急性心肌梗死患者血漿外泌體miRNA微陣列表達譜研究
發(fā)布時間:2021-05-12 16:32
背景與目的:穩(wěn)定性冠心。⊿table Coronary Artery Disease,SCAD)是冠心病(Coronary Heart Disease,CHD)中最常見的類型,而SCAD穩(wěn)定斑塊的失穩(wěn)定極易導致急性心肌梗死(Acute Myocardial Infarction,AMI)的發(fā)生,且預后較差。外泌體(Exosome)是由多種活細胞分泌的納米級囊泡,并且通過轉(zhuǎn)移微小RNA(miRNA)等生物分子介導著細胞間的信號交流。由于外泌體具有脂質(zhì)雙層結構,使得miRNA等分子能夠穩(wěn)定存在于人體內(nèi)絕大部分的體液中。本研究初步探討血漿外泌體miRNA對SCAD進展為AMI早期預測的價值。材料方法:(1)選擇6例(3男3女)AMI患者及6例(3男3女)SCAD患者進行血漿外泌體miRNA提取,并對所有超速離心提取的外泌體進行透射電鏡觀察、蛋白質(zhì)印跡和nanosight來明確外泌體的純化效果。(2)對所選樣本進行miRNA微陣列分析,并且進一步采用GeneOntology(GO)及一些經(jīng)典通路對具有顯著表達差異(p<0.05)外泌體miRNA的靶基因功能進行預測。(3)我們根據(jù)芯片分...
【文章來源】:寧波大學浙江省
【文章頁數(shù)】:56 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
1 材料與方法
1.1 研究對象入組及血標本采集
1.1.1 研究對象入組標準
1.1.2 外周血標本采集
1.2 超速離心法提取血漿外泌體及特征鑒定
1.2.1 血漿外泌體超速離心法提取
1.2.2 血漿外泌體的鑒定
1.3 外泌體RNA提取及miRN 表達譜分析
1.3.1 RNA提取,標記和雜交
1.3.2 miRNA表達譜分析
1.4 外泌體mRNA靶基因的預測及功能富集分析、通路富集分析
1.5 qPCR驗證外泌體miRNA芯片結果
1.6 統(tǒng)計學分析
2 結果
2.1 基本情況
2.2 外泌體鑒定結果
2.3 外泌體miRNA微陣列分析結果
2.4 外泌體miRNA靶基因預測及功能富集分析、通路富集分析結果
2.5 qPCR驗證miRNA-1915-3p、miRNA-4507和miRNA-3656結果
2.6 AMI 患者血漿外泌體miRNA與臨床特征的相關性分析結果
3 討論
3.1 AMI患者血漿外泌體miRNA表達譜的改變
3.2 外泌體miRNA作為AMI的生物標志物
3.3 miRNA-1915-3p、miRNA-4507和miRNA-3656在AMI中的作用
3.4 外泌體miRNA靶基因功能、信號通路分析
3.4.1 RAS信號通路和心臟重構/心臟修復
3.4.2 MAPK信號通路和心臟重構/心臟修復
3.4.3 Wnt信號通路和心臟重構/心臟修復
3.4.4 神經(jīng)生長因子信號通路和心臟重構/心臟修復
3.4.5 活化成纖維細胞生長因子受體家族下游信號通路和心臟重構/心臟修復
3.5 血漿外泌體形態(tài)和直徑分布
4 結論
5 創(chuàng)新與不足
參考文獻
【參考文獻】:
期刊論文
[1]急性心肌梗死患者血清miR-208對血小板功能、炎癥反應及心肌損傷程度的影響[J]. 曾德銀,劉茜. 海南醫(yī)學院學報. 2018(06)
[2]氯吡格雷與阿托伐他汀對急性心肌梗死患者的療效及其對血小板各指標和半胱氨酸代謝的影響[J]. 李煥昌. 抗感染藥學. 2018(01)
[3]《中國心血管病報告2017》概要[J]. 陳偉偉,高潤霖,劉力生,朱曼璐,王文,王擁軍,吳兆蘇,李惠君,顧東風,楊躍進,鄭哲,蔣立新,胡盛壽. 中國循環(huán)雜志. 2018(01)
[4]外泌體源性微小RNA在疾病診治中的研究現(xiàn)狀[J]. 李漢成,周玉婷,李嬋,區(qū)錦瑩,莫志賢. 中國臨床藥理學雜志. 2017(24)
[5]外泌體生成和分泌機制的研究進展[J]. 趙越,王超,陳和忠. 解放軍醫(yī)學雜志. 2017(12)
[6]補充外源性神經(jīng)生長因子對大鼠心肌梗死后延遲再灌注的影響[J]. 劉洋,張紹敏,孫春麗,吳錦暉. 生物醫(yī)學工程學雜志. 2015(06)
[7]硝酸異戊酯與硝酸甘油在老年急性心肌梗死患者急救治療中的應用效果比較[J]. 康忠良. 實用心腦肺血管病雜志. 2015(12)
[8]穩(wěn)定性冠心病治療策略進展[J]. 劉如,袁晉青. 中國介入心臟病學雜志. 2015(03)
[9]不穩(wěn)定型心絞痛患者循環(huán)microRNA對神經(jīng)生長因子通路的靶向調(diào)節(jié)作用及其功能調(diào)控網(wǎng)絡[J]. 李晶津,陳紅,任景怡. 北京大學學報(醫(yī)學版). 2014(06)
[10]穩(wěn)定性冠心病診治策略的選擇:歐美指南給我們的提示[J]. 張永珍,高煒. 北京大學學報(醫(yī)學版). 2014(06)
本文編號:3183746
【文章來源】:寧波大學浙江省
【文章頁數(shù)】:56 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
1 材料與方法
1.1 研究對象入組及血標本采集
1.1.1 研究對象入組標準
1.1.2 外周血標本采集
1.2 超速離心法提取血漿外泌體及特征鑒定
1.2.1 血漿外泌體超速離心法提取
1.2.2 血漿外泌體的鑒定
1.3 外泌體RNA提取及miRN 表達譜分析
1.3.1 RNA提取,標記和雜交
1.3.2 miRNA表達譜分析
1.4 外泌體mRNA靶基因的預測及功能富集分析、通路富集分析
1.5 qPCR驗證外泌體miRNA芯片結果
1.6 統(tǒng)計學分析
2 結果
2.1 基本情況
2.2 外泌體鑒定結果
2.3 外泌體miRNA微陣列分析結果
2.4 外泌體miRNA靶基因預測及功能富集分析、通路富集分析結果
2.5 qPCR驗證miRNA-1915-3p、miRNA-4507和miRNA-3656結果
2.6 AMI 患者血漿外泌體miRNA與臨床特征的相關性分析結果
3 討論
3.1 AMI患者血漿外泌體miRNA表達譜的改變
3.2 外泌體miRNA作為AMI的生物標志物
3.3 miRNA-1915-3p、miRNA-4507和miRNA-3656在AMI中的作用
3.4 外泌體miRNA靶基因功能、信號通路分析
3.4.1 RAS信號通路和心臟重構/心臟修復
3.4.2 MAPK信號通路和心臟重構/心臟修復
3.4.3 Wnt信號通路和心臟重構/心臟修復
3.4.4 神經(jīng)生長因子信號通路和心臟重構/心臟修復
3.4.5 活化成纖維細胞生長因子受體家族下游信號通路和心臟重構/心臟修復
3.5 血漿外泌體形態(tài)和直徑分布
4 結論
5 創(chuàng)新與不足
參考文獻
【參考文獻】:
期刊論文
[1]急性心肌梗死患者血清miR-208對血小板功能、炎癥反應及心肌損傷程度的影響[J]. 曾德銀,劉茜. 海南醫(yī)學院學報. 2018(06)
[2]氯吡格雷與阿托伐他汀對急性心肌梗死患者的療效及其對血小板各指標和半胱氨酸代謝的影響[J]. 李煥昌. 抗感染藥學. 2018(01)
[3]《中國心血管病報告2017》概要[J]. 陳偉偉,高潤霖,劉力生,朱曼璐,王文,王擁軍,吳兆蘇,李惠君,顧東風,楊躍進,鄭哲,蔣立新,胡盛壽. 中國循環(huán)雜志. 2018(01)
[4]外泌體源性微小RNA在疾病診治中的研究現(xiàn)狀[J]. 李漢成,周玉婷,李嬋,區(qū)錦瑩,莫志賢. 中國臨床藥理學雜志. 2017(24)
[5]外泌體生成和分泌機制的研究進展[J]. 趙越,王超,陳和忠. 解放軍醫(yī)學雜志. 2017(12)
[6]補充外源性神經(jīng)生長因子對大鼠心肌梗死后延遲再灌注的影響[J]. 劉洋,張紹敏,孫春麗,吳錦暉. 生物醫(yī)學工程學雜志. 2015(06)
[7]硝酸異戊酯與硝酸甘油在老年急性心肌梗死患者急救治療中的應用效果比較[J]. 康忠良. 實用心腦肺血管病雜志. 2015(12)
[8]穩(wěn)定性冠心病治療策略進展[J]. 劉如,袁晉青. 中國介入心臟病學雜志. 2015(03)
[9]不穩(wěn)定型心絞痛患者循環(huán)microRNA對神經(jīng)生長因子通路的靶向調(diào)節(jié)作用及其功能調(diào)控網(wǎng)絡[J]. 李晶津,陳紅,任景怡. 北京大學學報(醫(yī)學版). 2014(06)
[10]穩(wěn)定性冠心病診治策略的選擇:歐美指南給我們的提示[J]. 張永珍,高煒. 北京大學學報(醫(yī)學版). 2014(06)
本文編號:3183746
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