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急性心肌梗死患者血漿外泌體miRNA微陣列表達譜研究

發(fā)布時間:2021-05-12 16:32
  背景與目的:穩(wěn)定性冠心。⊿table Coronary Artery Disease,SCAD)是冠心病(Coronary Heart Disease,CHD)中最常見的類型,而SCAD穩(wěn)定斑塊的失穩(wěn)定極易導致急性心肌梗死(Acute Myocardial Infarction,AMI)的發(fā)生,且預后較差。外泌體(Exosome)是由多種活細胞分泌的納米級囊泡,并且通過轉(zhuǎn)移微小RNA(miRNA)等生物分子介導著細胞間的信號交流。由于外泌體具有脂質(zhì)雙層結構,使得miRNA等分子能夠穩(wěn)定存在于人體內(nèi)絕大部分的體液中。本研究初步探討血漿外泌體miRNA對SCAD進展為AMI早期預測的價值。材料方法:(1)選擇6例(3男3女)AMI患者及6例(3男3女)SCAD患者進行血漿外泌體miRNA提取,并對所有超速離心提取的外泌體進行透射電鏡觀察、蛋白質(zhì)印跡和nanosight來明確外泌體的純化效果。(2)對所選樣本進行miRNA微陣列分析,并且進一步采用GeneOntology(GO)及一些經(jīng)典通路對具有顯著表達差異(p<0.05)外泌體miRNA的靶基因功能進行預測。(3)我們根據(jù)芯片分... 

【文章來源】:寧波大學浙江省

【文章頁數(shù)】:56 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
1 材料與方法
    1.1 研究對象入組及血標本采集
        1.1.1 研究對象入組標準
        1.1.2 外周血標本采集
    1.2 超速離心法提取血漿外泌體及特征鑒定
        1.2.1 血漿外泌體超速離心法提取
        1.2.2 血漿外泌體的鑒定
    1.3 外泌體RNA提取及miRN 表達譜分析
        1.3.1 RNA提取,標記和雜交
        1.3.2 miRNA表達譜分析
    1.4 外泌體mRNA靶基因的預測及功能富集分析、通路富集分析
    1.5 qPCR驗證外泌體miRNA芯片結果
    1.6 統(tǒng)計學分析
2 結果
    2.1 基本情況
    2.2 外泌體鑒定結果
    2.3 外泌體miRNA微陣列分析結果
    2.4 外泌體miRNA靶基因預測及功能富集分析、通路富集分析結果
    2.5 qPCR驗證miRNA-1915-3p、miRNA-4507和miRNA-3656結果
    2.6 AMI 患者血漿外泌體miRNA與臨床特征的相關性分析結果
3 討論
    3.1 AMI患者血漿外泌體miRNA表達譜的改變
    3.2 外泌體miRNA作為AMI的生物標志物
    3.3 miRNA-1915-3p、miRNA-4507和miRNA-3656在AMI中的作用
    3.4 外泌體miRNA靶基因功能、信號通路分析
        3.4.1 RAS信號通路和心臟重構/心臟修復
        3.4.2 MAPK信號通路和心臟重構/心臟修復
        3.4.3 Wnt信號通路和心臟重構/心臟修復
        3.4.4 神經(jīng)生長因子信號通路和心臟重構/心臟修復
        3.4.5 活化成纖維細胞生長因子受體家族下游信號通路和心臟重構/心臟修復
    3.5 血漿外泌體形態(tài)和直徑分布
4 結論
5 創(chuàng)新與不足
參考文獻


【參考文獻】:
期刊論文
[1]急性心肌梗死患者血清miR-208對血小板功能、炎癥反應及心肌損傷程度的影響[J]. 曾德銀,劉茜.  海南醫(yī)學院學報. 2018(06)
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[10]穩(wěn)定性冠心病診治策略的選擇:歐美指南給我們的提示[J]. 張永珍,高煒.  北京大學學報(醫(yī)學版). 2014(06)



本文編號:3183746

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