目的:探討尿多酸肽（CDA-Ⅱ）對(duì)體外培養(yǎng)原代紅系細(xì)胞γ-珠蛋白基因和蛋白表達(dá)的影響,為CDA-Ⅱ?qū)Ζ?地中海貧血的治療提供新思路。方法:以不同濃度CDA-Ⅱ（0 mg/mL、1 mg/mL、2 mg/mL、3 mg/mL、4 mg/mL）作用原代紅系細(xì)胞24 h、48 h和72 h,采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）和Cell counting kit-8（CCK-8）法分別檢測(cè)γ-珠蛋白基因的表達(dá)及細(xì)胞增殖-毒性情況;以3 mg/mL CDA-Ⅱ?yàn)閷?shí)驗(yàn)組、200 nmol/L地西他濱和100μmol/L羥基脲為陽(yáng)性對(duì)照組以及等體積PBS+DMSO為陰性對(duì)照組作用細(xì)胞后,采用RT-PCR檢測(cè)γ-珠蛋白、DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1（DNMT1）和FOXO3a mRNA表達(dá)的變化;Western Blot（WB）檢測(cè)γ-珠蛋白表達(dá)的情況。結(jié)果:RT-PCR結(jié)果表明,3 mg/mL CDA-Ⅱ作用細(xì)胞48 h和72h后上調(diào)γ-珠蛋白基因的表達(dá)作用明顯（P<0. 05）,分別為空白對(duì)照組（0 mg/mL）的2. 5倍和2. 68倍;CCK-8結(jié)果顯示細(xì)胞存活率存在時(shí)間和濃度依賴性下降... 

【文章來(lái)源】：廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,37(04)

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【部分圖文】：

流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)原代紅系細(xì)胞CD34+、CD71和CD235a的表達(dá)情況

(1)RT-PCR結(jié)果顯示，與陰性對(duì)照組比較，CDA-Ⅱ組和地西他濱、羥基脲陽(yáng)性對(duì)照組均能使γ-珠蛋白基因表達(dá)升高（P<0.001），分別為陰性對(duì)照組的2.2倍、2.3倍和3.1倍。其中CDA-Ⅱ組與地西他濱組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。（2)WB結(jié)果顯示，與陰性對(duì)照組比較，CDA-Ⅱ組和地西他濱、羥基脲陽(yáng)性對(duì)照組均能使γ-珠蛋白表達(dá)升高（P<0.01），分別為陰性對(duì)照組的2.7倍、2.5倍、3.4倍，但三組之間兩兩比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見(jiàn)圖3。2.5 CDA-Ⅱ、地西他濱和羥基脲對(duì)原代紅系細(xì)胞DNMT1、FOXO3a基因表達(dá)的影響

(1)RT-PCR結(jié)果顯示，與陰性對(duì)照組比較，CDA-Ⅱ組和地西他濱、羥基脲陽(yáng)性對(duì)照組均能夠降低DNMT1基因的表達(dá)（P<0.05），其中以CDA-Ⅱ組下調(diào)DNMT1基因的表達(dá)作用最顯著，為陰性對(duì)照組的0.58倍。（2)CDA-Ⅱ組和地西他濱、羥基脲陽(yáng)性對(duì)照組均能夠升高FOXO3a基因的表達(dá)，其中CDA-Ⅱ組和羥基脲組與陰性對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)圖4。3 討論

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]γ-珠蛋白基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制與臨床應(yīng)用[J]. 鞠君毅,趙權(quán).  遺傳. 2018(06)
[2]地中海貧血的診斷治療近況[J]. 賴永榕.  內(nèi)科急危重癥雜志. 2012(06)

博士論文
[1]尿多酸肽抗骨髓增生異常綜合征（MDS）作用及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 黃健.浙江大學(xué) 2008



本文編號(hào)：3283092