目的閉塞性血管病是一種常見的周圍血管慢性閉塞性炎癥病變,在器官移植性血管病、肺動(dòng)脈高壓、系統(tǒng)性硬化病的病理過程中均有表現(xiàn)。研究已經(jīng)表明,血管緊張素II受體與內(nèi)皮素-1受體在閉塞性血管病的病理進(jìn)程中起到關(guān)鍵性作用。同時(shí),同樣作為G蛋白偶聯(lián)受體,血管緊張素II受體與內(nèi)皮素-1受體的胞外環(huán)結(jié)構(gòu)在受體激活過程中扮演著重要角色。血管緊張素II1型（Angiotensin II type 1）和內(nèi)皮素-1 A型（Endothelin-1 type A）受體的抗體被認(rèn)為是免疫介導(dǎo)的閉塞性血管病,如移植排斥反應(yīng)（graft rejection）和系統(tǒng)性硬化癥（SSC）的自身抗體,這些抗體可誘發(fā)強(qiáng)效且長(zhǎng)期的內(nèi)源性配體激活過程。AT1R和ETAR兩種受體有著高度相似的二級(jí)結(jié)構(gòu),這提示在免疫和內(nèi)源性刺激作用于這兩種受體時(shí),很可能存在著不同的作用位點(diǎn)。為了進(jìn)一步研究。AT1R和ETAR兩種受體的單獨(dú)和相互作用機(jī)制,我們將建立一種基于基因工程酵母菌的G蛋白偶聯(lián)受體（GPCR）激活分析模型,在這一模型上,AT1R和ETAR兩種受體可獲得獨(dú)立的表達(dá)。我們將以此為基礎(chǔ)研究免疫刺激對(duì)其受體結(jié)構(gòu)的影響。我們將利用基因定點(diǎn)... 

【文章來(lái)源】：蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 閉塞性血管病變
        1.1.1 臨床表現(xiàn)
        1.1.2 免疫介導(dǎo)的閉塞性血管病病理過程
            1.1.2.1 移植排斥反應(yīng)與閉塞性血管病
            1.1.2.2 閉塞性血管病變與系統(tǒng)性硬化癥（SSC）
    1.2 血管活性肽與閉塞性血管病
        1.2.1 血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）
            1.2.1.1 血管緊張素Ⅱ的生成
            1.2.1.2 血管緊張素Ⅱ與閉塞性血管病變
        1.2.2 內(nèi)皮素-1（ET-1）
            1.2.2.1 內(nèi)皮素-1 的生成
            1.2.2.2 內(nèi)皮素-1（ET-1）與閉塞性血管病變的關(guān)系
    1.3 血管緊張素Ⅱ和內(nèi)皮素-1 的G蛋白偶聯(lián)受體（GPCRs）
        1.3.1 血管緊張素Ⅱ受體
            1.3.1.1 血管緊張素Ⅱ 1 型受體（AT_1R）的結(jié)構(gòu)
            1.3.1.2 AT_1R和其他GPCRs之間的相互作用
        1.3.2 內(nèi)皮素-1 受體
            1.3.2.1 內(nèi)皮素-1 A型受體（ET_AR）的結(jié)構(gòu)
            1.3.2.2 ET_AR和其他GPCRs之間的相互作用
    1.4 在免疫介導(dǎo)的閉塞性血管病變疾病中自身抗體的作用
        1.4.1 器官移植與AT_1R-Abs和ET_AR-Abs間的關(guān)聯(lián)
            1.4.1.1 心臟移植與AT_1R-Abs和ET_AR-Abs
            1.4.1.2 腎臟移植與AT_1R-Abs和ET_AR-Abs
        1.4.2 系統(tǒng)性硬化癥（SSc）與AT_1R-Abs和ET_AR-Abs
    1.5 研究目標(biāo)
第二章 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.0 試劑
        2.1.1 試劑盒
        2.1.2 質(zhì)粒、細(xì)菌和酶
        2.1.3 激動(dòng)劑和拮抗劑
        2.1.4 緩沖溶液配方
        2.1.6 引物設(shè)計(jì)
        2.1.7 培養(yǎng)基
    2.2 方法
        2.2.1 基因定點(diǎn)突變
            2.2.1.1 cDNA片段的PCR擴(kuò)增
            2.2.1.2 載體的構(gòu)建
            2.2.1.3 瓊脂糖凝膠電泳
            2.2.1.4 提純酶切后的載體
            2.2.1.5 將克隆擴(kuò)增的DNA片段插入載體
            2.2.1.6 細(xì)菌轉(zhuǎn)化
            2.2.1.7 質(zhì)粒的小量抽提
            2.2.1.8 DNA測(cè)序和比對(duì)
            2.2.1.9 質(zhì)粒的大量抽提
        2.2.2 G蛋白偶聯(lián)受體激活試驗(yàn)
    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第三章 結(jié)果
    3.1 免疫刺激對(duì)受體結(jié)構(gòu)的影響研究
    3.2 在GPCR激活分析實(shí)驗(yàn)中，人類AT_1和ET_A受體的表達(dá)
    3.3 基因定點(diǎn)突變技術(shù)對(duì)受體胞外第2個(gè)環(huán)（ECL2）交換的結(jié)果分析
    3.4 免疫刺激對(duì)突變受體胞外第2環(huán)（ECL2）的作用效果
第四章 討論
    4.1 主要結(jié)論
    4.2 討論
    4.3 研究不足與展望
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
在學(xué)期間的研究成果
致謝
縮略詞表


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]The angiotensin Ⅱ type 1 receptor and receptor-associated proteins[J]. GUO DENG FU, YU LIN SUN, PAVEL HAMET, TADASHI INAGAMI Research Centre, Hotel-Dieu of CHUM and Department of Medicine, University of Montreal, Montreal, Quebec, Canada H2W 1T8 Department of Biochemistry, Vanderbilt University, School of Medicine, Nashville.  Cell Research. 2001(03)



本文編號(hào)：3239650