目的:內(nèi)皮功能紊亂是心腦血管病重要的病生理基礎。加速血管損傷后再內(nèi)皮化和血管新生,是預防及治療心血管病的關(guān)鍵。內(nèi)皮祖細胞（endothelial progenitor cells,EPCs）參與血管內(nèi)皮修復及血管新生,EPCs的歸巢、增殖及分化受多種轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控網(wǎng)絡的影響,其機制尚未闡明。本實驗旨在研究新型C2H2鋅指蛋白基因ZFP580調(diào)控EPCs分化的分子機制,為深入研究ZFP580的生物學功能提供實驗依據(jù),為治療血管性疾病提供新的治療策略和靶點。方法:①密度梯度離心法,分離培養(yǎng)大鼠骨髓源性EPCs,免疫熒光染色及流式細胞技術(shù)（FACS）鑒定EPCs;②體外誘導培養(yǎng)EPCs,觀察EPCs在0 d、4 d、7 d、14 d細胞形態(tài)的動態(tài)改變;免疫熒光染色檢測eNOS在相應時間點的表達變化;流式細胞技術(shù)檢測EPCs分化表面分子標記物的動態(tài)改變;QPCR及Western blot檢測相應時間點ZFP580 mRNA和蛋白表達水平的變化;③腺病毒轉(zhuǎn)染技術(shù)獲得過（低）表達ZFP580的EPCs,QPCR、Western blot、流式細胞技術(shù)及體內(nèi)外血管形成實驗等方法檢測ZFP580對EPC... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

鋅指基因是人類基因組中一類重要的調(diào)控基因，鋅指轉(zhuǎn)錄因子在細胞增殖、分化與遷移等過程中起著十分重要的作用[20]

在受到組織缺血、缺氧、血管壁損傷、動脈粥樣硬化斑塊、冠脈血栓、介入支架術(shù)后等刺激后，骨髓源性內(nèi)皮前體細胞(Endothelial precursor cells, EPCs)可被動員并釋放至外周血中，招募至血管損傷部位，發(fā)揮其生物學效應，如圖1所示。內(nèi)皮前體細胞即內(nèi)皮祖細胞(Endothelial progenitor cells, EPCs)是一類能循環(huán)、增殖并分化為血管內(nèi)皮細胞，但尚未表達成熟血管內(nèi)皮細胞表型，也未形成血管的前體細胞[9]。EPCs最主要的生物學功能促進血管新生，參與血管損傷后的內(nèi)皮修復及再內(nèi)皮化。多項研究表明高血壓、冠心病患者或動物體內(nèi)EPCs的數(shù)量和功能是下降的，在動物實驗模型中進行EPCs移植治療后，結(jié)果發(fā)現(xiàn)癥狀有所改善，表現(xiàn)為血管彈性增加、血壓下降、心輸出量增加[10,11]。國外另有研究證實，在頸動脈球囊損傷模型中，動員或移植EPCs可以加速損傷后血管再內(nèi)皮化，減少新生內(nèi)膜的過度增生[12]。此外

【參考文獻】：
期刊論文
[1]ZNF580-EGFP融合蛋白的亞細胞定位研究[J]. 張文成,孫慧燕,孟祥艷.  中國病理生理雜志. 2008(08)
[2]ZNF580與EGFP融合蛋白表達載體的構(gòu)建及其在HEK293細胞的表達和定位[J]. 張文成,孫慧燕,羅玉玉,崔明亮.  武警醫(yī)學院學報. 2008(03)
[3]低密度脂蛋白誘導下調(diào)的新基因cDNA的克隆及組織表達[J]. 張文成,陳保生,曾武威,吳剛,薛紅.  基礎醫(yī)學與臨床. 2003(03)



本文編號：3317101