背景：心房顫動(dòng)（簡(jiǎn)稱房顫）是臨床上最為常見的心律失常性疾病,其發(fā)病過程是呈逐步進(jìn)展性的。房顫的發(fā)生和維持機(jī)制與炎癥是相關(guān)的,而炎癥反應(yīng)又是以信號(hào)傳導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3（signal transducer and activator of transcription3, STAT3）通路為特征的。在房顫病人的全基因組相關(guān)研究中,已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在鋅指同源框3（zinc finger homeobox3, ZFHX3,也稱為AT結(jié)構(gòu)域結(jié)合因子1即AT-motif binding factor1, ATBF1）基因上存在基因多態(tài)性位點(diǎn)。但是,ATBF1在房顫中導(dǎo)致炎癥產(chǎn)生的具體作用機(jī)制并不清楚。目的：本研究的目的是探討在電刺激誘導(dǎo)的房顫細(xì)胞模型中,ATBF1水平的下調(diào)能與活化的STAT3蛋白抑制劑（protein inhibitor of activated STAT3, PIAS3）協(xié)同作用,最終激活STAT3信號(hào)通路。方法：通過對(duì)HL-1細(xì)胞（心房肌細(xì)胞系）的高頻電刺激誘導(dǎo)構(gòu)建房顫細(xì)胞模型。設(shè)計(jì)并合成針對(duì)ATBF1和PIAS3基因編碼區(qū)的干擾序列,以及ATBF1的過表達(dá)質(zhì)粒,在脂質(zhì)體2000（Li... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

電刺激能夠誘導(dǎo)調(diào)亡效應(yīng)分子Caspase-3的表達(dá)增加A圖：WesternBlotting檢測(cè)在電刺激24小時(shí)時(shí)細(xì)胞Caspase-3蛋白的表達(dá)變化；

+圖4 ： ATBFl siRNA的轉(zhuǎn)染能增強(qiáng)電刺激對(duì)STAT3信號(hào)通路的激活A(yù)圖：ATBF1 siRNA或si-NC轉(zhuǎn)染至HL-1細(xì)胞后，再電刺激24小時(shí)后通過Western Blotting 檢測(cè) ATBFl、PIAS3、p-STAT3 和 STAT3 的蛋白表達(dá)水平（以P-actin為內(nèi)參）；B圖：ATBF1蛋白水平在電刺激（尸<0.01)或轉(zhuǎn)染ATBFls丨RNA(/^<0.01)時(shí)均明顯下調(diào)；同時(shí)進(jìn)行電刺激和轉(zhuǎn)染ATBF1 siRNA時(shí)下調(diào)更為顯著(P< 0.001);C圖：PIAS3蛋白水平在電刺激（P < 0.05)或轉(zhuǎn)染ATBF1 siRNA(/? < 0.05)時(shí)均明顯降低；同時(shí)進(jìn)行電刺激和轉(zhuǎn)染ATBF1 siRNA時(shí)降低更為顯著(尸< 0.01);D圖：P-STAT3蛋白水平在電刺激（P<0

--圖5 ： ATBFl的過表達(dá)能夠抑制電刺激對(duì)STAT3信號(hào)通路的激活A(yù)圖：pKXUal-HA-ATBFl質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至HL-1細(xì)胞再加電刺激24小時(shí)后WesternBlotting 檢測(cè) ATBFl、PIAS3、p-STAT3 和總 STAT3 的蛋白表達(dá)水平（以 p-actin為內(nèi)參）；B圖：ATBF1蛋白水平在對(duì)HL-1細(xì)胞只進(jìn)行電刺激時(shí)下調(diào)（P<0.01)，在只轉(zhuǎn)染pKXUal-HA-ATBFl質(zhì)粒時(shí)明顯上調(diào)(P< 0.001)，而在同時(shí)進(jìn)行電刺激和轉(zhuǎn)染pKXUal-HA-ATBFl質(zhì)粒后較只進(jìn)行電刺激時(shí)顯著下調(diào)(P< 0.01);C圖：PIAS3蛋白水平在對(duì)HL-1細(xì)胞只進(jìn)行電刺激時(shí)降低（P<0.01)，在只轉(zhuǎn)染pKXUal-HA-ATBFl質(zhì)粒時(shí)明顯上調(diào)(/? < 0.05)，而在同時(shí)進(jìn)行電刺激和轉(zhuǎn)染pKXUal-HA-ATBFl質(zhì)粒后較只進(jìn)行電刺激時(shí)顯著降低0.001);D圖：P-STAT3蛋白水平在對(duì)HL-l細(xì)胞只進(jìn)行電刺激時(shí)上調(diào)(P < 0.001)，在只轉(zhuǎn)染pKXUal-HA-ATBFl質(zhì)粒時(shí)明顯下降(/^ < 0.01)，而在同時(shí)進(jìn)行電刺激和轉(zhuǎn)染pKXUal-HA-ATBFl質(zhì)粒后較只進(jìn)行電刺激時(shí)顯著下降(/>< 0.001);E圖：總STAT3蛋白水平在電刺激和(或）轉(zhuǎn)染pKXUal-HA-ATBFl質(zhì)粒時(shí)均無顯著性差異（/^>0


本文編號(hào)：3240473