目的:探討OSCP蛋白高表達(dá)對(duì)TAC誘導(dǎo)病理性心肌肥厚的影響及作用機(jī)制。方法:構(gòu)建主動(dòng)脈弓收窄術(shù)（TAC）誘導(dǎo)心肌肥厚小鼠模型,術(shù)后三天經(jīng)尾靜脈注射AAV9-cTNT-OSCP/GFP病毒,4周以后做給小鼠做超聲,免疫印跡和實(shí)時(shí)定量PCR分析檢測(cè)OSCP表達(dá)量的變化,采用HE染色、masson染色、天狼星紅染色檢測(cè)組織水平上心肌肥厚程度和纖維化程度。采用OROBOROSOxygraph-2k高分辨率的呼吸測(cè)定儀檢測(cè)各組線粒體氧化呼吸活性。結(jié)果:1.免疫印跡和實(shí)時(shí)定量PCR分析結(jié)果顯示,與正常對(duì)照組相比,TAC小鼠心肌組織中OSCP表達(dá)量明顯降低。2.心肌細(xì)胞特異性高表達(dá)OSCP可以改善心肌肥厚和纖維化:TAC術(shù)后超聲結(jié)果顯示主動(dòng)脈弓縮窄術(shù)注射AAV9-cTNT-GFP病毒組小鼠心臟收縮功能指標(biāo)心臟射血分?jǐn)?shù)和左心室縮短分?jǐn)?shù)相比主動(dòng)脈弓縮窄術(shù)注射AAV9-cTNT-OSCP病毒組明顯下降,而舒張期和收縮期的左心室內(nèi)徑、舒張期和收縮期的左心室容積與主動(dòng)脈弓縮窄術(shù)注射AAV9-cTNT-OSCP病毒組相比均增大。四組小鼠TAC術(shù)后心重/體重、心重/脛骨長(zhǎng)均較假手術(shù)組升高,但與給與GFP對(duì)照病毒... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

動(dòng)物模型設(shè)計(jì)

2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.1 TAC 誘導(dǎo)小鼠心肌肥厚為了確定 TAC 誘導(dǎo)心肌肥厚模型的建立，通過 TAC 術(shù)后 4 周做超聲、組織學(xué)檢查以及檢測(cè)心衰標(biāo)記因子 ANP 等。隨機(jī)將小鼠分為假手術(shù)、TAC 手術(shù)兩組4 周后超聲結(jié)果顯示，與假手術(shù)組相比， TAC 組小鼠 EF%下降到 40%左右，F(xiàn)S%下降到 20%-30%(圖 2A、B、C)。充分說明 TAC 術(shù)后 4 周小鼠心功能不全。

包埋進(jìn)行組織學(xué)檢查，分別采用 HE 染色、masson 染色、天狼星紅染色。與ham 小鼠相比， TAC 4 周后 HE 染色顯示心肌細(xì)胞明顯增大，masson 染色、天星紅染色均可見血管周圍和心肌細(xì)胞明顯纖維化（圖 3）。綜上所述我們可以定 TAC 術(shù)后 4 周小鼠心肌肥厚心衰模型建立成功。


本文編號(hào)：3231794