研究目的:探討CD137信號(hào)是否通過STAT6/PPARδ通路調(diào)控動(dòng)脈粥樣硬化巨噬細(xì)胞M2極性轉(zhuǎn)變。研究方法:（1）體內(nèi)實(shí)驗(yàn)將6⁸周齡ApoE^-/-雄性小鼠分為5組,包括對(duì)照組、CD137激動(dòng)組、CD137抑制組,STAT6抑制組和PPARδ抑制組;通過HE染色檢測(cè)小鼠主動(dòng)脈中動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的面積,通過免疫熒光染色檢測(cè)小鼠主動(dòng)脈斑塊內(nèi)巨噬細(xì)胞iNOS和Arginase-1表達(dá)量,以及STAT6和PPARδ的表達(dá)量;（2）體外實(shí)驗(yàn)使用誘導(dǎo)腹腔無菌性炎癥法提取腹腔原代巨噬細(xì)胞;使用流式細(xì)胞術(shù)、western blot和ELISA驗(yàn)證CD137信號(hào)對(duì)巨噬細(xì)胞M2極性轉(zhuǎn)變的作用;使用STAT6抑制劑抑制STAT6的表達(dá),并使用western blot驗(yàn)證抑制效率;使用PPARδsiRNA干擾PPARδ的表達(dá),并使用qRT-PCR驗(yàn)證干擾效率;使用流式細(xì)胞術(shù)和qRT-PCR驗(yàn)證STAT6/PPARδ通路對(duì)巨噬細(xì)胞極性轉(zhuǎn)變的影響;（3）共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)上室種植巨噬細(xì)胞,下室基質(zhì)膠種植內(nèi)皮細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)分4組,即對(duì)照組、CD137信號(hào)激動(dòng)組、STAT6抑制組和PP... 

【文章來源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

各組小鼠主動(dòng)脈斑塊HE染色(100μm)

江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文12圖2.2各組小鼠主動(dòng)脈斑塊中iNOS和Arginase-1的免疫熒光染色(100μm)Fig2.2Immunofluorescencestainingofp-STAT6andPPARδinplaquesofeachgroupmice免疫熒光染色顯示小鼠主動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)Arginase-1(綠色，J-L)和iNOS(紅色，G-I)陽性細(xì)胞的熒光。DAPI(M-O)，Merge(P-R)。定量分析顯示巨噬細(xì)胞表達(dá)的Arginase-1/iNOS的熒光強(qiáng)度。**,P<0.01;***,P<0.001.2.3.3小鼠腹腔原代巨噬細(xì)胞鑒定細(xì)胞免疫熒光染色結(jié)果顯示，幾乎所有的腹腔巨噬細(xì)胞都表達(dá)CD68。流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示，小鼠腹腔原代巨噬細(xì)胞分離純度高達(dá)97.93%±1.31%，適于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。圖2.3小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的免疫熒光染色(100μm)Fig2.3Immunofluorescencestainingofprimarymurineperitonealmacrophages

江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文12圖2.2各組小鼠主動(dòng)脈斑塊中iNOS和Arginase-1的免疫熒光染色(100μm)Fig2.2Immunofluorescencestainingofp-STAT6andPPARδinplaquesofeachgroupmice免疫熒光染色顯示小鼠主動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)Arginase-1(綠色，J-L)和iNOS(紅色，G-I)陽性細(xì)胞的熒光。DAPI(M-O)，Merge(P-R)。定量分析顯示巨噬細(xì)胞表達(dá)的Arginase-1/iNOS的熒光強(qiáng)度。**,P<0.01;***,P<0.001.2.3.3小鼠腹腔原代巨噬細(xì)胞鑒定細(xì)胞免疫熒光染色結(jié)果顯示，幾乎所有的腹腔巨噬細(xì)胞都表達(dá)CD68。流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示，小鼠腹腔原代巨噬細(xì)胞分離純度高達(dá)97.93%±1.31%，適于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。圖2.3小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的免疫熒光染色(100μm)Fig2.3Immunofluorescencestainingofprimarymurineperitonealmacrophages


本文編號(hào)：3306803