目的觀察殼多糖酶3樣蛋白1（CHI3L1）對(duì)軟脂酸處理后人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）氧化應(yīng)激水平的影響,并初步探討其分子機(jī)制。方法體外培養(yǎng)HUVECs,采用不同濃度CHI3L1處理HUVECs 24 h,MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況。按照處理因素分為對(duì)照組（未處理）,軟脂酸組及CHI3L1+軟脂酸組,軟脂酸組用100 μmol/L軟脂酸處理24 h,CHI3L1+軟脂酸組先用100 ng/ml CHI3L1預(yù)孵育2 h,隨后加入100 μmol/L軟脂酸共同處理24 h。Western blotting檢測(cè)細(xì)胞核及細(xì)胞質(zhì)p65、核纖層蛋白（Lamin）B、肌動(dòng)蛋白（Actin）、血紅素氧合酶（HMOX）、還原型輔酶Ⅰ/Ⅱ依賴醌氧化還原酶（NQO1）、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)氧化還原1樣蛋白（Ero1-Lα）、鈣連蛋白（Calnexin）、蛋白二硫鍵異構(gòu)酶（PDI）、伴侶蛋白/葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白（BIP1/GRP）78、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白（IRE）-1α及磷酸化真核細(xì)胞翻譯啟動(dòng)因子（p-eIF）2α含量。ELISA法測(cè)定白細(xì)胞介素（IL）-6及腫瘤壞死因子（TNF）-α的分泌... 

【文章來(lái)源】：解放軍醫(yī)學(xué)雜志. 2020,45(09)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【部分圖文】：

不同濃度CHI3L1對(duì)HUVECs活性的影響

Western blotting結(jié)果顯示,軟脂酸組細(xì)胞核中NF-κB的p65亞基含量明顯高于對(duì)照組,細(xì)胞質(zhì)中p65含量明顯低于對(duì)照組,CHI3L1+軟脂酸組細(xì)胞核中p65水平明顯低于軟脂酸組,細(xì)胞質(zhì)中p65的含量明顯高于軟脂酸組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,圖2、表1)。DNA結(jié)合活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果也顯示,CHI3L1+軟脂酸組p65 DNA結(jié)合活性低于軟脂酸組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,圖2、表1)。表1 CHI3L1對(duì)軟脂酸激活NF-κB的影響(xˉ±s,n=3)Tab.1 Effect of CHI3L1 on NF-κB activized by palmitic acid (xˉ±s,n=3) 組別 細(xì)胞質(zhì)中p65含量(p65/Actin) 細(xì)胞核中p65含量(p65/Lamin B) p65 DNA結(jié)合活性 對(duì)照組 0.41±0.07 0.51±0.08 0.18±0.03 軟脂酸組 0.27±0.05(1) 0.92±0.09(1) 0.43±0.07(1) CHI3L1+軟脂酸組 0.45±0.04(2) 0.77±0.04(2) 0.26±0.04(2) F 19.851 11.851 8.421 P ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05與對(duì)照組比較，(1)P<0.05；與軟脂酸組比較，(2)P<0.05。

CHI3L1誘導(dǎo)HUVECs表達(dá)HMOX及NQO1(Western blotting)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]重組球形脂聯(lián)素通過(guò)調(diào)節(jié)自噬及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激對(duì)糖尿病小鼠睪丸的保護(hù)作用[J]. 馮勁宜,郭志新,石文姣,宋英倫,楊李莉.  解放軍醫(yī)學(xué)雜志. 2019(11)



本文編號(hào)：3243438