目的探究Met/HGF蛋白通路抑制細(xì)胞自噬在減輕心肌缺血再灌注損傷中的作用和機(jī)制。方法鼠離體心肌細(xì)胞分為對(duì)照組、缺血再灌注（IR）組、Met轉(zhuǎn)染組、Met siRNA轉(zhuǎn)染組、Met轉(zhuǎn)染+肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（HGF）激活劑組共5組,通過轉(zhuǎn)染的方法使Met過表達(dá)或不表達(dá),進(jìn)行缺血再灌注處理后提取細(xì)胞蛋白,Western blot法檢測(cè)Met、HGF,下游通路蛋白AMPK、PI3K,自噬相關(guān)蛋白LC3B、Beclin-1及凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)水平。結(jié)果 Western blot結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,在Met轉(zhuǎn)染組及HGF激活劑組中,過表達(dá)的Met及HGF的激活能顯著增加下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路蛋白PI3K、AMPK的表達(dá)量（P<0.05）,同時(shí)自噬相關(guān)蛋白LC3B、Beclin-1的表達(dá)量均明顯下降（P<0.05）;而在IR組及Met siRNA轉(zhuǎn)染組中則呈相反趨勢(shì)（P<0.05）。結(jié)論 Met/HGF通路的激活能夠抑制細(xì)胞自噬并減輕心肌細(xì)胞缺血再灌注損傷。 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2017,52(12)北大核心

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Westernblot法檢測(cè)Met、HGF表達(dá)量A:Met;B:HGF;1:對(duì)照組;2:IＲ組;3:siＲNA轉(zhuǎn)染組;4:Met轉(zhuǎn)染組;5:HGF激活劑組;與對(duì)照組比較:*P＜0.05

圖2Westernblot法檢測(cè)AMPK、PI3K表達(dá)量A:AMPK;B:PI3K;1:對(duì)照組;2:IＲ組;3:siＲNA轉(zhuǎn)染組;4:Met轉(zhuǎn)染組;5:HGF激活劑組;與對(duì)照組比較:*P＜0.05圖3Westernblot法檢測(cè)LC3B、Beclin-1表達(dá)量A:LC3B;B:Beclin-1;1:對(duì)照組;2:IＲ組;3:siＲNA轉(zhuǎn)染組;4:Met轉(zhuǎn)染組;5:HGF激活劑組;與對(duì)照組比較:*P＜0.05±0.02、0.85±0.03、0.97±0.03、0.47±0.02、0.47±0.02)，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。提示Met/HGF的表達(dá)增多，下游通路蛋白AMPK、PI3K的大量激活，能在抑制心肌細(xì)胞缺血再灌注中自噬的發(fā)生中產(chǎn)生作用，見圖3。2．4凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2對(duì)凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2的表達(dá)測(cè)定結(jié)果顯示，與對(duì)照組(0.26±0.02)相比，在Met轉(zhuǎn)染組與HGF激活劑組中，起保護(hù)作用的Bcl-2的表達(dá)量同樣會(huì)顯著提升(0.75±0.04、0.78±0.01，P＜0.05)，而IＲ組及siＲNA轉(zhuǎn)染組中，這種蛋白表達(dá)量較低(0.42±0.02、0.41±0.02，P＜0.05)，表明Met/HGF通路激活能夠抑制細(xì)胞自噬的水平，與以上結(jié)果一致，見圖4。3討論HGF/Met能通過抗炎和抗凋亡作用對(duì)組織進(jìn)行保護(hù)，參與多種細(xì)胞的增殖、遷移和形態(tài)發(fā)生［2－3］。既往研究［4］表明，HGF/Met展現(xiàn)出多種生·1816·安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2017Dec;52(12)

圖2Westernblot法檢測(cè)AMPK、PI3K表達(dá)量A:AMPK;B:PI3K;1:對(duì)照組;2:IＲ組;3:siＲNA轉(zhuǎn)染組;4:Met轉(zhuǎn)染組;5:HGF激活劑組;與對(duì)照組比較:*P＜0.05圖3Westernblot法檢測(cè)LC3B、Beclin-1表達(dá)量A:LC3B;B:Beclin-1;1:對(duì)照組;2:IＲ組;3:siＲNA轉(zhuǎn)染組;4:Met轉(zhuǎn)染組;5:HGF激活劑組;與對(duì)照組比較:*P＜0.05±0.02、0.85±0.03、0.97±0.03、0.47±0.02、0.47±0.02)，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。提示Met/HGF的表達(dá)增多，下游通路蛋白AMPK、PI3K的大量激活，能在抑制心肌細(xì)胞缺血再灌注中自噬的發(fā)生中產(chǎn)生作用，見圖3。2．4凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2對(duì)凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2的表達(dá)測(cè)定結(jié)果顯示，與對(duì)照組(0.26±0.02)相比，在Met轉(zhuǎn)染組與HGF激活劑組中，起保護(hù)作用的Bcl-2的表達(dá)量同樣會(huì)顯著提升(0.75±0.04、0.78±0.01，P＜0.05)，而IＲ組及siＲNA轉(zhuǎn)染組中，這種蛋白表達(dá)量較低(0.42±0.02、0.41±0.02，P＜0.05)，表明Met/HGF通路激活能夠抑制細(xì)胞自噬的水平，與以上結(jié)果一致，見圖4。3討論HGF/Met能通過抗炎和抗凋亡作用對(duì)組織進(jìn)行保護(hù)，參與多種細(xì)胞的增殖、遷移和形態(tài)發(fā)生［2－3］。既往研究［4］表明，HGF/Met展現(xiàn)出多種生·1816·安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2017Dec;52(12)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子及其受體c-Met表達(dá)與結(jié)直腸癌同時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的相關(guān)性研究[J]. 孫燕來,李增軍,徐忠法.  中華胃腸外科雜志. 2014 (06)



本文編號(hào)：3231737