目的:G蛋白偶聯(lián)受體APJ的內(nèi)源性配體——Apelin在心血管系統(tǒng)形成及相關(guān)疾病的發(fā)生發(fā)展中具有重要作用。本實驗室前期研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),Apelin-13具有誘導(dǎo)心肌細(xì)胞肥大的作用,且鐵自噬-線粒體鐵離子轉(zhuǎn)運蛋白Sideroflexin1（SFXN1）參與了Apelin-13誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞肥大過程。最新研究表明SFXN1能夠?qū)⒔z氨酸轉(zhuǎn)入線粒體內(nèi),參與線粒體內(nèi)一碳單位代謝過程。文獻(xiàn)報道SFXN1位于線粒體既能夠轉(zhuǎn)運鐵離子也能夠轉(zhuǎn)運絲氨酸,轉(zhuǎn)運鐵離子時鐵自噬-SFXN1-線粒體鐵超載途徑參與了Apelin-13誘導(dǎo)心肌細(xì)胞肥大的發(fā)生與發(fā)展過程。Apelin/APJ促進(jìn)SFXN1線粒體鐵轉(zhuǎn)運的同時很有可能會導(dǎo)致SFXN1對線粒體絲氨酸轉(zhuǎn)運的減少造成細(xì)胞內(nèi)一碳單位代謝紊亂從而參與心肌肥厚的發(fā)生發(fā)展。本課題擬研究Apelin-13對絲氨酸代謝及一碳單位代謝的影響,并在前期研究的基礎(chǔ)上探討線粒體絲氨酸一碳單位代謝途徑介導(dǎo)Apelin-13促心肌細(xì)胞肥大的新機制,揭示Apelin-13/APJ系統(tǒng)誘導(dǎo)心肌肥厚的新機制,為開發(fā)以APJ為靶點的抗心肌肥厚藥物提供新的實驗依據(jù)。方法:1、ELISA試劑盒:檢測... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

絲氨酸一碳單位代謝示意圖(B)ELISA試劑盒檢測Apelin-13(0-1μM,

3h，6h，12h，24h）處理下以及使用 APJ 受體拮抗劑 F13A 對 H9c2 心肌細(xì)胞線粒體中絲氨酸一碳單位代謝關(guān)鍵酶 SHMT2 的影響。結(jié)果顯示：與對照組相比Apelin-13 呈劑量依賴性減少心肌細(xì)胞線粒體中 SHMT2 表達(dá)（如圖 2A 所示），以及 Apelin-13 呈時間依賴性降低心肌細(xì)胞線粒體中 SHMT2 的表達(dá)（如圖 2B所示）。應(yīng)用 APJ 拮抗劑 F13A（1μmol/L）提前孵育 H9c2 心肌細(xì)胞 30 分鐘后再加入 Apelin-13(1μmol/L)處理 24h，觀察到 F13A 能夠逆轉(zhuǎn) H9c2 心肌細(xì)胞線粒體中 Apelin-13 對 SHMT2 的作用（如圖 2D 所示），表明 Apelin-13 能夠降低 H9c2心肌細(xì)胞線粒體中 SHMT2 的表達(dá)。

南華大學(xué)碩士學(xué)位論文164.2Apelin-13/APJ抑制H9c2心肌細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)絲氨酸一碳單位代謝4.2.1Apelin-13降低H9c2心肌細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中絲氨酸一碳單位代謝關(guān)鍵酶——SHMT1的表達(dá)SHMT1(絲氨酸羥甲基轉(zhuǎn)移酶1)位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，是細(xì)胞質(zhì)中絲氨酸一碳單位代謝的關(guān)鍵酶，能夠?qū)⒓?xì)胞質(zhì)中的絲氨酸轉(zhuǎn)變成5,10-CH2-THF（如圖1A所示）。已知Apelin-13能夠抑制H9c2細(xì)胞線粒體內(nèi)的絲氨酸和一碳單位代謝，那么Apelin-13對H9c2心肌細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中絲氨酸一碳單位代謝影響又是如何？實驗檢測Apelin-13在不同劑量（0μmol/L,0.001μmol/L,0.01μmol/L,0.1μmol/L,1μmol/L）和不同時間（0h，3h，6h，12h，24h）處理下以及使用APJ受體拮抗劑F13A對H9c2心肌細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中絲氨酸一碳單位代謝關(guān)鍵酶SHMT1的影響。結(jié)果顯示：與對照組相比Apelin-13呈劑量依賴性減少心肌細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中SHMT1表達(dá)（如圖4A所示），以及Apelin-13呈時間依賴性降低心肌細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中SHMT1的表達(dá)（如圖4B所示）。應(yīng)用APJ拮抗劑F13A（1μmol/L）提前孵育H9c2心肌細(xì)胞30分鐘后再加入Apelin-13(1μmol/L)處理24h，觀察到F13A能夠逆轉(zhuǎn)H9c2心肌細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中Apelin-13對SHMT1的作用（如圖4C所示），表明Apelin-13能夠降低H9c2心肌細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中絲氨酸一碳單位代謝關(guān)鍵酶SHMT1的表達(dá)。圖4(A)Apelin-13呈量效關(guān)系降低H9c2心肌細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中SHMT1的表達(dá)。(B)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]APJ受體作為心肌細(xì)胞壓力感受器誘導(dǎo)心肌肥厚的形成[J]. 謝鳳,李蘭芳,陳臨溪.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2013(01)

碩士論文
[1]鐵自噬促Sideroflexin1依賴性線粒體鐵超載介導(dǎo)apelin-13誘導(dǎo)心肌細(xì)胞肥大[D]. 吳娣.南華大學(xué) 2016
[2]NOX4-自噬途徑介導(dǎo)apelin-13促單核細(xì)胞—人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞粘附[D]. 李赫寧.南華大學(xué) 2015



本文編號：3344337