目的:探討尿多酸肽（CDA-Ⅱ）對體外培養(yǎng)原代紅系細胞γ-珠蛋白基因和蛋白表達的影響,為CDA-Ⅱ對β-地中海貧血的治療提供新思路。方法:以不同濃度CDA-Ⅱ（0 mg/mL、1 mg/mL、2 mg/mL、3 mg/mL、4 mg/mL）作用原代紅系細胞24 h、48 h和72 h,采用實時熒光定量聚合酶鏈反應（RT-PCR）和Cell counting kit-8（CCK-8）法分別檢測γ-珠蛋白基因的表達及細胞增殖-毒性情況;以3 mg/mL CDA-Ⅱ為實驗組、200 nmol/L地西他濱和100μmol/L羥基脲為陽性對照組以及等體積PBS+DMSO為陰性對照組作用細胞后,采用RT-PCR檢測γ-珠蛋白、DNA甲基轉移酶1（DNMT1）和FOXO3a mRNA表達的變化;Western Blot（WB）檢測γ-珠蛋白表達的情況。結果:RT-PCR結果表明,3 mg/mL CDA-Ⅱ作用細胞48 h和72h后上調γ-珠蛋白基因的表達作用明顯（P<0. 05）,分別為空白對照組（0 mg/mL）的2. 5倍和2. 68倍;CCK-8結果顯示細胞存活率存在時間和濃度依賴性下降... 

【文章來源】：廣西醫(yī)科大學學報. 2020,37(04)

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【部分圖文】：

流式細胞術檢測原代紅系細胞CD34+、CD71和CD235a的表達情況

(1)RT-PCR結果顯示，與陰性對照組比較，CDA-Ⅱ組和地西他濱、羥基脲陽性對照組均能使γ-珠蛋白基因表達升高（P<0.001），分別為陰性對照組的2.2倍、2.3倍和3.1倍。其中CDA-Ⅱ組與地西他濱組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。（2)WB結果顯示，與陰性對照組比較，CDA-Ⅱ組和地西他濱、羥基脲陽性對照組均能使γ-珠蛋白表達升高（P<0.01），分別為陰性對照組的2.7倍、2.5倍、3.4倍，但三組之間兩兩比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），見圖3。2.5 CDA-Ⅱ、地西他濱和羥基脲對原代紅系細胞DNMT1、FOXO3a基因表達的影響

(1)RT-PCR結果顯示，與陰性對照組比較，CDA-Ⅱ組和地西他濱、羥基脲陽性對照組均能夠降低DNMT1基因的表達（P<0.05），其中以CDA-Ⅱ組下調DNMT1基因的表達作用最顯著，為陰性對照組的0.58倍。（2)CDA-Ⅱ組和地西他濱、羥基脲陽性對照組均能夠升高FOXO3a基因的表達，其中CDA-Ⅱ組和羥基脲組與陰性對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見圖4。3 討論

【參考文獻】：
期刊論文
[1]γ-珠蛋白基因表達調控機制與臨床應用[J]. 鞠君毅,趙權.  遺傳. 2018(06)
[2]地中海貧血的診斷治療近況[J]. 賴永榕.  內科急危重癥雜志. 2012(06)

博士論文
[1]尿多酸肽抗骨髓增生異常綜合征（MDS）作用及其機制的實驗研究[D]. 黃健.浙江大學 2008



本文編號：3283092