深靜脈血栓形成（DVT）指血液在靜脈內(nèi)異常凝結(jié),致使部分或完全阻塞官腔,造成重要器官栓塞,嚴(yán)重時(shí)威脅生命。DVT受多因素和復(fù)雜機(jī)制調(diào)控,涉及內(nèi)皮細(xì)胞、血小板、白細(xì)胞三者之間的相互作用,它們的形態(tài)、功能變化,維持著局部靜脈內(nèi)皮微環(huán)境的動(dòng)態(tài)平衡,決定著微環(huán)境是否向有利于血栓形成的方向發(fā)展,對(duì)凝血級(jí)聯(lián)反應(yīng)的觸發(fā)起關(guān)鍵作用。然而,對(duì)疾病進(jìn)展的分子病理生理學(xué)和機(jī)制仍知之甚少。Fgf23是一種骨源性磷尿激素,可能成為識(shí)別DVT患者的有用生物標(biāo)志物,其與心血管、炎癥和免疫相關(guān)。我們通過統(tǒng)計(jì)、動(dòng)物組織實(shí)驗(yàn)和生物信息學(xué)進(jìn)行多維數(shù)據(jù)分析。在研究樣本中,D組（n=3）靜脈內(nèi)皮樣本中的Fgf23表達(dá)較C組（n=3）有明顯降低,血栓濕重及長度也都明顯降低,其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。通過對(duì)Fgf23的研究,可能會(huì)對(duì)DVT的病理生理學(xué)產(chǎn)生新的生物學(xué)見解。并完善我們目前對(duì)DVT的理解和患者的管理。[目 的]1、小鼠Fgf23的表達(dá)是否對(duì)深靜脈血栓的形成有影響。2、在小鼠上Klf15是否調(diào)控Fgf23基因的表達(dá)。3、Klf15是否通過影響Fgf23的表達(dá)進(jìn)而調(diào)控DVT的形成。[方 法]實(shí)驗(yàn)一:狹窄法構(gòu)建... 

【文章來源】：昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖４鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Ｆｇｆ２３的表達(dá)變化??ｕｒ．Ｅｒｏｎ?ｏｎｕｓｅｎｅｏｒ?ｖｎａｖａ?ｅｎｃｅｓ??

ｗｅｉｇｈ??ｖｖｅｉｇｈｔ／ｌｅｎｇｔｈ??２０－．?Ｉ—＾??ｅ?ｈ＾Ｈ??Ｉ１５＇?—麵?ｒ°＂?＿?＿ｕ．??＊?：ｌＩＬ?１１１?ｉ??，女?／?／?，＃?／，??＜／??圖５．組小鼠血栓濕重、濕重長度比??Ｆｉｇｕｒｅ?５．?Ｗｅｔ?ｗｅｉｇｈｔ?ａｎｄ?ｗｅｔ?ｗｅｉｇｈｔ／ｌｅｎｇｔｈ?ｏｆ?ｍｉｃｅ?ｔｈｒｏｍｂｕｓ??實(shí)驗(yàn)二：狹窄法構(gòu)建Ｋｉｎ?５基因敲除Ｃ５７ＢＬ／６純合子小鼠深靜脈血栓形成??模型，利用ｒｃａＨｉｍｃ－ＰＣＲ、ｑＰＣＲ檢測(cè)下游Ｆｇｆ２３表達(dá)變化。??材料和方法??本課題組前期研宂發(fā)現(xiàn)，在小鼠ＤＶＴ梭型屮千擾Ｋｌｆｌ５表達(dá)后，靜脈內(nèi)皮??細(xì)胞Ｋｌｌ＇１５表達(dá)明Ｗ．卜＇降，相關(guān)分子如Ａｎｋｒｄｌ、Ｆｇｆ２３、丨Ｌ－１Ｐ、Ｍｍｐ－９等表達(dá)??隨之變化，而血栓形成叫顯增加，提示ＫＵ＇１５?ｈ『能迎過調(diào)控下游蕋因的農(nóng)達(dá)來調(diào)??擰血柃的形成。木實(shí)驗(yàn)將繼續(xù)在在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，通過靜脈注射Ｆｇｆ２３－ｓｉＲＮＡ?｜?？??擾Ｋｌｆｌ５基函敲除Ｃ５７ＢＬ／６純合子小鼠中的Ｆｇｆ２３基因表達(dá)，采用ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ－ＰＣＲ、??ｑＰＣＲ檢測(cè)卜＇游Ｆｇｆ２３農(nóng)達(dá)免化。??１、實(shí)驗(yàn)材料??１．１實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選娶飼養(yǎng)??昆叨醫(yī)科大學(xué)ＳＰＦ級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房購買ＫＨ＇１５基因敲除Ｃ５７ＢＬ／６純合子小鼠??（Ｃ５７ＢＬ／６－Ｋｌｆｌ５－／－）?１２?只，Ｃ５７ＢＬ／６?野生型小鼠?３?只，共?１５?只，ＳＰＦ?飼養(yǎng)，??分４籠，純合子每籠４只，野生型每籠３只；體重１７－２０克，雌雄不限，隨機(jī)分??組，予以滅菌瓜子及標(biāo)準(zhǔn)飼料混合飼養(yǎng)，飼養(yǎng)小鼠房間要求恒溫２２？２６°Ｃ，濕??３３??

ＮＡ－ＫＯ－２?１１?１９．４２?２５．?１４?２．?９６３２１５６??Ｆｇｆ２３－ｓｉＲＮＡ－ＫＯ－３?１２?１８．?５３?２６．９２?４．?５３２１５４９??ＤＶＴ－ＷＴ－１?１３?１８．７４?２４．?５８?５．?２１６３２５３??ＤＶＴ－ＷＴ－２?１４?１９．７８?２４．１１?６．?２１５３６５４??ＤＶＴ－ＷＴ－３?１５?１９．２９?２５．?９５?６．２５１３６５９??１０－．?＊?１??Ｓ）?８－?Ｔ?丁??Ｈｉ．??Ｃ＾°??圖７．小鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Ｆｇｆ２３的表達(dá)變化??Ｆｉｇｕｒｅ?７．ｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?Ｆｇｆ２３?ｉｎ?ｍｉｃｅ?ｉｎｆｅｒｉｏｒ?ｖｅｎａ?ｃａｖａ?ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ?ｃｅｌｌｓ??４小鼠血栓濕重、長度、濕重長度比??將所有分組內(nèi)全部小鼠用頸椎脫臼法處死后，分離小鼠下腔靜脈成栓段血??管，仔細(xì)分離血栓并編號(hào)計(jì)數(shù)；用精密電子天秤稱重、電子游標(biāo)卡尺測(cè)量長度。??各組小鼠血栓濕重、長度、濕重／長度均采用單因素方差分析，兩兩進(jìn)行組間比??較。Ａ組小鼠未經(jīng)造模，均未成栓。Ｂ組、Ｃ組、Ｄ組、Ｅ組血栓濕重分別為??１７．?８０±３．８０、１８．?５２±４．?１３、４．?７２土?１．８１、１４．?８０±３．?８０。Ｄ?組與?Ｃ?組血栓濕重??４０??


本文編號(hào)：3219653