一、研究背景隨著全球人口老齡化趨勢以及人群生活方式、環(huán)境等的改變，心血管疾病發(fā)病率日趨增加，心血管疾病已經(jīng)成為危害人類健康的主要疾病之一，明確心血管疾病的發(fā)生發(fā)展機(jī)制對其防治具有重要意義。血管平滑肌細(xì)胞（Vascular smooth muscle cells,VSMCs）異常增殖是心血管疾病關(guān)鍵性病理生理機(jī)制之一。正常狀態(tài)下，VSMCs存在于血管壁中膜，在動(dòng)脈粥樣硬化（Atherosclerosis, AS）等疾病狀態(tài)下，VSMCs能夠從中膜遷移至內(nèi)膜，并出現(xiàn)異常增殖，導(dǎo)致血管內(nèi)膜的增厚與管腔狹窄。然而，VSMCs增殖的機(jī)制尚未完全闡明，深入研究VSMCs的增殖機(jī)制，并以此尋找潛在的治療靶點(diǎn)，具有重要的臨床意義。近年來研究顯示炎癥與心血管疾病密切相關(guān)。心血管疾病被認(rèn)為是一種慢性低級別炎癥或稱亞臨床炎癥狀態(tài)，炎癥在心血管疾病的發(fā)生、發(fā)展以及進(jìn)一步造成靶器官損害的過程中起著重要的作用。單核/巨噬細(xì)胞是炎癥介質(zhì)的主要來源細(xì)胞，既往研究表明單核/巨噬細(xì)胞參與VSMCs增殖。機(jī)體受到炎癥刺激后，激活血液中的單核/巨噬細(xì)胞，生成并釋放多種細(xì)胞毒素，導(dǎo)致血管內(nèi)皮損傷，內(nèi)皮基質(zhì)暴露，繼而誘導(dǎo)血小板的... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

以上過程均在無菌條件下進(jìn)行，在收集其最終沉淀物后使用100μlPBS重懸，放

圖 2-2 EVs 電鏡形態(tài)（1） 在透射電鏡中我們可以發(fā)現(xiàn) EVs 為磷脂雙分子層的類圓形微顆 THP-1 EVs 質(zhì)膜負(fù)染成黑色，直徑范圍約為 30nm 至 1μm。EVs xosmoes）、微泡（Microvesicles）或微粒（Microparticles），但目前不進(jìn)行嚴(yán)格的區(qū)分[1]。上圖綠色箭頭：外泌體（直徑 30nm-100nm）上圖紅色箭頭：微粒（直徑 100-1000nm）（2）同時(shí) EVs 中發(fā)現(xiàn)有顏色較深的背景，考慮為 EVs 所攜帶的內(nèi)容2.2.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞 EVs 形態(tài)學(xué) der Pol E, B ing AN, Harrison P, et al. Classification, functions, and clinical relevance of extracel

圖 2-3 流式細(xì)胞觀察 EVs 形態(tài)學(xué)分析顯示：如圖 2-3，紅色框內(nèi)為 THP-1 細(xì)胞分泌的在前角散射(forward scatter, FSC)觀察到細(xì)胞 EVs 的直scatter, SSC)顯示其 EVs 內(nèi)部含有與同細(xì)胞類似的結(jié)構(gòu)細(xì)胞 EVs 形態(tài)與結(jié)構(gòu)。印跡檢測微泡分子標(biāo)志物 EVs 是否來源于單核細(xì)胞圖 2-4 單核細(xì)胞特異性表達(dá)Vs 中有單核細(xì)胞特異性 CD14 的表達(dá)，提示該 EVs 來 EVs 的特異性分子標(biāo)志物單核細(xì)胞 1640 培養(yǎng)基 EVsCD14 63KD


本文編號：3216513