背景:心肌梗死（Myocardial Infarction,MI）是一種嚴(yán)重威脅我們生命的缺血性心臟病,大量研究證明炎癥反應(yīng)誘導(dǎo)細(xì)胞壞死、自噬和/或凋亡為其可能的發(fā)病機(jī)制之一。IL-6/STAT3信號(hào)通路作為一條重要的炎癥反應(yīng)通路,STAT3表達(dá)的變化在心肌梗死中的作用尚存在爭(zhēng)議。高同型半胱氨酸（Homocysteine,Hcy）是心腦血管疾病的危險(xiǎn)因素之一,高同型半胱氨酸與IL-6/STAT3信號(hào)通路、心肌缺血的影響還未有相關(guān)報(bào)道。目的:本研究主要探討缺血環(huán)境下Hcy對(duì)H9c2細(xì)胞系P-STAT3、Caspase-3及IL-6表達(dá)的影響,以及對(duì)細(xì)胞形態(tài)的影響。方法:本實(shí)驗(yàn)將H9c2細(xì)胞系培養(yǎng)于含0%FBS培養(yǎng)基中,在其對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期時(shí)加入不同濃度Hcy作用不同時(shí)間,通過(guò)蛋白免疫印跡法（Western Blot）、免疫熒光染色法等方法檢測(cè)各組P-STAT3、Caspase-3的表達(dá)情況。然后同時(shí)加入雷洛昔芬（Raloxifene）和Hcy處理,并用qRT-PCR及上述同樣的方法檢測(cè)各組P-STAT3、Caspase-3以及IL-6的表達(dá)情況。結(jié)果:Western Blot結(jié)果顯示:1.0%... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

炎癥因子在ACS中的機(jī)制圖

華 中 科 技 大 學(xué) 碩 士 學(xué) 位 論 文5.結(jié)果5.1 Hcy 誘導(dǎo)缺血的 H9c2 細(xì)胞系 P-STAT3、Caspase-3 表達(dá)增加，且與作用時(shí)間相在含 0%FBS 的培養(yǎng)基（模擬缺血條件）內(nèi)培養(yǎng) H9c2 細(xì)胞系，然后加入 6mM H誘導(dǎo)一定時(shí)間（0、1、2、4、6、8h）后，分別收集細(xì)胞蛋白，采用 Western Blot 檢P-STAT3 和 Caspase-3 的表達(dá)情況。Western Blot 結(jié)果如圖所示（圖 3）。隨著 Hcy 作用時(shí)間延長(zhǎng)，P-STAT3 的表達(dá)逐漸增加，于 6h 時(shí)表達(dá)最強(qiáng)，但 8h 表達(dá)較前下降。隨著 Hcy 作用時(shí)間延長(zhǎng)，Caspase-3 的表達(dá)隨時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸增加6h 時(shí)表達(dá)明顯增加，但 8h 時(shí)并無(wú)明顯改變。

5.3 雷洛昔芬（Raloxifene）可抑制 Hcy 誘導(dǎo)的缺血 H9c2 細(xì)胞系 P-STAT3 和 Caspase-3的高表達(dá)在含 0%FBS 的培養(yǎng)基（模擬缺血條件）內(nèi)培養(yǎng) H9c2 細(xì)胞系，將細(xì)胞分為四組：1）Control 組；2）Hcy 組：6mM Hcy 單獨(dú)作用 6h；3）Raloxifene 組：6.25mM Raloxifene單獨(dú)作用 6h；4）Hcy+Raloxifene 組：6.25mM Raloxifene 及 6mM Hcy 共同作用 6h。處理完畢后分別收集細(xì)胞蛋白，采用 Western Blot 檢測(cè)各組 P-STAT3 和 Caspase-3 的表達(dá)情況。Western Blot 結(jié)果如圖所示（圖 5）。


本文編號(hào)：3218344