左心輔助裝置致心梗早期心肌卸負(fù)荷后心肌細(xì)胞及miRNA變化的研究
本文關(guān)鍵詞:左心輔助裝置致心梗早期心肌卸負(fù)荷后心肌細(xì)胞及miRNA變化的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:左心輔助裝置雖已大量使用于終末期心衰患者,但能否應(yīng)用于心;颊呱写嬖跔幾h。為此我們制作了羊急性心梗模型,驗證左心輔助裝置卸負(fù)荷干預(yù)下心梗心肌細(xì)胞壞死減少的假設(shè);基于成立的假設(shè),對大量存活的冬眠心肌細(xì)胞,借助高通量測序技術(shù),較全面的發(fā)現(xiàn)缺血、缺氧條件下的冬眠心肌細(xì)胞miRNA的變化,希望對心梗后miRNA以及心肌細(xì)胞保護(hù)的研究有所幫助。方法:6只成年小尾寒羊經(jīng)結(jié)扎冠狀動脈制作心梗模型,其中實驗組3只在心臟不停跳下植入左心輔助裝置(FW-Ⅱ型軸流泵),其余3只為對照組不作卸負(fù)荷處理。記錄心梗后12、24、36、48、72小時CTnⅠ值評價心肌細(xì)胞損傷程度。72小時后取出標(biāo)本,病理檢查觀察心肌細(xì)胞破壞及炎癥細(xì)胞浸潤情況,TUNEL法檢測兩組動物心肌細(xì)胞凋亡情況。將實驗組、對照組的心肌組織分為心梗、梗死邊帶區(qū)域、正常區(qū)域三種樣品。根據(jù)每種樣品中miRNA的歸一化表達(dá)量,計算樣本間Pearson相關(guān)系數(shù);利用皮爾遜相關(guān)系數(shù),評價樣本間的相關(guān)性,通過高通量檢測技術(shù),檢測中心肌細(xì)胞miRNA,并在三種樣品間進(jìn)行對比,發(fā)現(xiàn)期間miRNA的變化情況。結(jié)果:卸負(fù)荷后各個時間點實驗組CTnⅠ值變化幅度均較對照組有差異,病理發(fā)現(xiàn)實驗組心梗及梗死邊帶區(qū)域炎癥細(xì)胞浸潤較少,壞死心肌細(xì)胞較少,大量心肌細(xì)胞呈Ⅰ冬眠細(xì)胞狀態(tài)存活;而對照組對應(yīng)區(qū)域炎癥細(xì)胞浸潤廣泛,壞死心肌細(xì)胞較多。TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡結(jié)果顯示實驗組梗死邊帶區(qū)域心肌細(xì)胞凋亡程度低于對照組(47.83±16.24%對75.80±11.16%,P0.05)。通過計算樣本間Pearson相關(guān)系數(shù),認(rèn)為樣品的重復(fù)性達(dá)到標(biāo)準(zhǔn),并表明同種類樣品間的關(guān)聯(lián)性好,實驗設(shè)計合理,對以上三種樣本通過高通量miRNA測序,并兩兩間比較表明,共有53種已知miRNA,370種未知miRNA發(fā)生變化。結(jié)論:通過左心輔助裝置對心梗早期心肌卸負(fù)荷,可以有效減輕心梗心肌細(xì)胞死亡程度,減少炎癥細(xì)胞滲出,能為心梗后續(xù)治療提供良好的心肌細(xì)胞基礎(chǔ),改善治療預(yù)后,基于成立的假設(shè),對大量存活的冬眠心肌細(xì)胞,借助高通量測序技術(shù),較全面的發(fā)現(xiàn)了缺血、缺氧條件下的冬眠心肌細(xì)胞miRNA的變化,對心梗后mi RNA以及心肌細(xì)胞保護(hù)的研究將有所幫助。
【關(guān)鍵詞】:心梗 左心輔助裝置 卸負(fù)荷 動物模型 冬眠細(xì)胞 高通量測序 miRNA
【學(xué)位授予單位】:山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R542.22
【目錄】:
- 中文摘要6-8
- 英文摘要8-10
- 常用縮寫詞中英文對照表10-11
- 前言11-12
- 第一部分 立項依據(jù)12-24
- 1 材料與方法13-16
- 1.1 實驗儀器與材料13
- 1.2 實驗動物13
- 1.3 術(shù)前處理13
- 1.4 心梗動物模型制作13-14
- 1.5 實驗組植入FW-Ⅱ型軸流泵14-15
- 1.6 術(shù)后處理15
- 1.7 組織病理學(xué)檢查15
- 1.8 免疫組織化學(xué)檢查15
- 1.9 統(tǒng)計學(xué)分析15-16
- 2 結(jié)果16-20
- 2.1 實驗動物總體情況16
- 2.2 實驗組心肌卸負(fù)荷評價16
- 2.3 CTnⅠ水平16-17
- 2.4 兩組病理顯示差異17-18
- 2.5 TUNEL細(xì)胞凋亡比例18-20
- 3 討論20-23
- 3.1 急性心肌梗死的病因及病理變化20
- 3.2 急性心肌梗死的治療現(xiàn)狀20-21
- 3.3 左心輔助裝置的使用現(xiàn)狀21-22
- 3.4 本研究的不足之處22-23
- 4 結(jié)論23-24
- 第二部分illumina small RNA測序24-32
- 1 Small RNA建庫24-26
- 1.1 實驗儀器與材料24
- 1.2 樣品準(zhǔn)備和質(zhì)量控制24
- 1.3 建庫24-26
- 2 上機(jī)測序26-27
- 2.1 文庫上機(jī)樣品準(zhǔn)備26
- 2.2 Phix control樣品準(zhǔn)備26
- 2.3 簇生成26
- 2.4 邊合成邊測序26-27
- 3 結(jié)果27-29
- 3.1 miRNA分析結(jié)果27
- 3.2 miRNA差異性表達(dá)27-29
- 4 討論29-31
- 5 結(jié)論31-32
- 參考文獻(xiàn)32-34
- 綜述34-43
- 參考文獻(xiàn)40-43
- 致謝43-44
- 在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果44-45
- 個人簡歷45
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,本文編號:329793
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