發(fā)布時間：2021-06-09 01:43

　　深靜脈血栓形成（DVT）指血液在靜脈內(nèi)異常凝結(jié),致使部分或完全阻塞官腔,造成重要器官栓塞,嚴重時威脅生命。DVT受多因素和復雜機制調(diào)控,涉及內(nèi)皮細胞、血小板、白細胞三者之間的相互作用,它們的形態(tài)、功能變化,維持著局部靜脈內(nèi)皮微環(huán)境的動態(tài)平衡,決定著微環(huán)境是否向有利于血栓形成的方向發(fā)展,對凝血級聯(lián)反應的觸發(fā)起關(guān)鍵作用。然而,對疾病進展的分子病理生理學和機制仍知之甚少。Fgf23是一種骨源性磷尿激素,可能成為識別DVT患者的有用生物標志物,其與心血管、炎癥和免疫相關(guān)。我們通過統(tǒng)計、動物組織實驗和生物信息學進行多維數(shù)據(jù)分析。在研究樣本中,D組（n=3）靜脈內(nèi)皮樣本中的Fgf23表達較C組（n=3）有明顯降低,血栓濕重及長度也都明顯降低,其差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。通過對Fgf23的研究,可能會對DVT的病理生理學產(chǎn)生新的生物學見解。并完善我們目前對DVT的理解和患者的管理。[目 的]1、小鼠Fgf23的表達是否對深靜脈血栓的形成有影響。2、在小鼠上Klf15是否調(diào)控Fgf23基因的表達。3、Klf15是否通過影響Fgf23的表達進而調(diào)控DVT的形成。[方 法]實驗一:狹窄法構(gòu)建... 

【文章來源】：昆明醫(yī)科大學云南省

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖４鼠下腔靜脈內(nèi)皮細胞Ｆｇｆ２３的表達變化??ｕｒ．Ｅｒｏｎ?ｏｎｕｓｅｎｅｏｒ?ｖｎａｖａ?ｅｎｃｅｓ??

ｗｅｉｇｈ??ｖｖｅｉｇｈｔ／ｌｅｎｇｔｈ??２０－．?Ｉ—＾??ｅ?ｈ＾Ｈ??Ｉ１５＇?—麵?ｒ°＂?＿?＿ｕ．??＊?：ｌＩＬ?１１１?ｉ??，女?／?／?，＃?／，??＜／??圖５．組小鼠血栓濕重、濕重長度比??Ｆｉｇｕｒｅ?５．?Ｗｅｔ?ｗｅｉｇｈｔ?ａｎｄ?ｗｅｔ?ｗｅｉｇｈｔ／ｌｅｎｇｔｈ?ｏｆ?ｍｉｃｅ?ｔｈｒｏｍｂｕｓ??實驗二：狹窄法構(gòu)建Ｋｉｎ?５基因敲除Ｃ５７ＢＬ／６純合子小鼠深靜脈血栓形成??模型，利用ｒｃａＨｉｍｃ－ＰＣＲ、ｑＰＣＲ檢測下游Ｆｇｆ２３表達變化。??材料和方法??本課題組前期研宂發(fā)現(xiàn)，在小鼠ＤＶＴ梭型屮千擾Ｋｌｆｌ５表達后，靜脈內(nèi)皮??細胞Ｋｌｌ＇１５表達明Ｗ．卜＇降，相關(guān)分子如Ａｎｋｒｄｌ、Ｆｇｆ２３、丨Ｌ－１Ｐ、Ｍｍｐ－９等表達??隨之變化，而血栓形成叫顯增加，提示ＫＵ＇１５?ｈ『能迎過調(diào)控下游蕋因的農(nóng)達來調(diào)??擰血柃的形成。木實驗將繼續(xù)在在動物實驗中，通過靜脈注射Ｆｇｆ２３－ｓｉＲＮＡ?｜?？??擾Ｋｌｆｌ５基函敲除Ｃ５７ＢＬ／６純合子小鼠中的Ｆｇｆ２３基因表達，采用ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ－ＰＣＲ、??ｑＰＣＲ檢測卜＇游Ｆｇｆ２３農(nóng)達免化。??１、實驗材料??１．１實驗動物選娶飼養(yǎng)??昆叨醫(yī)科大學ＳＰＦ級實驗動物房購買ＫＨ＇１５基因敲除Ｃ５７ＢＬ／６純合子小鼠??（Ｃ５７ＢＬ／６－Ｋｌｆｌ５－／－）?１２?只，Ｃ５７ＢＬ／６?野生型小鼠?３?只，共?１５?只，ＳＰＦ?飼養(yǎng)，??分４籠，純合子每籠４只，野生型每籠３只；體重１７－２０克，雌雄不限，隨機分??組，予以滅菌瓜子及標準飼料混合飼養(yǎng)，飼養(yǎng)小鼠房間要求恒溫２２？２６°Ｃ，濕??３３??

ＮＡ－ＫＯ－２?１１?１９．４２?２５．?１４?２．?９６３２１５６??Ｆｇｆ２３－ｓｉＲＮＡ－ＫＯ－３?１２?１８．?５３?２６．９２?４．?５３２１５４９??ＤＶＴ－ＷＴ－１?１３?１８．７４?２４．?５８?５．?２１６３２５３??ＤＶＴ－ＷＴ－２?１４?１９．７８?２４．１１?６．?２１５３６５４??ＤＶＴ－ＷＴ－３?１５?１９．２９?２５．?９５?６．２５１３６５９??１０－．?＊?１??Ｓ）?８－?Ｔ?丁??Ｈｉ．??Ｃ＾°??圖７．小鼠下腔靜脈內(nèi)皮細胞Ｆｇｆ２３的表達變化??Ｆｉｇｕｒｅ?７．ｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?Ｆｇｆ２３?ｉｎ?ｍｉｃｅ?ｉｎｆｅｒｉｏｒ?ｖｅｎａ?ｃａｖａ?ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ?ｃｅｌｌｓ??４小鼠血栓濕重、長度、濕重長度比??將所有分組內(nèi)全部小鼠用頸椎脫臼法處死后，分離小鼠下腔靜脈成栓段血??管，仔細分離血栓并編號計數(shù)；用精密電子天秤稱重、電子游標卡尺測量長度。??各組小鼠血栓濕重、長度、濕重／長度均采用單因素方差分析，兩兩進行組間比??較。Ａ組小鼠未經(jīng)造模，均未成栓。Ｂ組、Ｃ組、Ｄ組、Ｅ組血栓濕重分別為??１７．?８０±３．８０、１８．?５２±４．?１３、４．?７２土?１．８１、１４．?８０±３．?８０。Ｄ?組與?Ｃ?組血栓濕重??４０??


本文編號：3219653