背景心力衰竭是多種心臟疾病發(fā)展的嚴(yán)重階段,是心血管疾病患者的首要死亡原因。我們課題組的前期研究發(fā)現(xiàn),TIR/BB環(huán)擬似物AS-1可以通過抑制IL-1R介導(dǎo)的My D88信號(hào)通路改善壓力過負(fù)荷誘導(dǎo)的心肌肥大。雖然壓力過負(fù)荷誘導(dǎo)的心肌肥大、心肌纖維化以及心力衰竭是一系列連續(xù)的病理生理學(xué)過程,但是,疾病的不同階段,參與調(diào)控的信號(hào)通路不完全相同。因此,AS-1是否對(duì)壓力過負(fù)荷誘導(dǎo)病理性心肌肥大的嚴(yán)重階段――心力衰竭具有保護(hù)作用,是否在心臟已經(jīng)發(fā)生代償性心肌肥大之后還可影響疾病進(jìn)程,對(duì)疾病具有一定的治療作用,目前尚無文獻(xiàn)報(bào)道。并且AS-1調(diào)控壓力過負(fù)荷誘導(dǎo)的心力衰竭的具體分子機(jī)制也有待闡明。目的1.明確AS-1是否對(duì)壓力過負(fù)荷誘導(dǎo)的心力衰竭具有預(yù)防及治療作用。2.闡明AS-1是否對(duì)機(jī)械過度牽張誘導(dǎo)的心肌成纖維細(xì)胞活化及其旁分泌具有一定的調(diào)控作用。3.闡釋AS-1對(duì)機(jī)械過度牽張誘導(dǎo)心肌成纖維細(xì)胞活化及其旁分泌作用的分子調(diào)控機(jī)制。方法1.動(dòng)物在體實(shí)驗(yàn)通過主動(dòng)脈弓縮窄術(shù)模擬左心室壓力過負(fù)荷增加復(fù)制小鼠心力衰竭模型,并給予AS-1干預(yù)（腹腔注射,劑量為50mg/kg/d）。為闡明AS-1對(duì)壓力過負(fù)荷誘導(dǎo)... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：141 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 AS-1 對(duì)壓力過負(fù)荷導(dǎo)致的心室重塑及心力衰竭的影響
    引言
    材料與方法
        1.實(shí)驗(yàn)材料
            1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
            1.3 實(shí)驗(yàn)材料
            1.4 主要試劑配制
        2.實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 動(dòng)物模型復(fù)制及實(shí)驗(yàn)分組
            2.2 TAC模型建立成功的評(píng)價(jià)
            2.3 超聲心動(dòng)圖檢測(cè)小鼠心臟結(jié)構(gòu)及功能
            2.4 標(biāo)本收集與處理
            2.5 心肌組織Masson染色
            2.6 心肌組織羥脯氨酸測(cè)定
            2.7 心肌組織交聯(lián)膠原檢測(cè)（限制性胃蛋白酶降解試驗(yàn)）
            2.8 實(shí)時(shí)定量PCR
            2.9 蛋白表達(dá)檢測(cè)
        3.數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1.AS-1 對(duì)壓力過負(fù)荷誘導(dǎo)的心室重塑及心力衰竭具有預(yù)防作用
            1.1 超聲多普勒對(duì)小鼠主動(dòng)脈弓縮窄程度的評(píng)價(jià)
            1.2 AS-1 可以延緩壓力過負(fù)荷誘導(dǎo)的心肌肥大
            1.3 AS-1 可以減輕壓力過負(fù)荷誘導(dǎo)的心肌纖維化
            1.4 AS-1 可以改善壓力過負(fù)荷誘導(dǎo)的心功能衰竭
        2.AS-1 對(duì)壓力過負(fù)荷誘導(dǎo)的心力衰竭具有治療作用
            2.1 AS-1 可以延緩壓力過負(fù)荷誘導(dǎo)的向心性心肌肥大向離心性心肌肥大及心力衰竭的發(fā)展
            2.2 AS-1 可以抑制壓力過負(fù)荷誘導(dǎo)的心肌肥大發(fā)展為心肌纖維化
    分析與討論
第二部分 AS-1 對(duì)機(jī)械過度牽張誘導(dǎo)心肌成纖維細(xì)胞活化及其旁分泌作用的影響
    引言
    材料與方法
        1.實(shí)驗(yàn)材料
            1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
            1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
            1.4 主要試劑配制
        2.實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 新生大鼠心肌成纖維細(xì)胞培養(yǎng)
            2.2 機(jī)械壓力刺激心肌成纖維細(xì)胞
            2.3 心肌細(xì)胞條件培養(yǎng)基的制備
            2.4 細(xì)胞免疫熒光
            2.5 EDU檢測(cè)成纖維細(xì)胞增殖
            2.6 Tunel染色檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡
            2.7 ELISA檢測(cè)
            2.8 實(shí)時(shí)定量PCR
            2.9 蛋白表達(dá)檢測(cè)
        3.數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1. AS-1 對(duì)機(jī)械過度牽張誘導(dǎo)的心肌成纖維細(xì)胞活化的調(diào)控作用
            1.1 AS-1 可抑制機(jī)械過度牽張誘導(dǎo)的心肌成纖維細(xì)胞增殖
            1.2 AS-1 可抑制機(jī)械過度牽張誘導(dǎo)的心肌成纖維細(xì)胞分化
            1.3 AS-1 可降低機(jī)械過度牽張誘導(dǎo)心肌成纖維細(xì)胞膠原合成增加
        2.機(jī)械過度牽張誘導(dǎo)活化的心肌成纖維細(xì)胞對(duì)心肌細(xì)胞的旁分泌調(diào)控作用
        3.AS-1 抑制機(jī)械過度牽張所致的心肌成纖維細(xì)胞旁分泌作用
            3.1 AS-1 可抑制機(jī)械過度牽張心肌成纖維細(xì)胞分泌旁分泌因子
            3.2 AS-1 可改善機(jī)械過度牽張誘導(dǎo)活化的心肌成纖維細(xì)胞旁分泌所致的心肌細(xì)胞肥大及凋亡
    分析與討論
第三部分 AS-1 對(duì)機(jī)械過度牽張誘導(dǎo)心肌成纖維細(xì)胞活化及其旁分泌作用的調(diào)控機(jī)制
    引言
    材料與方法
        1.實(shí)驗(yàn)材料
        2.實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 小干擾RNA合成
            2.2 小干擾RNA轉(zhuǎn)染
            2.3 新生大鼠心肌成纖維細(xì)胞培養(yǎng)
            2.4 機(jī)械壓力刺激心肌成纖維細(xì)胞
            2.5 心肌細(xì)胞條件培養(yǎng)基的制備
            2.6 細(xì)胞免疫熒光
            2.7 EDU檢測(cè)成纖維細(xì)胞增殖
            2.8 Tunel染色檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡
            2.9 實(shí)時(shí)定量PCR
            2.10 蛋白表達(dá)檢測(cè)
        3.數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1.AS-1 可上調(diào)壓力過負(fù)荷誘導(dǎo)的心肌組織中LATS1表達(dá)的下降
        2.AS-1 可上調(diào)機(jī)械過度牽張誘導(dǎo)的心肌成纖維細(xì)胞中LATS1表達(dá)的下降
        3.AS-1 可抑制機(jī)械過度牽張誘導(dǎo)的心肌成纖維細(xì)胞中YAP表達(dá)的增加
        4.AS-1 通過LATS1調(diào)控機(jī)械過度牽張誘導(dǎo)的心肌成纖維細(xì)胞活化
            4.1 心肌成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)染siLATS1可有效敲低細(xì)胞中LATS1的表達(dá)
            4.2 AS-1 通過LATS1調(diào)控機(jī)械過度牽張誘導(dǎo)的心肌成纖維細(xì)胞的增殖
            4.3 AS-1 通過LATS1調(diào)控機(jī)械過度牽張誘導(dǎo)的心肌成纖維細(xì)胞的分化
            4.4 AS-1 通過LATS1下調(diào)機(jī)械過度牽張誘導(dǎo)的心肌成纖維細(xì)胞膠原合成增加
        5.干擾心肌細(xì)胞LATS1表達(dá)可降低AS-1 對(duì)機(jī)械過度牽張誘導(dǎo)心肌成纖維細(xì)胞旁分泌所致的心肌細(xì)胞肥大的保護(hù)作用
        6.干擾心肌細(xì)胞LATS1表達(dá)對(duì)AS-1 在機(jī)械過度牽張誘導(dǎo)心肌成纖維細(xì)胞旁分泌所致的心肌細(xì)胞凋亡中的作用無明顯影響
    分析與討論
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述
    References
附錄
攻讀學(xué)位期間發(fā)表研究論文及科研工作情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]小鼠主動(dòng)脈弓不同程度縮窄模型的評(píng)價(jià)與比較[J]. 高云,宋娟,闕玲琍,李躍華.  南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2014(08)



本文編號(hào)：3294308