發(fā)布時(shí)間：2021-06-13 19:44

　　目的：研究顯示miR-27a/b參與調(diào)控動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis, As）發(fā)生發(fā)展的眾多危險(xiǎn)因素，其在As中的可能機(jī)制已由我們進(jìn)行文獻(xiàn)歸納整理，并發(fā)表在《Atherosclerosis》，基于本研究團(tuán)隊(duì)的工作，我們提出miR-27a/b通過(guò)調(diào)控影響膽固醇流出的關(guān)鍵蛋白ABCA1參與影響As的發(fā)生發(fā)展。因此，本論文擬探討miR-27a/b對(duì)ABCA1的表達(dá)及其介導(dǎo)的膽固醇流出的影響。方法：運(yùn)用生物信息學(xué)的方法對(duì)miR-27a和miR-27b序列的保守性、區(qū)別、存在區(qū)域進(jìn)行分析，并重點(diǎn)分析miR-27a/b與ABCA1的結(jié)合情況（包括保守性、結(jié)合位點(diǎn)、得分、結(jié)合自由能、結(jié)合堿基特征等）；雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)miR-27a/b與ABCA1的結(jié)合情況；轉(zhuǎn)染miR-27a/b mimics或inhibitor，采用qPCR和Western blot檢測(cè)人THP-1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞、小鼠RAW264.7巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞、人HepG2細(xì)胞中ABCA1mRNA和蛋白表達(dá)情況；采用H3標(biāo)記的膽固醇孵育的方法，運(yùn)用液體閃爍計(jì)數(shù)器（liquid scintillation co... 

【文章來(lái)源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】：63 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

膽固醇和脂肪酸代謝示意圖

蛋白等）[13,14]，將 pri-miRNA 加工成長(zhǎng)約 70-100nt 具有莖環(huán)結(jié)構(gòu)的—pre-miRNA，然后在轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 Exportin-5 幫助下經(jīng) Ran-GTP-depen胞漿[14,15]。在細(xì)胞漿中，pre-miRNA 經(jīng)同屬 RNase III 家族的 Dicer 家族的 Ago2 調(diào)節(jié)蛋白加工修飾，形成長(zhǎng)約 22nt 的 microRNA RNA:miRNA*），Dicer 和 Ago2 繼續(xù)將雙鏈體剪切成成熟的單鏈（guidiRNA）和互補(bǔ)鏈（passenger strand 或 microRNA*）。兩條鏈的去向有iRNA 與 Ago 蛋白家族及 GW182/ TNRC6 等其它眾多蛋白組結(jié)合形成的核糖核蛋白沉默復(fù)合體(RNA-induced silencing complex, RISC)，m因動(dòng)力學(xué)不穩(wěn)定，可能由核酸酶或Aog2本身的剪切活性所降解[14-16]（

Fig.3 miR-33 regulate lipid metabolism圖 3 miR-33 調(diào)控脂質(zhì)代謝示意圖：膽固醇酯，F(xiàn)C：游離膽固醇，apoA-I：載脂蛋白 A-I，HDL：高密度脂蛋白，C1：C 型 1 類尼曼-匹克蛋白，ABCA1：三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體 A1，ABCG1：酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體 G1，RIP140：受體相互作用蛋白 140. AMPK: 磷酸腺AMP）激活的蛋白激酶.CROT：肉堿 O 辛基轉(zhuǎn)移酶，HAHDB：羥烷基輔酶氫酶，CPT1A：肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶 I，Exon：外顯子，SREBPF 是 SREBP碼基因。miR-33 的另一個(gè)亞基 miR-33b，與 miR-33a 高度同源，在種子區(qū)域外僅有兩苷酸不同，兩者有許多重疊交錯(cuò)的靶基因，如 ABCA1、ABCG1 等，提示-33b 在膽固醇穩(wěn)態(tài)、脂肪酸氧化、甘油三酯合成方面也發(fā)揮重要作用，但低

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]脂蛋白酯酶研究進(jìn)展及對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的影響[J]. 田國(guó)平,陳五軍,何平平,尹衛(wèi)東,唐朝克.  生理科學(xué)進(jìn)展. 2012(05)
[2]以ABCA1為靶點(diǎn)防治動(dòng)脈粥樣硬化[J]. 唐朝克.  中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志. 2011(11)
[3]microRNAs——脂質(zhì)代謝調(diào)控新機(jī)制[J]. 陳五軍,尹凱,趙國(guó)軍,唐朝克.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2011(09)
[4]亞毒性劑量毒死蜱降低新西蘭兔ABCA1表達(dá)加重高脂誘導(dǎo)的動(dòng)脈粥樣硬化[J]. 周壽紅,楊旭紅,宋濤,吳樹(shù)金,黃寧江,劉立英.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2011(01)
[5]MicroRNA,lncRNA與神經(jīng)退行性疾病[J]. 黃文濤,郭向前,戴甲培,陳潤(rùn)生.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2010(08)
[6]三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G1的研究進(jìn)展[J]. 劉協(xié)紅,唐朝克.  生理科學(xué)進(jìn)展. 2009(03)
[7]ABCA1與NPC1在細(xì)胞內(nèi)膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)中的作用[J]. 李曉旭,唐朝克.  生命的化學(xué). 2008(05)
[8]肝X受體激動(dòng)劑通過(guò)上調(diào)NPC1基因的表達(dá)減輕apoE基因敲除小鼠動(dòng)脈粥樣硬化病變程度[J]. 歐翔,代小艷,龍治峰,唐雅玲,曹冬黎,郝新瑞,胡炎偉,李曉旭,唐朝克.  中國(guó)科學(xué)（C輯:生命科學(xué)）. 2008(04)
[9]三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1研究的最新進(jìn)展[J]. 胡炎偉,唐朝克.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2008(04)
[10]過(guò)氧化體增殖物激活型受體γ和δ在高密度脂蛋白介導(dǎo)細(xì)胞膽固醇流出中的作用[J]. 易光輝,楊永宗,唐朝克,米五平,王燕,危當(dāng)恒.  中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志. 2003(04)

碩士論文
[1]miR-27b通過(guò)靶向于PPARγ觸發(fā)脂肪細(xì)胞分化[D]. 吳宗松.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2009



本文編號(hào)：3228203