背景與目的：1-磷酸鞘氨醇（Sphingosine-1-Phosphate, S1P）是鞘磷脂代謝的中間產(chǎn)物之一。對動脈粥樣硬化等心血管疾病中的發(fā)生和發(fā)展起著重要的作用。是目前頗受關(guān)注的脂質(zhì)信號分子，是溶血磷脂的中間代謝物，廣泛存在于血液、淋巴液、紅細胞、中性粒細胞、血小板等體液和細胞中，在體內(nèi)具有眾多生物學(xué)作用。S1P的這些作用，或通過其本身直接產(chǎn)生細胞內(nèi)效應(yīng)，或通過其特異性受體影響細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑產(chǎn)生作用。S1P受體（S1PR）屬于G蛋白偶聯(lián)受體家族成員，目前人們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了它的5種亞型，即S1PR1-5。S1PR1主要與Gi偶聯(lián)，不同的G蛋白介導(dǎo)了細胞內(nèi)不同的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，產(chǎn)生不同的生物學(xué)效應(yīng)，因此，S1P與其不同亞型受體作用可以激活不同的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，產(chǎn)生各種各樣的生物學(xué)效應(yīng)。但有關(guān)S1PR1對巨噬細胞內(nèi)膽固醇代謝的影響未見報道。因此，本論文主要探討S1PR1參與HDL介導(dǎo)的THP-1源性巨噬細胞膽固醇流出及其機制，為全面了解S1PR1的抗動脈粥樣硬化機制提供新的理論基礎(chǔ)。方法：1.佛波酯（Phorbol-12-myristate-13-acetate, PMA）誘導(dǎo)THP-1... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

BODIPY-Cho的分子結(jié)構(gòu)式(A)和三維結(jié)構(gòu)(B)

O染色檢測細胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積以及HPLC檢測細胞內(nèi)膽固醇含量究表明，HDL載脂蛋白apoA-1能促進膽固醇外流，改善內(nèi)皮功能，具有]。HDL的磷脂成分S1P在血液中濃度是0.1-1 μM[23]，雖已有大量研究顯As的功能，但其抗As的作用機制還需長期探討，而有關(guān)S1P及其受體巨噬細胞膽固醇代謝方面的研究尚未報道。1源性巨噬細胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積檢測L 60μg/ml 處理 THP-1 源性巨噬細胞 24h ，我們分別 50μg/mlHDL 9(ABCA1抑制劑)，通過油紅O染色觀察發(fā)現(xiàn)：經(jīng)60μg/ml氧化低密度脂蛋，與HDL處理組（C）比較，S1PR1受體抑制劑VPC23019能明顯增加THP細胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積。(如圖Fig.2A所示).A

BODIPY熒光標(biāo)記檢測細胞內(nèi)膽固醇流出我們運用高效液相色譜儀檢測細胞內(nèi)膽固醇含量，結(jié)果顯示：S1PR1受體抑制PC23019能明顯增加THP-1源性巨噬細胞內(nèi)總膽固醇和膽固醇酯的含量。

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3249298