【背景】肺動(dòng)脈高壓（pulmonary arterial hypertension,PAH）是一種多因素和進(jìn)行性的惡性心血管疾病,其主要的臨床特征性表現(xiàn)是肺血管阻力和肺動(dòng)脈壓力的增加,最終導(dǎo)致患者右心衰竭甚至死亡。研究表明,肺血管重構(gòu)是PAH肺血管重構(gòu)的重要病理生理機(jī)制。我們前期研究發(fā)現(xiàn),真核翻譯起始因子2α（eukaryotic initiation factor 2α,eIF2α）在與低氧誘導(dǎo)的肺高壓（pulmonary hypertension,PH）肺血管重構(gòu)中起重要作用,但其機(jī)制尚未清楚。研究發(fā)現(xiàn),自噬可促進(jìn)野百合堿誘導(dǎo)的PAH肺血管重構(gòu)�；趀IF2α在低氧誘導(dǎo)的PH肺血管重構(gòu)中發(fā)揮重要作用,而自噬也參與調(diào)節(jié)PAH肺血管重構(gòu),因此,我們推測(cè)在野百合堿誘導(dǎo)的PAH肺血管重構(gòu)中,eIF2α很可能通過(guò)自噬而在PAH肺血管重構(gòu)中發(fā)揮重要的作用。【目的】（1）確證eIF2α在野百合堿誘導(dǎo)的PAH肺血管重構(gòu)的重要作用;（2）闡明eIF2α促野百合堿誘導(dǎo)的PAH肺血管重構(gòu)肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞（Pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs）增殖由自噬所... 

【文章來(lái)源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

野百合堿誘導(dǎo)PAH肺血管重構(gòu)血流動(dòng)力學(xué)的變化

圖 2 HE 染色觀察肺血管重構(gòu)及 q-PCR 檢測(cè)增殖標(biāo)志物 ki67、PCNA 的表達(dá)(A、B、C) 野百合堿誘導(dǎo) PAH 大鼠肺動(dòng)脈重構(gòu)圖 (200×)；(D)血管中膜的厚度百分比值(WT= WT (%) =areaext areaint/ areaext×100, where areaextand areaint are the area bounded byexternal and internal elastic lamina, respectively) ；(E) Ki-67 mRNA表達(dá)情況；(F) PCNAmRNA表達(dá)情況；Ki-67：核蛋白，細(xì)胞增殖的標(biāo)記物；PCNA：細(xì)胞增殖核抗原；Bar 為 100 μm；Control：對(duì)照組；Vehicle：溶媒組；MCT：野百合堿組；數(shù)據(jù)表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤，n=8，*P ＜0.05 vs control3.2 MCT 誘導(dǎo)的PAH 大鼠肺動(dòng)脈組織中 Ki-67 和PCNA 表達(dá)變化為進(jìn)一步確認(rèn)野百合堿誘導(dǎo)了 PAH 肺血管重構(gòu)及 PASMCs 增殖 ，我們運(yùn)用 Real-time PCR 的方法檢測(cè)肺動(dòng)脈組織中兩個(gè)增殖標(biāo)志物 Ki-67 及 PCNA 的

標(biāo)志物 LC3B、p62 的表達(dá)變化Real-time PCR 檢測(cè)肺動(dòng)脈組織中 eIF2α mRNA 的表達(dá)情況。其結(jié)果顯示，MCT 模型組肺動(dòng)脈中 eIF2α 的 mRNA 表達(dá)水平顯著上調(diào) (圖 3A)。在肺動(dòng)脈組織中的 p-eIF2α、eIF2α 的蛋白免疫印跡分析中，與對(duì)照組相比，MCT 模型組肺動(dòng)脈中 p-eIF2α 水平升高、eIF2α 的蛋白表達(dá)顯著上調(diào) (圖 3B)，這些結(jié)果說(shuō)明在 MCT 誘導(dǎo)的 PAH 模型中，eIF2α 被激活。而以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果均提示，eIF2α 參與了 MCT 誘導(dǎo)的 PAH 肺血管重構(gòu)；此外，蛋白免疫印跡分析結(jié)果顯示 (圖 3B)，在肺動(dòng)脈組織中，與對(duì)照組相比，MCT 模型組肺動(dòng)脈組織中自噬分子標(biāo)志物L(fēng)C3B 的蛋白表達(dá)顯著上調(diào)，而 p62 的蛋白表達(dá)明顯下調(diào)，說(shuō)明在 MCT 誘導(dǎo)的PAH 的模型中，自噬被顯著激活，并且灰度掃描結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析表明，模型組與對(duì)照組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P <0.05) (圖 3C、D、E)；上述結(jié)果提示，自噬參與了 MCT 誘導(dǎo)的 PAH 肺血管重構(gòu)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]我國(guó)動(dòng)脈粥樣硬化基礎(chǔ)研究近三年進(jìn)展[J]. 李靚,謝巍,姜志勝,尹衛(wèi)東,唐朝克.  中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志. 2015(11)
[2]自噬與動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系及中藥的干預(yù)作用[J]. 于紅紅,吳瑪莉,冷泠,田維毅.  中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志. 2014(07)
[3]HPV（16/18）E6、PKR、p-PKR、p-EIF2α在宮頸病變組織表達(dá)的意義[J]. 羅遠(yuǎn)材,瞿全新,糜若然.  天津醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2010(01)
[4]eIF2α激酶和eIF2α磷酸化對(duì)特異的蛋白質(zhì)合成的激活作用研究進(jìn)展[J]. 韓欽.  國(guó)外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊(cè)). 2002(06)

博士論文
[1]eIF-2α磷酸化在E-/B48脂蛋白誘導(dǎo)泡沫細(xì)胞形成中的作用研究[D]. 趙艷峰.武漢大學(xué) 2010



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