目的探究Met/HGF蛋白通路抑制細胞自噬在減輕心肌缺血再灌注損傷中的作用和機制。方法鼠離體心肌細胞分為對照組、缺血再灌注（IR）組、Met轉(zhuǎn)染組、Met siRNA轉(zhuǎn)染組、Met轉(zhuǎn)染+肝細胞生長因子（HGF）激活劑組共5組,通過轉(zhuǎn)染的方法使Met過表達或不表達,進行缺血再灌注處理后提取細胞蛋白,Western blot法檢測Met、HGF,下游通路蛋白AMPK、PI3K,自噬相關(guān)蛋白LC3B、Beclin-1及凋亡蛋白Bcl-2的表達水平。結(jié)果 Western blot結(jié)果顯示,與對照組相比,在Met轉(zhuǎn)染組及HGF激活劑組中,過表達的Met及HGF的激活能顯著增加下游信號轉(zhuǎn)導通路蛋白PI3K、AMPK的表達量（P<0.05）,同時自噬相關(guān)蛋白LC3B、Beclin-1的表達量均明顯下降（P<0.05）;而在IR組及Met siRNA轉(zhuǎn)染組中則呈相反趨勢（P<0.05）。結(jié)論 Met/HGF通路的激活能夠抑制細胞自噬并減輕心肌細胞缺血再灌注損傷。 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學學報. 2017,52(12)北大核心

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【部分圖文】：

Westernblot法檢測Met、HGF表達量A:Met;B:HGF;1:對照組;2:IＲ組;3:siＲNA轉(zhuǎn)染組;4:Met轉(zhuǎn)染組;5:HGF激活劑組;與對照組比較:*P＜0.05

圖2Westernblot法檢測AMPK、PI3K表達量A:AMPK;B:PI3K;1:對照組;2:IＲ組;3:siＲNA轉(zhuǎn)染組;4:Met轉(zhuǎn)染組;5:HGF激活劑組;與對照組比較:*P＜0.05圖3Westernblot法檢測LC3B、Beclin-1表達量A:LC3B;B:Beclin-1;1:對照組;2:IＲ組;3:siＲNA轉(zhuǎn)染組;4:Met轉(zhuǎn)染組;5:HGF激活劑組;與對照組比較:*P＜0.05±0.02、0.85±0.03、0.97±0.03、0.47±0.02、0.47±0.02)，與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。提示Met/HGF的表達增多，下游通路蛋白AMPK、PI3K的大量激活，能在抑制心肌細胞缺血再灌注中自噬的發(fā)生中產(chǎn)生作用，見圖3。2．4凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2對凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2的表達測定結(jié)果顯示，與對照組(0.26±0.02)相比，在Met轉(zhuǎn)染組與HGF激活劑組中，起保護作用的Bcl-2的表達量同樣會顯著提升(0.75±0.04、0.78±0.01，P＜0.05)，而IＲ組及siＲNA轉(zhuǎn)染組中，這種蛋白表達量較低(0.42±0.02、0.41±0.02，P＜0.05)，表明Met/HGF通路激活能夠抑制細胞自噬的水平，與以上結(jié)果一致，見圖4。3討論HGF/Met能通過抗炎和抗凋亡作用對組織進行保護，參與多種細胞的增殖、遷移和形態(tài)發(fā)生［2－3］。既往研究［4］表明，HGF/Met展現(xiàn)出多種生·1816·安徽醫(yī)科大學學報ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2017Dec;52(12)

圖2Westernblot法檢測AMPK、PI3K表達量A:AMPK;B:PI3K;1:對照組;2:IＲ組;3:siＲNA轉(zhuǎn)染組;4:Met轉(zhuǎn)染組;5:HGF激活劑組;與對照組比較:*P＜0.05圖3Westernblot法檢測LC3B、Beclin-1表達量A:LC3B;B:Beclin-1;1:對照組;2:IＲ組;3:siＲNA轉(zhuǎn)染組;4:Met轉(zhuǎn)染組;5:HGF激活劑組;與對照組比較:*P＜0.05±0.02、0.85±0.03、0.97±0.03、0.47±0.02、0.47±0.02)，與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。提示Met/HGF的表達增多，下游通路蛋白AMPK、PI3K的大量激活，能在抑制心肌細胞缺血再灌注中自噬的發(fā)生中產(chǎn)生作用，見圖3。2．4凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2對凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2的表達測定結(jié)果顯示，與對照組(0.26±0.02)相比，在Met轉(zhuǎn)染組與HGF激活劑組中，起保護作用的Bcl-2的表達量同樣會顯著提升(0.75±0.04、0.78±0.01，P＜0.05)，而IＲ組及siＲNA轉(zhuǎn)染組中，這種蛋白表達量較低(0.42±0.02、0.41±0.02，P＜0.05)，表明Met/HGF通路激活能夠抑制細胞自噬的水平，與以上結(jié)果一致，見圖4。3討論HGF/Met能通過抗炎和抗凋亡作用對組織進行保護，參與多種細胞的增殖、遷移和形態(tài)發(fā)生［2－3］。既往研究［4］表明，HGF/Met展現(xiàn)出多種生·1816·安徽醫(yī)科大學學報ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2017Dec;52(12)

【參考文獻】：
期刊論文
[1]肝細胞生長因子及其受體c-Met表達與結(jié)直腸癌同時性肝轉(zhuǎn)移的相關(guān)性研究[J]. 孫燕來,李增軍,徐忠法.  中華胃腸外科雜志. 2014 (06)



本文編號：3231737