guó)循證心血管醫(yī)學(xué)雜志. 2011(02)
[8]殘粒脂蛋白經(jīng)脂肪細(xì)胞發(fā)揮致動(dòng)脈粥樣硬化作用[J]. 李美玲,鄭小燕,劉玲.  中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志. 2011(01)
[9]白樺酸類化合物的結(jié)構(gòu)修飾與生物活性研究進(jìn)展[J]. 藍(lán)平,張冬梅,陳衛(wèi)民,葉文才.  藥學(xué)學(xué)報(bào). 2010(11)
[10]脂蛋白酯酶與動(dòng)脈粥樣硬化(英文)[J]. 堤一彥,尹衛(wèi)東,袁中華.  生命科學(xué)研究. 2003(02)



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