目的:通過(guò)SD大鼠左肺全切建立肺動(dòng)脈高壓模型,尋找能將miR-19a有效轉(zhuǎn)導(dǎo)入肺動(dòng)脈的方法,研究miR-19a差異性表達(dá)對(duì)大鼠肺血管重建及肺高壓形成程度的影響,明確mi R-19a與VEGF、BMPR2的調(diào)控關(guān)系,從而探討出診斷及治療動(dòng)脈型肺動(dòng)脈高壓的潛在靶點(diǎn)及手段。方法:1)建立左側(cè)肺葉全切除肺動(dòng)脈高壓SD大鼠模型,使用腺相關(guān)病毒載體攜帶miR-19a并經(jīng)氣管導(dǎo)管導(dǎo)入大鼠肺動(dòng)脈,第三周行快速冰凍切片,觀察肺動(dòng)脈綠色熒光蛋白表達(dá)（eGFP）,第八周時(shí)行qRT-PCR監(jiān)測(cè)miR-19a含量;2)30只6-8周齡雄性SD大鼠,隨機(jī)均分為5組,每組6只,C為正常對(duì)照組,行假手術(shù);P0組行單純左側(cè)肺葉全切除手術(shù);P1組行左側(cè)肺葉全切除手術(shù),并在術(shù)畢時(shí)通過(guò)氣管導(dǎo)管滴入過(guò)表達(dá)mi R-19a腺相關(guān)病毒病毒（AAV）,滴度為1*10¹² v.g./ml;P2組行左側(cè)肺葉全切除手術(shù),并在術(shù)畢通過(guò)氣管導(dǎo)管注入等量載有miR-19a封閉序列的AAV;P3組行左側(cè)肺葉全切除手術(shù),并在術(shù)畢通過(guò)氣管導(dǎo)管注入等量的空載AAV。飼養(yǎng)8周后,測(cè)各組平均肺動(dòng)脈壓力（mPAP）,并處死動(dòng)物取肺組織做... 

【文章來(lái)源】：西南醫(yī)科大學(xué)四川省

【文章頁(yè)數(shù)】：68 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

1插管通氣后消毒

松解左下肺韌帶后，用眼科鑷牽拉出左全肺組織，顯露肺門，結(jié)扎，切除左肺全葉。（圖2.1.2,圖 2.1.3）試水實(shí)驗(yàn)無(wú)漏氣，查無(wú)滲血，逐層關(guān)胸。術(shù)畢恢復(fù)正常體位，呼吸機(jī)繼續(xù)予以支持 60 分鐘，待大鼠痛覺(jué)反射恢復(fù)，自主呼吸恢復(fù)，進(jìn)行下一步操作。術(shù)后皮下注射青霉素（用 N.S 配 8 萬(wàn)單位，0.1ml/只），以預(yù)防感染。對(duì)照 C 組僅單純開胸，同樣注射青霉素。圖 2.1.1 插管通氣后消毒 圖 2.1.2 牽拉左肺，結(jié)扎肺門 圖 2.1.3 切下左肺組織

氣管導(dǎo)管（50ml 空針針頭磨鈍后使用）放入口腔，沿著舌根往內(nèi)深入，對(duì)準(zhǔn)聲門，吸氣相時(shí)將輕柔氣管導(dǎo)管導(dǎo)入氣道，若進(jìn)入氣管向下插時(shí)可感覺(jué)導(dǎo)管與氣管軟骨環(huán)的特殊摩擦感，固定導(dǎo)管并連接呼吸機(jī)（潮氣量 15ml/kg，呼吸頻率 80 次/分，吸呼比 1:1.5-2.0），可見(jiàn)胸廓隨之起伏。取右側(cè)臥位，消毒手術(shù)區(qū)域（圖 2.1.1），沿著左側(cè)第 3 肋間后外側(cè) 1.0cm 的切口切開皮膚，逐層分離胸前肌及肋間肌，進(jìn)入胸腔后，減小潮氣量，松解左下肺韌帶后，用眼科鑷牽拉出左全肺組織，顯露肺門，結(jié)扎，切除左肺全葉。（圖2.1.2,圖 2.1.3）試水實(shí)驗(yàn)無(wú)漏氣，查無(wú)滲血，逐層關(guān)胸。術(shù)畢恢復(fù)正常體位，呼吸機(jī)繼續(xù)予以支持 60 分鐘，待大鼠痛覺(jué)反射恢復(fù)，自主呼吸恢復(fù)，進(jìn)行下一步操作。術(shù)后皮下注射青霉素（用 N.S 配 8 萬(wàn)單位，0.1ml/只），以預(yù)防感染。對(duì)照 C 組僅單純開胸，同樣注射青霉素。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]基因治療中重組腺相關(guān)病毒載體的安全性[J]. 張梅,于英君.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué). 2017(04)
[2]TGF-β信號(hào)傳導(dǎo)通路及其生物學(xué)功能[J]. 劉镕,趙琴平,董惠芬,蔣明森.  中國(guó)病原生物學(xué)雜志. 2014(01)
[3]腺相關(guān)病毒（AAV）載體研究進(jìn)展[J]. 趙麗琴,席斌,彭華松.  生物技術(shù)進(jìn)展. 2012(02)
[4]波生坦治療特發(fā)性肺動(dòng)脈高壓患者的療效及安全性[J]. 代立志,蔣鑫,王勇,余再新,姚樺,王廣義,吳炳祥,荊志成.  中華心血管病雜志. 2011 (02)
[5]循環(huán)miR-19a作為先天性心臟病相關(guān)肺動(dòng)脈高壓的標(biāo)志物[J]. 陳偉丹,聶宇,李守軍.  中國(guó)分子心臟病學(xué)雜志. 2010(05)
[6]microRNA在先天性心臟病繼發(fā)性肺動(dòng)脈高壓肺組織內(nèi)變化的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 陳偉丹,花中東,楊克明,孟強(qiáng),張浩,張瑛,潘湘斌,王德,李巖,李守軍.  中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào). 2010(04)
[7]血管內(nèi)皮細(xì)胞在先天性心臟病并肺動(dòng)脈高壓中的作用[J]. 武藝飛,龐玉生.  心血管病學(xué)進(jìn)展. 2008(02)
[8]西地那非對(duì)肺動(dòng)脈高壓大鼠肺血管重塑的影響[J]. 曾真,姜楨,王春生.  中華麻醉學(xué)雜志. 2006(08)



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